Способ определения -ацетилглутамина

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСН ИХРЕСПУБЛИК А 1 19) И 1)(51) 4 С 01 Н 31/16 РЕТЕН ЕЛЬСТВ ЕЛЕ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОПИСАНИЕ И Н АВТОРСИОМУ СВИДЕ(56) Сиггия С., Ханна Дж.Г. Количественный органический анализ пофункциональным группам. М.; Химия,1983, с. 149-179. ТУ-09-77-83от 28.04.83.(54) СПОСОБ ОПРЕД НИЯ М-АЦЕТИЛГЛУТАМИНА.(57) Изобретение относится к аналитической химии, а именно-к способуопределения И-ацетилглутамина. Цельизобретения - повышение селективности способа. Определение И-ацетиЛглутамина осуществляют путем обработки 57.-ным растворомгидроокисикалия при 85-90 С. В полученныйраствор вводят 6-8 н. раствор соляной кислоты до рН 1,0-1,5 и ацетонили диметилсульфоксид. Проводят потенциометрическое титрование О, 1 н.раствором гидроокиси калия. Продолжительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +17, 1 табл.5 10 15 20 Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам определения содержания веществ методом потенциометрического титрования, и может использоваться в аналитических и биохимических лабораториях при контроле чистоты И-ацетилглутамина,Цель изобретения - повышение селективности способа. Способ заключается в следующем. , Навеску образца помещают в колбу со шлифом объемом 100 мл, вводят 5-7 Е-ный раствор гидроокиси калия или натрия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат или на терморегулируемую водяную баню. Смесь выдерживают при 85-80 С в течение 60-70 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл дистиллированной воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В полученную смесь вводят 6-8 н. соляную кислоту до установления рН в интервале 1,0-1,5. Затем вводят 20 мл ацетона или диметилсульфоксида и перемешивают. В полученный раствор погружают стеклянно-каломельную электродную пару и проводят потенциометрическое титрование О, 1 н. водным раствором гидроокиси калия или натрия до появления на кривой трех скачков потенциала - первый из них соответствует оттитрованию избытка соляной кислоты (Ч), второй - совместному оттитрованию двух карбоксильных групп Н-ацетилглутаминовой кислоты (Ч 2),. а третий - оттитрованию хлорида аммония (Чэ ). При анализе чистых препаратов Н-ацетилглутамина имеет место равенство Ч./2 = Ч , Примесиэуксусной кислоты титруются совместно с М-ацетилглутаминовой кислотой и Ч /2 ) Ч , содержание Б-ацетилглутамина рассчитывают по Ч , и содержа"3ние уксусной кислоты по разности Ч -2 Ч = лЧ уксусная кислота. При .наличии примесей хлорида аммония ЧЧ /2 содержание И-ацетилглутамипа рассчитывают по Ч /2, а количество примеси хлорида аммония находятпо разности Чэ - Ч/2 = Чинс Продолжительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +17., относительное стандартное отклонение +1,57. 30 35 40 45 50 55 П р и м е р 1, Навеску(0,07135 г) обрабатывают 5 мл 57-ного раствора гидроокиси калия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат, Смесь выдерживают при 90 С в течение 70 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко и пробку, В анализируемый раствор вводят 6 н. соляную кислоту до установления рН 1,0, затем добавляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,1025 н. водным раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала на кривой. По кривым определяют, что Чг = 728 млю а Ч = 3,68 мл (Ч /2 = Ч ), и рассчитывают по формулам содержание Х-ацетилглутамина соответственно 99,5 и 98,47. П р и м е р 2, Навеску (0,08581 г) обрабатывают 5 мл 77-ного водного раствора гидроокиси натрия,стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 85 С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко и пробку. В анализируемый раствор вводят 8 н. соляную кислоту до установления рН 1,5, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала. По кривым титрования определяют, что Ч = 9,38 мл, а Ч = 465 (Ч /2 =Чэ) и по формулам рассчитывают содержание И-ацетилглутамина соответственно 99,5 и 100,47.П р и м е р 3, Навеску (0,0722 г) искусственной смеси - 0,01015 г хлорида аммония (14,17) и 0,06205 г Н-ацетилглутамина (85,93) обрабатывают 5 мл 67-ного раствора гидроокиси калия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 87 С в течение 65 мин. Затем стаканчик охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 7 н. соляную кислоту до установления рН 1,2, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют0,1025 н. раствором гидроокиси калиядо появления трех скачков потенциала,По кривым титрования определяют,что Чг = 6,36 мл, а Чз, = 5,06 мл(Ч /Я ( Ч), и рассчитывают по формулам 5сбдержание М-ацетилглутамина 85,07хлорида аммония 14,37., Ч /2 = 3,18 мл.П р и м е р 4. Навеску (0,08427 г) искусственной смеси - 0,01115 г уксусной кислоты (13,2) и 0,07312 г М-ацетилглутамина (86,87.) обрабатывают 5 мл 6,57-ного раствора гидро- окиси натрия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат, Смесь выдерживают при 88 С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и споласкивают 2-3 мл воды горльппко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 6 н. соляную кислоту до установления рН 1,3, затем добавляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала, По кривым титрования определяют, что Ч =9,81 мп, а Ч = 3,97 мл (Ч /2 Ч )1 и рассчитывают по формулам содержание М-ацетилглутамина 86,67., уксус- ной кислоты 1303301 Гр и м е р 5. Навеску (0,0817 г) обрабатывают 5 мл 7 Х-ного раствора гидроокиси калия, колбу плотно закрывают пробкой, помещают в термостатз и выдерживают при 85"С в течение60 мин. Затем охлаждают до комнатнойтемпературы, открывают пробку,.2-3 мл воды споласкивают горлышкоколбы и пробку. В анализируемыйраствор вводят 7 н. соляную кислотудо установления рН 1,5, затем добавпяют 20 мл диметилсульфоксида ипотенциометрически титруют 0,1025 н.раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала.По кривой титрования определяют, чтоЧ = 8,06 мл, .а Ч = 4,50 мл (Ч /2 ))Ч), и рассчитывают по формуламсодержание М-ацетилглутамина 95,2 Е,примесей хлорида аммония 3,27.Ч /2 = 4,03 мл.Примеры реализации способа представлены в таблице,Формула из обре тенияСпособ определения М-ацетилглутамина путем обработки анализируемой пробы при 85-90"С раствором щелочи и последующим титрованием полученного раствора гидроокисью калия или натрия, отличающийся тем, что, с целью повышения селектив. ности способа, в качестве раствора щелочи используют 5-7 Е-ный раствор щелочи, а перед титрованием раствор подкисляют соляной кислотой до рН 1,0-1,5 и вводят в него ацетон или диметилсульфоксид.