Закабунин

Номер патента: 1789562

Опубликовано: 23.01.1993

Авторы: Белявская, Веревкина, Долгова, Закабунин, Ильичев, Красноборов, Петренко, Хрипин, Юдина

МПК: C12N 15/48

Метки: антигенными, белка, белок, вич, гибридный, днк, кодирующая, плазмидная, рекомбинатная, свойствами

...анализируют на наличие сайтов для эндонуклеэз рестрикции. Вд 11 иВаа Н 1, Структуру подтверждают секвенированием: полученную плазмидную ДНК, содержащую адапторный фрагмент, обозначают р 2 41. 1 мкг ДНКру 41 расщепляют эндонуклеазой рестрикции ЕсоЮ в течение часа в Я-буфере, После этого добавляют рестриктазу Вд( 1 и также инкубируют в течение часа при 37 С. Препарат депротеинизируют с помощью фенольной экстракции, ДНК осаждают этанолом и ресуспендируют в ТЕ- буфере,Фрагмент размером 98 н, и., содержащий промотор а -амилазы, ЯО-последовательность и расположенный от нее на расстоянии б нуклеотидных пар, инициирующий кодон, получают на смеси Есой - Яац ЗА фрагментов ДНК плаэмиды рЕМВ 303,Выделение индивидуального фрагмента проводят путем...

Номер патента: 837066

Опубликовано: 15.10.1989

Авторы: Загребельный, Закабунин, Романов, Феофанов

МПК: C12N 9/12

Метки: аденилаткиназы, ацетокиназы, биомассы, комплексного, препарата, ферментного

...биомассу Е. со 1 МКЕ разрушают сначала лизоцимом, а затем ультразвуком в трис-НС 1 буфере, содержащем 0,1-0,15.М КС 1 (для полноты экстракции белков) и получают грубый экстракт. Такой способ разрушения биомассы позволяет выделить на стадии грубого экстракта в 10 раз большее количество единиц активности ацетокиназы и аденилаткиназы по сравнению с разрушением биомассы только лизоцимом или только ультразвуком, Грубый экстракт обрабатывают 3%-ным раствором стрептомицинсулЬфата дпя удаления нуклеиновых кислот, Затем проводят фракцнонирование сульфатом аммония в следующем порядке: сначала осаждают белки при концентрации сульфата аммония 68-70 насыщения, а затем растворяют осажденныебелки доведением концентрации сульфата аммония до...

Номер патента: 1076445

Опубликовано: 28.02.1984

Авторы: Загребельный, Закабунин, Кумарев, Романов

МПК: C12N 9/14

Метки: выделения, полинуклеотидфосфорилазы

...остаток красителяпроциона яркоголубого М-, структурного аналогацибакрона ЗС - А, Связь между красителем и матрицей осуществляетсячерез 3,3-диаминобензидиновый мостик.Использование в качестве аффинногосорбента процион-силохрома позволяетпроводить сорбцию полинуклеотидфосфорилазы в присутствии 0,9-1,1 М 10КС 6 и 5-15 мМ МдС 2 при рй 8,9-9,1,а элюцию вести,при том же рН в отсутстВии КС 8 и МдСВ . В этих условиях отделение основной части балластных белков происходит, уже при 15нанесении образца на аффинный сорбент. Выбранные условия хроматографии на аффинном сорбенте значительно сокращают время ее проведенияи упрощают аппаратурное оформлениестадии.Способ осуществляют следующимобразом,Клетки Е. со 11 МРЕразрушаютлизоцимом в присутствии...