Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии

.С.МедФО и их забонняя сти. Длявены ндиаминГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(56) Гржебин З.Н., ЦераидисОсновы гистопатологии кожи Мгиз, 1960, с. 95-96.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЯЗВЕМЫ ХРОНИЧЕСКОЙ ПИОДЕРМИИ(57) Изобретение относится кне, касается диагностики кожлеваний. Цель изобретениядиагностика и повышение точнэтого пробу крови из локтевопомешают в 2,77-ный р-р этил тетрауксусной кислоты, предотвращая свертывание. Исследуют мононуклеары крови, выделенные центрифугированием в градиенте плотности фиколла - веро- графина. Затем две пробирки (одна - д контроль, другая - с мононуклеарной суспензией) инкубируют 30 мин при 37 С, дважды отмывают центрифугированием при 200 д. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. Подсчитывают число розеткообразуюших клеток (Е-РОК), т.е. ядросодержаших клеток, окруженных тремя или более эритроцитами, на 100 клеток в каждой пробе. Розетки, обраэуюшиеся в присутствии теофиллина называют теофиллинустойчивыми или резистентными.При их уровне 350 клеток/мми более3определяют язвенную форму хронической пиодермии. 4 табл.Изобретение относится к области .медицины, в частности к диагностике кожных заболеваний.Цель изобретения - ранняя диаг 5 костика и повышение т;,чности.Способ осуществляют следующим об(разом.Для исследования берут 5-7 мл крови из локтевой вены в 0,7-1,0 мл 10 ,2,7 -ного раствора динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты для предотвращения свертывания. Объектом исслЕдования служат мононуклеары крови, вьщеленные методом центрифугирова.5 ния в градиенте плотности фиколла-верографина (удельная плотность 1,077 г/мл). Для вьщеления мононуклеаров кровь разводят в 1,5 раза средой199 и наслаивают на 2-3 мл фиколла верографина,Кровь, наслоенную на смесь фиколла-верографина, центрифугируют при 400 я в течение 30 мин. С интерфазной поверхности между слоями плазмы и фиколла-верографина собирают образовавшее кольцо из клеток в центрифужную пробирку и дважды отмывают раствором Хенкса центрифугированием в течение10 мин при 200 д. Осадок ресуспендируют в 1 мл среды 199, .Число мононуклеаров доводят до конечной концентрации 2"10 клеток ,в 1 мл.6Для исследования в две круглодонные пробирки приливают по 0,1 мл приготовленной суспензии,мононуклеаров. Затем к первой пробирке добавляют О, мл раствора теофиллина (30 мг препарата следует растворить в 1 О мл среды 199 при нагревании), ко второй - 0,1 мл среды (контрольная проба). Пробы инкубируют в течение 30 мин при 37 С, дважды отмывают сре дой 199 центрифугированием при 200 я в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов 5 ставят реакцию спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана: к осадку приливают по 0,1 мл среды и 0 мл 0,57.-ной суспензии эритроЦитов барана, смесь ресуспендируют, выдерживают при 37 С в течение 10 мин, центрифугируют при 200 я 5 мин и инкубируют при 4 С в . течение 1 ч. Затем осадок осторожно ресуспендируют, взвесь пбмещают на55 предметное стекло, прикрывают покровным стеклом .и подсчитывают число розеткообразующих клеток (Е-РОК), т,е. ядросодержащих клеток; окруженных тремя или более эритроцитами, на 100клеток в каждой пробе. Абсолютное количество Е-РОК вычисляют умножениемотносительного числа Е-РОК (в Х) начисло лимфоцитов 1 мм крови. Розет 3ки, образовавшиеся в присутствии теофиллина, называют теофилин устойчивыми или реэистентными (ТР-РОК). Раз"ность между общим количеством Е-РОК(в контрольной пробе) и количествомТР-РОК после обработки теофиллиномпринимают за теофиллинчувствительныеЕ-РОК,П р и м е р 1. Больной Б., поступил с распространенными высыпаниямиязвенного характера в области голенейи бедер. Беспокоили боли в очагахпоражений и обильное гнойное отделяемое. При обследовании со стороны артериальных и венозных сосудов обеихног патологии не выявлено. Язвы продолжали увеличиваться в размерах, Принеоднократном обследовании отделяемого язв на грибы диагноз глубокого микоэа был отвергнут. При иммунологическом обследовании периферической крови больного до