Способ получения магнитных полиакриламидных гранул

Способ получения магнитных полиакриламидных гранул путем диспергирования водной фазы, включающей желатину, окись железа, акриламид, в присутствии эмульгатора реакции, N, N, N',N'-тетраметилэтилендиамина в среде гексана и введения биологически активного вещества, отличающийся тем, что, с целью повышения емкости сорбции, используют водный раствор 10%-ной желатины с окисью железа и персульфатом аммония, который диспергируют в растворе вазелинового масла, эмульгатора в гексане при нагревании до 90^oС и после перемешивания вносят в среду охлажденного гексана с последующим добавлением сомономеров акриламида и бисакриламида с биологически активным веществом и после перемешивания N,N, N',N'-тетраметилэтилендиамина.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской промышленности, и касается способа получения магнитных полиакриламидных гранул.
Целью изобретения является повышение емкости сорбции.
П р и м е р. 1 мл 10%-ной желатины с суспендированной в ней окисью железа с размером частиц 0,05 10 мкм и 20 г персульфата аммония в качестве катализатора, нагретой до 90^oС, вносят в пробирку, содержащую 2 мл вазелинового масла, 2 мл гексана и 0,2 мл эмульгатора СПЕН-85, нагретых до 90^oС. Затем смесь энергично перемешивают до образования равномерной эмульсии и переливают ее в емкость, содержащую 50 мл охлажденного до -4^oС гексана. Через 5 мин в колбу для полимеризации добавляют 2 мл водорастворимого биополимера с 100 мг и 300 мг метиленбисакриламида и акриламида соответственно.
Через 2-3 мин интенсивного перемешивания за счет потока газообразного азота вносят 20 мкл инициатора полимеризации N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамина. После завершения реакции в течение 10-15 мин гранулы отмывают ацетоном, забуференным физиологическим раствором (ЗФР) с 0,5% ТВИНА-20, несколько раз и инкубируют 30 мин в 1%-ном растворе бычьего сывороточного альбумина для исключения возможной неспецифической сорбции. Полученные гранулы имели стандартную сферическую форму с внешним диаметром 10-100 мкм и внутренним 5 50 мкм. Выход двойных гранул был более 90% Препарат хранили в ЭФР с добавлением 0,01% формалина при -4^oС.
При использовании концентрации желатины выход двойных гранул составляет
Концентрация, Выход,
4 Менее 1
5 10
6 30
7 50
8 65
9 80
10 Свыше 90
Применение двойных полиакриламидных гранул в качестве антигенного иммуносорбента.
В процессе получения двойных полиакриламидных гранул в качестве биологически активного вещества используют очищенный миокардиальный человеческий Г-актин. Были получены две партии гранул с концентрацией актина 7 и 3 мг/мл. В качестве контроля использовались гранулы, полученные по методике прототипа, с концентрацией Г-актина 7 мг/мл.
Полученными сорбентами заполняют хроматографические колонки. В качестве источника специфических антител используют глобулиновую фракцию гипериммунных кроличьих антиактиновых сывороток. На 1 г сорбента наносят 1 мл глобулиновой фракции кроличьей антисыворотки с концентрацией белка 2,42 мг/мл. С помощью перистальтического насоса производят ее рециркуляцию через сорбент в течение 18 ч при комнатной температуре.
Количество адсорбированных специфических антител определяют после отмывки сорбента и последующей десорбции антител растворами 3 М NaCNS или 0,1 М глицин-HCl буфером,рН 2,2. О качестве специфических антител судят по концентрации белка, определяемого методом Лоури. Сравнение сорбционной способности указано в таблице.
Полученные результаты указывают на повышение емкости сорбции указанных гранул.
Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской промышленности, и касается способа получения магнитных полиакриламидных гранул. Целью изобретения является повышение емкости сорбции. Способ осуществляется диспергированием водного раствора 10%-ной желатины с окисью железа и персульфатом аммония в растворе вазелинового масла, эмульгатора в гексане при нагревании до 90^oС и после перемешивания вносят в среду охлажденного гексана с последующим добавлением сомономеров акриламида и бисакриламида с биологически активным веществом, после перемешивания добавляют N,N,N',N'-тетраметилэтилендиамин, образовавшиеся гранулы отмывают ацетоном, содержащим твин-20, и несколько раз инкубируют в 1%-ном растворе бычьего сывороточного альбумина. 1 табл.