Способ получения водного раствора простациклина или его соли

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН Ия Сефэ Сов етскнлСфцналнстнческнкРеспублик и 1978715 ТЕН 61) Дополнительный к патент(31) 20175/78 (33) Великобритания СССР оо деламэобретенн и открытийа опубликования описания 30 . 1 1, 82 Иностранцыеймур Воттс и Питер Хь (Великобритания) вторыобретения Иарсд Иностранная фирма Дзе Велкам Фаундейшн Лимитед"(71) Заявитель цин, но могут быть использованы идругие аминокислоты, такие как валин элднин и дргинин,ик кк х сти ретение относитс ческой промышлен учения лекарств лоты2 И, Ами"но растходирация аминокие низкой - О,ительно 0,025быть достатобеспечить необость,Общая концентна быть боле И, предпочт нокислота должна воримой, чтобы о мую буферную емк ения ли ески долж 0,03 позой о 10 В растворе буфера может присутствовать хлористый натрий, но количество его не должно быть таким, чтобы раствор становился фармацевтически неприемлемым. Иолярная концентрация хлористого натрия должна быть такая же, как и концентрация аминокислоты. Большое количество хлористого натрия увеличивает ионную силу раствора, сея ванного активного соединения и буфера, что нежелательно для стабильности соединения, в буфере может присутствовать и хлористый калий. 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДНОГО РАСТ Изоб я им о-фар,мацевтино и аса:ется пол енных препаратов.Известен способ получ водногораствора простациклина и го солисмешением с фармацевтиче приемле- .мым буфером Г 1 3,Однако известнцй способ не вляет получить стабильный целевпродукт.Цель изобретения - повышение стабильности целевого продукта.Указанная цель достигается согласно способу получения водного раство- тра простациклина или его соли смешением с фармацевтически приемлемым бу.фером, при котором в качестве буфераиспользуют несеросодержащую с-аминокислоту с концентрацией аминокислоты 20,02-0,03 И и рН композиции 9,0-11,6,АминокислОта, используемая в качестве буфера, должна быть свободнаот серы, наиболее предпочтителен глиРОСТАЦИКЛИНА ИЛИ ЕГО СО3 978рН буфера должно находиться в диапазоне 10,2-11,6, предпочтительно10,5.Способ осуществляют следующим образом.Готовят раствор глицина в воде,содержащий некоторое количество хлористого натрия. К этому раствору до"бавляют сначала гидроокись натрия вкачестве основания для того, чтобыувеличить рН до необходимого уровня,и затем простациклин.В качестве основания можно использовать любое основание, которое является достаточно сильным, чтобы по"лучить буферный раствор с необходимым рН. Основание должно быть таким,чтобы оно приводило к получению Фармацевтически приемлемого раствора,т. е. раствора, который, не вреденреципиенту; Количество используе.,мой аминокислоты, например глицина,и основания, например гидроокисинатрия, должно быть минимально необходимым для стабйлизации активногосоединения в течение необходимоговремени. Использование избытка аминокислоты или основания, или обоихэтих компонентов приводит к удержанию воды в продукте высушивания призамораживании, которая вызывает разрушение активного соединения. В оп"ределении Фармацевтической приемлемости важным фактором является рНраствора. Если раствор. простациклинадолжен быть введен в прибор, например искусственную почку, то рН может иметь значение до 12 и даже более, но если раствор должен быть введен в большом объеме в вену, например в сердечно"легочную искусственную систему, то рН при выходе в венудолжна составлять преимущественно8,4-90 для этого рН раствора можетбыть понижена непосредственно передиспользованием,Другие агенты могут присутствовать в буферном растворе, но их количество не должно значительно уменьшать стабильность активного соединенияв растворе. Например, могут присутствовать некоторые карбонаты, сопутствующие простациклину, например натрий"простациклин может содержать до5 вес.3 карбоната натрия.