Способ получения биомассы

) 14,10,73 арствеиицй комитеСССРделам изобретенийи открмтий ония 66311 (088. 8 Опубликовано 2510.80 Бюллетень МЬ 3 Дата опубликования описания 2801.80 ИностранцыХадэиме Кавахараками Фудзимотои Хирохиса Яно (Япония) 72) Авторы изобретен готан Киес а, Кейичи Есио Сима Киеси Ватанаб Кендзи Сузуки Хисики Иностранная Фирма КанегаФучи Кемикал Индастр(71) Заявител БИОМАССЫ ОСОБ ПОЛУЧ 5 к тех быт чес я би ивир сред да, мины м в Узоотон 61) Дополнительный к п 22) Заявлено 13.11,74 (21 23) Приоритет " (32(31) 128724/13 (33 Изобретение относится к получения биомассы и может использовано в микробиолог промышленности,Известен способ получен сы, предусматривающий куль ние дрожжей на питательной содержащей источники углер та, минеральные соли и вит В известном способе в питательную среду вводят биотин, необходимый элемент для роста дрожжей рода СапЙЫа, или источник биотина, например мелассу, дрожжевые экстракты и т,д,Для других микроорганизмов известный способ не обеспечивает достаточно высокой скорости роста.Цель изобретения - увеличение скорости роста микроорганизмов.Это достигается тем, что в предлагаемом способе получения биомассы к питательной; среде добавляют 0,05-500 мкмоль его-предшественника; при этом из дрожжей используют виды ЯассЬаговусея сегеч 1 в 1 ае или Яассйаговусев гоцх 11, или Р 1 сМа гаг 1 пова или Р 1 сй 1 а вевЬгапаейас 1 епя или Васс 1 таговусоря 1 в 11 ро 1 у 1 са или йойо 1 огц 1 а гцЬга или СапйЫа поче 11 цв, или СапйЫа 1 гор 1 са 11 я, или Сапйдйа 11 ро 1 уТ 1 са, или Сапй 1 йа агЪогеа, или Сапй 1 йа стц 11- 11 егвопй 11 или СапйЫа гцдояа или Тогц 1 оря 1 я ху 11 пця, или Тогц 1 оря 1 я вастпо 11 ае, или Тг 1 с 1 тоярогоп сцапецв, или Тг 1 с 1 тоярогоп рц 11 ц 1 апя.При этом в качестве предшественника используют кротонбетаин или бутирбетаин.Способ осуществляют следующим образом. Дрожжи культивируют на питательной среде, содержащей источчики углерода, азота, минеральные соли и витамины с добавлением к среде от 0,05-500 мкмоль карнитина или его производных, или 0,05-50 мкмоль его предшественника, при этом в качестве последнего используют кр бетаин или бутирбетаин.Из дрожжей используют виды Басс 1 та говусея сегеч 1 яае или Басс 1 таговусея гоцх 11 или Р 1 сп 1 а Гаг 1 пояа, или Р 1 с(тра вевЪгапаейас 1 епя, или Бассйаговусоря 1 я 11 ро 11 т.1 са, или Р 11 ойо 1 огц 1 а гцЬга, или Сапй 1 йа поче 11 цв или Сапй 1 йа 1 гор 1 са 11 я, или СапйЫа 11 ро 1 у(1 са, или Сапй 1 йа агЬогеа или СапйЫа Чц 1 11 егвопй 11, или Сагй 1 й.э .ц 1.-, илиили Тогу 1 Оря 1 я ху 11 пця, илиТогу 1 оря 1 я ва 9 по 11 е, или Тк 1 сйоярогопсц(;апецв, или Тг 1 споярогоп рц 11 ц 1 апя.Культивирование проводят при температуре, допустимой для выращивания данного вида дрожжей, и за 5исключением некоторых микроорганизмов, процесс ведут предпочтительнопри 25-40"С, рН среды поддерживаютв пределах 6-8 в случае примененияорганических кислот или высших жирныхкислот и в пределах 4-7 при другихисточниках углерода.Если в качестве субстрата применяют углеводороды или масла и жиры,возможно добавление поверхностноактивных веществ, например производных жирных кислот, для ускорениядиспергирования субстрата в условияхкультивирования, В соответствии сопределенным этапом развития культивирования возможно добавлениепеногасителя, например силиконовой смолы, производного жирной кислоты или моно- или диалкильного сложного эфира полиоксиалкиленгликоля,П р и м е р 1. К основной сре- .де, доведенной до значения рН 7,0 исодержащей 13 г н-парафина (степеньчистоты 980, С,о , ), 4 г КН 2 РО 4,5 г сульфата аммония, 0,6 гМ 9 ЯО 4 ф 7 НО, 30 мг ЕпБО 47 Н 20, 50 г 30ЕеБО 4 7 Й О, 10 мг биотина, 1 мгтиамина-гйдрохлорида добавляют водопроводную воду до 1 л, хлорид карнитина добавляют в таких количествах,что он содержится в готовой среде для 35культивирования в различных концентрациях (см,табл,1) 30 мл полученнойсреды для культивирования помещаютв колбу емкостью 500 мл, предназначенную для перемешивания встряхива Онием, инокулируют 0,5 мл бульонас выращенной культурой Сапс 11 с)апоче 11 ця АТСС 20275. Эту культурупредварительно выращивают в колбе,содержащей основную среду и культивирование осуществляют при 33 С и 4встряхивании Полученные данные приведены в табл.1,П р и м е р 2, Микроорганизмывида Сапс 11 с 1 а Сгор 1 са 11 я ТРО 0006,Сапс 1 Ыа 11 ро 1 у 11 са 1 РО 0746Сапй 1 с 1 а гцуояа 1 ГО 0591 культивируют так, как описано в примере 1,Пслученные данные приведены в табл,2,Пример 3,Микроорганизмы вида Р 1 сй 1 а йаг 1- 55пояа культивируют согласно примеру1 с применением среды для культивирования, которая была получена путемдобавления хлорида карнитина к той же самой основной среде для культивирования, которую применяют в примере 1 в таком количестве, что полученная среда культивирования имеетразличные концентрации хлорида карнитина. Полученные данные приведеныв табл.