лечения найдено повышенное содержание ТЧ-РОК (4 бт. иВ850 кл/мм ), что дало основание поста-,вить диагноз хронической язвенной пиодермии. В дальнейшем диагноз был подтвержден на основании клиническогонаблюдения, гистологического исследования и результатами проводимой терапии,П р и м е р 2, Больной Б., поступил с распространенными кожными высыпаниями язвенного характера в клиникуо предположительным диагнозом - глубокий микоэ. Гистологическое исследование биопсийного материала и неоднократные посевы отделяемого с поверхности язв на грибы не подтвердиливышеуказанный диагноз. При иммунологическом исследовании периферическойкрови больного до лечения процентноеи абсолютное содержание ТЧ-РОК (233и 372 кл/мм ), что соответствовалоЭдиагнозу хронической язвечной пиодермии, В дальнейшем диагноз подтвержденклиническим наблюдением и результатами проведенного лечения. П р и м е р 3. Больной О., поступил в клинику с язвенным дефектом кожи на тыльной поверхности левой кисти с диагнозом - хромомикоз кожин папилломатоэ кожи1411671 Т а б л и ц а 1 н 5786Р -459 4 Клинические обследования путем неоднократных биопсий кожи и посевов на грибы не подтвердили вышеуказанных диагнозов. Иммуиологическое же обсле 5 дование периферической крови больного до лечения указало на наличие повышенного содержания теофиллинчувствительных клеток (36 Х и 535 кл/мм ). Специфическая терапия подтвердила 10 диагноз хронической язвенно-вегетирующей пиодермии.П р и м е р 4. Больная Ч., поступила с обширным язвенным дефектом кожи левой голени с предварительным 15 диагнозом - трофическая язва. Клинически отмечалось наличие обильного гнойно-геморрагического зксудата на поверхности очага поражения. Больную беспокоили мучительные боли, усили вающиеся при ходьбе. При обследовании венозной и артериальной систем пораженной конечности паталогии невы- явлено. Диагноз трофической язвы был отвергнут. При иммунологическом об следовании периферической крови больной до лечения было найдено повышенное содержание теофиллинчувствительных клеток (637. и 1147 кл/мм ), что3 было характерно для язвенной формы 30 хронической пиодермии. Соответствующая терапия способствовала клиническому выздоровлению больной.Различают следующие клинические формы язвенных пиодермий: язвенная, язвенно-вегетирующая, вегетирующая гангренозная, Все указанные клинические формы представляют собой единый патологический процесс с различной степенью тяжести течения заболевания, 40Для наглядной иллюстрации, что данный способ служит для диагностики всех форм язвенных пиодермий, клинические разновидности разделены насоответствующие 4 группы больных язвенной хронической (табл. 1), вегетирующей (табл. 2), язвенно-вегетирующей (табл. 3) и гангренозной.(фиг.4)пиодермией. Таким образом, предлагаемый способ оценки чувствительности Т-лимфоцитов к теофиллину при яэвенньпс формах хронической пиодермии может быть рекомендован в качестве диагностического способа при указанной патологии.Предлагаемый способ прост, легко воспроизводим и не требует длительного времени (2 дня) в сравнении с известным, где исследование занимает 6-7 дней. У 80-857 больных предел колебаний теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов лежит в области 23-46 Х или 350 з850 кл/мм , что в 2-3,5 раза превышает уровень предела колебаний у здоровых лиц. формула и э о б р е т е н и я Способ диагностики язвенной формы хронической пиодермии путем клиникогистологического обследования больного, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики и повыше ния точности способа, дополнительно в периферической крови определяют количество теофиллинчувствительньпс клеток В-лимфоцитов и при их уровне 350 клеток/ммзи более диагностируют язвенную форму хронической пиодермии.1411.671 Продолжение табл.4 4 3 7 К 31 в в 1411 36+5,9 нтО+1,0 200+19 льная О, 001 Р( оставитель Л. Шилихред Л.Олийнык орректор В. Гирня Редактор А. Ворови акаэ 3649/ ираж 84 П В 1(ИИПИ Государственного к по делам изобретений и13035, Иосква, Ж, Раушск д, 4/ приятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Производственно-полиграФическое груп и 30 омитета СССоткрытий