Когда активное соединение является очень активным Фармакологически,то необходимое количество его оченьмало; например тольконесколько миллиграмм требуется для часового вливания в пациента весом 0 кг. Количество активного соединения, присутст-вующего в данном буферном раствореперед высушиванием при замораживании,зависит от применения этого материала после восстановления. Восстановление можно делать буферным раствором, свободным от активного соеди О нения, так что, отношение активногосоединения к буферным составным частям может быть больше, чем в используемом растворе для введения.Если раствор, содержащий только 1 э буферные агенты, активное соединениеи хлористый натрий, высушивают замораживанием, то физическая прочностьи внешний вид полученного высушенного при замораживании образца не осорр бенно удовлетворительны. Поэтому перед высушиванием предпочтительно вклю.чать в буферный раствор индифферентную составную часть лекарства. Пред"почтительный индифферентный компонентлекарства. - маннитол, концентрия кото рого 25-50 мг/мл буферного раствора.Если используют менее чем 25 мг/млманнитола, то прочность и внешний видпрепарата недостаточно хороши. Если зо используют более 50 мг/мл, то улучшение незначительно или совсем не наблюдается и стабильность активного соединения низкая, Индифферентная составная часть обеспечивает в образце, 35высушенном замораживанием, поддерживающую матрицу и улучшаетфизическуюпрочность и внешний вид образца. Невсе индифферентные составные частимогут быть использованы, Ааример,следует избегать. тех веществ, кото"рые проявляют избыточное пенообразо-,вание восстановленного материала, например ноливинилпирролидон. Такжене могут быть использованы вещества 43влияющие на рН.буферного раствора,например, глицин.Буферный раствор может содержатькроме активного соединениядругиетерапевтические компоненты. Высушенный замораживанием продукт такжеможет содержать другие терапевтические вещества или эти вещества могутбыть добавлены к восстановленномубуферному раствору. Такие терапевтические вещества могут частично илиполностью заменить индифферентныесоставные части лекарства.Растворителем, используемым дляприготовления буферного раствора,5 978715 4 является предпочтительно вода для да его применяют к человеку, может инъекций (Бцгарецп рЬагвасоре 1 се) быть в несколько раэ более сильнодейили другая вода, пригодная для ис- ствующим, чем для других млекопитаюпользования во вливаниях или инъек- щих.циях, Когда высушенное замораживани- з Для человека и ветеринарного исем вещество восстанавливают для ис- пользования отбирают по крайней мер пользования, оно может быть вновь из двух сосудов (например, в виде растворено в воде для инъекций, име- многокомпонентной упаковки ),один из ющей РН 5,5-7, предпочтительно 7, иликоторых является пузырьком или ампув аминокислотном буферном растворе, И лой и содержит высушенный заморажи" имеющем РН 9, предпочтительно 10,5, ванием образец (лиофилизованный) из или некоторое количество буферного активного соединения с буфером, а раствора может быть добавлено к раст- другой - пузырьком или ампулой, и вору в воде для инъекций. Восстанов- содержит дополнительное количество ление высушенного замораживанием ма буфера в водном растворе или высушентериала можно также проводить с помо- ного замораживанием, который не со щью растворения его в физиологичес" держит активного соединения. Высу ком растворе, пригодном для вливания. шенный замораживанием продукт может Для Этой цели используют глюкозу. . быть далее восстановлен водным раст,Высушивание замораживанием буфер вором буфера или раствором из второ" ного раствора может быть выполнено го сосуда. Восстановленный материал любым известным способом, причем со- может быть в последующем разбавлен, держание воды должно быть пониженным, ,чтобы обеспечить целевую дозу непо" поскольку это необходимо для последу- средственно перед введением. Таким ющей стабильности активного соедине образом, высушенный препарат, напРинйя. мер 0,5 мг простациклина при РН 11,5,Количество простациклина, требуе- может быть разбавлен 50 или 500 мл мое для терапевтического эффекта, за- водного раствора декстрозы или соле- ,висит от способа введения. Доза для . вого раствора, .