З.Пример 4,Микроорганизмы вида БассЬаговусеягоцх 1 культивируют согласно примеру1. Полученные данные приведены втабл,4,Пример 5.Микроорганизмы вида БассЬаговусорядя 11 ро 1 ц 11 са СВБ 6124 культивируютсогласно примеру 1, Полученные данныеприведены в табл,5,Пример б.Микроорганизмы вида Тогц 1 оря 1 яху 11 пця 1 ГО 0454 культивируют согласно примеру 1. Полученные данные приведены в табл.б.Пример 7.Микроорганизмы вида БассЬаговусеясеге 1 я 1 ае (дрожжи для хлебопечения)культивируют по примеру 1 с темотличием, что в качестве источникауглерода взамен н-парафина применяют20 г этанола, В качестве витаминовдобавляют 2 мг пантотената калия,10 мг пиридоксина в виде хлористоводородной соли и 10 мг инозитолав добавление к биотину и тиаминугидрохлориду. Температуру доводятОдо 30 С. Полученные данные приведеныв табл.7.П р и м е р 8.Микроорганизмы вида Р 1 сП 1 а вевЬгапаеГас 1 епя 1 АМ 4744 культивируютпо примеру 1 с тем отличием, чтоприменяют основную среду, доведеннуюдо рН 6,0, следующего состава: 10 гуксусной кислоты: 15 г КН РО,1,15 г ИаНРО 4, 13 г (МН 4) НРО,),2 г МАМБО7 ЙО; 30 мг ЕпБО,7 Н, О;10 мг ГеБО 4 7 Н, О; 10 мг биотина.Водопроводную воду добавляют до1 л, Полученные данные приведеныв табл.8,Пример 9.Микроорганизмы вида Кпобо 1 огц 1 агцЬга 1 ГО 0383 культивируют по примеру 1 с тем отличием, что в качестве источника углерода взаменн-парафина применяют 20 г глюкозы.Полученные данные приведены в табл.9,П р и м е р 10,Повторяют пример 1 с тем с дополнительным добавлением соответственно кротонбетаин-гидрохлорида и бутирбетаин-гидрохлорида, Полученныеданные приведены в табл.10.712029 Таблица 1 ентрация клеточного материала, г/л ельность культивирования, ч 16 ч 18 18 ч 20 6,4 9,4 10,5 7,1 0,05 10,7 12,3 12,0 0,5 8,3 13,0 12,2 9,0 13,8 13,8 13,0 10,2 50 10,5 13,8 13,3 500 Таблица 2 ериала,г/ Штамм нем хлорида мкмоль Санбата 11 ро 1 уг.1 са 1 Г 0.074,4 9,6 апйЫа 1 ор 1 са 11 я 1 Го.0006 1,9 6,7 апй 1 йа кц 9 ова 1 Г 0.0591 0,9 4,4 10,9,5 3,аблиц 10 11,5 12,8 9,13 абли ного материала, г ирования 7,О,4,Концентрацияхлорида карнитина,мкмоль Концентрацияхлорида карнитинмкмоль Концентрацияхлорида карнимк моль трация клеточного материала,льность культивирования 16 18 2,2 3,8,5 6,б л и ц а 1 ополнительн ещество,мкм 6,е вводит отонбетаи дрохлорид 3,4 3,5,3 5,6 Бутирбетаинидрохлорид0,55 1,7 12,2,0 13,ормула изобретения ича принятые во1. Патенкл. С 12 Стип).А.Бражерова коваКорре витель д Л,Алф ор Н.Ст Тираж 522 дарственного коми изобретений и ок а, Ж, Раушска Подписнтета СССРрытийнаб.,д.4/5 з 9386/66 ПНИИПИ Го по делам 113035, ИосЗа лиал ППП Патент, г.ужгород, ул,Проектн 1, Способ получения биомассы,предусматривающий культивирование дрожжей на питательной среде, содержащей источники углерода, аэота, минеральных солей и витаминов, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения скорости роста микроорганизмов, к питательной среде добавляют 0,05-500 мкмоль карнитина или его производных, или 0,05-50 мкмоль его предшественника, при этом иэ дрожжей используют виды БассЬаговусея сегеч 1 я 11,или ЯассЬаговусея гоцх 11, или Р 1 сп 1 а гаг 1 пога, или Р 1 сЬ 1 а вевЬгапаейас 1 епя, или Вассала,Соседактор Т.Зубкова Тех говусоря 1 я Е 1 роЕу 1 са, или ййойоогцсЕа гцЬга, или Сапй 1 йа почеЕЕця,илиСапйз.йа 1 гор 1 саЕ 1 я, или Сапй 1 йа Е 1 роЕу 1 са,.или Сапй 1 йа агЬогеа, или СапЙ 1 йа дц 1111 егвопй 11, или Сапй 1 йа гцсояа, или ТогцЕоря 1 я хуЕ 1 пця, илиТогцЕоря 1 явадпо 11 ае,или Тг 1 сЬоярогоп сц 1 апецв, или Тг 1 сЬоярогоп рцЕЕц.Еапя,2. Способ по п.1, о т л ющ я й с я тем, что в качестве предшественника карнитина используюткротонбетаин или бутирбетаин.Источники информации,внимание при экспертизет СССР 9 355807,