имеющего РН такое, млекопитающих находится в диапазоне зф чтобы получить раствор с РН 10,0- 0,01-200 мг на 1 кг живого веса, луч,5 фше 0,01-10 мг на 1 кг живого веса, П р и и е р 1. Стерильные растпредпочтительно 0,2-0,5 мг/кг, воры, содержащие простациклин (0,2Количество простациклина, присут-и 0,4 мг/мл) и маннитол (50 мг/мл), ствующего в ампуле для введения вли- и готовят в следующих. буферах: гливанием,находится в диапазоне 0,1- цине, аргинине, валине, аланине, 1,5 мг/кг, предпочтительно 0,5- карбонате и трис-буфере. Концентра мг/кг. Активное соединение, ког- Чии буферных компонентов составляют:1Аминокислотный буфер: 0,025 И аминокислоты, 0,25 хлористогонатрия и гидроокись йатрия при РН 10,5;Карбонатный буфер: 448 мг/л бикарбоната натрия и 1614 мг/л, карбоната натрия;Трис-буфер: 6054 мг/л трис-основания и 2,5 мл0,1 гидроокиси натрия .на литр.Порции на 5 мл каждого иэ этихПараметры колонки 25 см х 4,2 мм. растворов затем высушивают заморажи- Колонку набивают с использованием меванием при -40 ОС под вакуумом и про- тода УеЬЬега и МеМеггЬ 1 а, в качестводят первую стадию сушки при ОфС и ве жидкой среды применяют четырех- вторую при 20 ОС, Запечатывание пузырь-,в хлористый углерод. ков проводят в атмосфере азота. Далее фазу колонки приготавливают следу- высушенные продукты подвергают испы- ющим образом. танию на хранение. После испытания . 1 О г набивки высушивают под ваку- анализируют на содержание простацик- умом при 80 фС в течение двух с поло- лина методом жидкостной хроматографий. виной часов во вращающейся испарительХроматографию осуществляют на высушен- ной колбе емкостью 250 мл. Добавляют ных препаратах, восстановленных в 10 мл октадецилтрихлорсилана и 100 мл 1 О мл 0,0254-ного раствора гидрокси", :ухого толуола и раствор кипятят с тетриметиламмония. обратным холодильником в течение трех9787 часов с перемешиванием лопастной мешалкой и применением обратного холодильника, снабженного предохранительной трубкой с хлористым кальцием; Смесь охлаждают и затем отфильтровы вают через фильтр 0,5 мкм. Окись крем ния на фильтре промывают 250 мл горячего ацетона и сушат при 80 С в вакууме в течение двух часов. Продукт. (11 г) обрабатывают триметилхлорси ланом (10 мл) как указано выше, кипя-, чение с обратным холодильником в течение 15 мин приводит к образованию целевого продукта.В качестве подвижной фазы исполь зуют воду(1200 мл), в которой растворяют 5 г борной кислоты и 7,6 г бинатрий тетрабората и затем добавляют метанол (8800 мл). Температура колонки комнатная (около 25-30 С), поток 20 подвижной Фазы составляет 3,6 мл/мин при давлении 20 МПа. Детектирование продуктов выполняют с использованием Руе Оп 1 спев 1.13 при длине волны 205 нм с полной шкалой в 0,16 абсорбционных 25 единиц для 0-100 мг/мл, раствора,Количество присутствующего простациклина рассчитывают по измерениям высоты пика и сравнению с эталонным .образцом известной концентрации.П р и м е р 2. Высушенная замораживанием инъекция простациклина содержит следующие ингредиенты, мг:Простациклин 1000Маннитол 5000035Хлористый натрий(0,(Д 5 М) 2932Глицин (0,025 М) 3760Гидроокись натрия Количество,соответству- иющее рН 10,5Аналогично примеру 1 1 мл инъекции простациклина высушивают замораживанием с получением вещества, содер жащего до 5 вес.4 воды.45 П р и м е р 3.Перемешиваемый раствор простагландина Р Г-метил сложного эФира (50 мг) в эФире (1 мл), обрабатывают бикарбонатом натрия и затеи по каплям в течение 2 ч добавляют водный раствор трийодида калия, После перемешивания в течение ночи реакционную смесь встряхивают с эфиром и водным раствором тиосульфата55 натрия. Эфирную фазу отделяют, промывают водой, сушат над сульфатом магния и выпаривают до получения желтой смолы 5-иодо-деокси,9 Ы -эпок 15 8сипростагландин Г метил сложного эфира.Раствор 5-иода-деокси,9 с- -эпоксипростагландин Г, метилового сложного эфира в метанольном растворе метоксида натрия, полученного изнатрия и сухого метанола, оставляют в атмосфере сухого азота в тецение 5 ч и затем растворитель отгоняют в высоком вакууме. Оставшееся ,твердое аморфное вещество промывают бензолом, оставляют в атмосфере воздуха на ночь и затем перемешивают с водным раствором гидроокиси натрия с. получением суспензии тонких бесцветных игл, Кристаллы отбирают, промывают несколькими каплями водного раствора гидроокиси натрия и сушат на воздухе с полуцением натриевой соли 9-деокси;9 сгэпокси А-простагландина Г . Ингибирование арахидоновой кислоты, индуцированной агрегацией тромбоцитов человека при концентрации 0,2 нг/мл этой солью, и ее нестабильность при рН кислой среды вместе с последующим доказательством, позволяют заклюцить, что она совмест. на с конфигурацией (52)-5,5-дидегидро-деокси,9 Ы;эпокси-простагландином Г,1,.1 ЪЯМР спектры высокого разрешенияраствора кристаллов в диметилсульфоксиде-Йпоказали соответствующие 20 радикалов, химические сдвиги которых полностью соответствуют химической структуре, установленной для простациклина. Пиков примеси не обнаруженоП р и м е р 1. 5-иодо-деокси- -6,9-эпоксипростагландин Г метиловый сложный эфир перемешивают с метанольным раствором метоксида натрия, приготовленного из натрия в атмосфере азота при комнатной температуре в течение ночи; 1 н,водный раствор гидроокиси натрия добавляют к желтому реакционному раствору для гидролиза эфирной части и после 2 ч метанол испаряют под вакуумом при комнатной температуре. В остатоцном водном растворе спонтанно кристаллизуются бесцветные тонкие иглы натоиевой соли, которую охлаждают (до ОС). отбирают, промывают осторожно 1 н. водным раствором гидроокиси натрия, ,сушат на воздухе и хранят в закрытой трубке. Эта соль имеет 1 (КВг диск) см-" 1692 (О-С=С) и двадцать резонансов Снаблюдают при 182,710 978715 Формула изобретения Составитель С. Малютина Редактор А, Лежнина Техреду Е.Харитончик Корректор С. Шекмар .Тираж 714 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, ЖРаушская наб., д. 4/5 Заказ 9248/78 Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул, Проектная,9(С)р 18,4 (С) ч./млн, из ТМ 5в диметилсульфоксиде-дь. Продуктомявляется натрий (52)-5,6-дидегидро 1 9"деокси,9 сЕ-эпоксипростагландинМГ (синтетический натрий простациклин),П р и м е р 5. 5-иодо-деоксио-эпоксипростагландин Г 1метиловый сложный эфир обрабатывают 1,5-диаэобицикло-ноненом(ДБН) при ком ф.натной температуре в отсутствии растворителя в течение нескольких ча,сов. ДБН и иодистый водород удаляютпутем адсорбции на колонке с окисью(С" 5 виниловый протон),и ЯМР-спектро ф.скопия Сф в СьО " Есй, 19:1 - (отличительными характеристиками былирезонансы при 159,8 (С) 155,8"9"деокси,9 сЬэпоксипростагландинметиловый слОжный эфир Гидролизуют 35водным раствором гидроокиси натрия.с получением синтетического натрийопростациклина,П р и м е р. 6, (5 Р, 6 Р)-5-иодо -РЫ метиловый эфир (13,375 г, со- едержащий СА (2 Ф 5 , 6 5-иэомера)готовят в виде раствора в метанольном растворе метоксида натрия (иэнатрия и метанола при комнатной.температуре в атмосфере азота и ста.вят при комнатной температуре наночь. Получающийся,желтый раствор. Обрабатывают 1 й. водным раствором гидроокиси натрия, отфильтровываютот осадка, оставляют при комнатнойтемпературе в течение 2 ч и отгоняютметанол на испарителе Вцсй 1 в вакуумепри комнатной температуре. Остаточный сироп обрабатывают водой и 1 н.водным раствором гидроокиси натрия,причем имеет место спонтанная кристаллизация с получением массы кристаллов.После охлаждения до ОС твердое вещество отбирают, промывают 1 н.раствором гидроокиси натрия со льдом дотех пор, пока промывные воды не ста.нут бесцветными, и сушат на воздухедо постоянного веса (2 дня), получая10,15 г, Т = 164-166 С (последую-,щая сушка при 100 С бесцветной натриевой соли простациклина.П р и м е р 7. Стерильный раэбавитель для инъекцяи простациклина:Глицин (0,025 М) 94,0 мгХлористый натрий(0,025 М) 73,3 мгГидроокись натрия До рН 10,5Вода для инъекции До 50 млАналогично примеру 1 укаэанныеингредиенты используют в растворе вкачестве раэбавителя,Предлагаемый способ позволяет повысить стабильность целевого продукта,Способ получения водного растворапростациклина или его соли смешениемс Фармацевтически приемлемым буфером,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения стабильности целевого продукта, в качестве буфера используют несеросодержащую Й-аминокислоту с концентрацией аминокислоты0,02-0,03 М и рН композиции 9,0-11,6.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Простагландины. Под ред,И.С, Ажгихина, М., 1976, с. 13 и далее,