Способ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита

Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 24. 04. 78 (21) 2618784/28-13 (51) М, Кл. с присоединением заявки Мо(23) ПриоритетА 61 А 10/00 Государственный комитет СССР ио делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения И. Г. Дауранов и К. А. Аскамбаева Институт педиатрии Министерства здравоохранения Казахской ССР(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПНЕВМОНИИ И РЕЦИДИВИРУЮЩЙГО БРОНХИТА1Изобретение относится к медицине, а именно к области педиатрии - детской пульмонологии.Известен способ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита путем определения в крови показателя Т-системыиммунитета с помощью реакции бласт-трансформации лимфоцитов.Однако этот способ трудоемок, результаты исследования становятся известными лишь спустя 2-3 суток. При оценке результатов необходима довольно высокая цитологическая подготовка исследователя. В ходе выполнения методики необходимо неукоснительное соблюдение правил стерильности (работа в боксе, облучение помещения бактерицидными лампами, обжигание пробок и кразв пробирок в пламени горелки, наличие стерильной спецодежды и т д.), иначе результаты будут существенно искажены. Значительно затрудняет постановку реакции необходимость применения митогена.Целью изобретения является усКорение и упрощение способа.Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа диффе" 2ренциальвой диагностики хроническойнеспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита в крови определяют содержание розеткообразующих лим 5 фоцитов (РОЛФ)при величине 15130 РОЛФ в 1 мм диагностируют хроническую неспецифическую пневмонию, апри величине 601-988 РОЛФ в 1 ммзрецидивирующий бронхит.10 Способ осуществляется следующимобразом. Диагностика заболевания дос"тигается с помощью подсчета в кровибольных в Фазе обострения заболева"ния содержания розеткообразующихлимфоцитов.Венозную кровь, больного в количестве 1,25 мл вливают в стерильныемерные центрифужные пробирки с 0,42 мл10-ного раствора желатины, гепарина,20 физиологического раствора (гепарин:желатина: физиологический раствор ="-1;10:23),Кровь осторожно смешивают со сре"дой, отстаивают в течение 45-60 мин25 и отсасывают надосадочный слой (суспензия лейкоцитов),Затем суспензию лейкоцитов разбавляют Физиологическим раствором, пипетируют, центрифугируют в течениеЗп 2,5 мин при 1000 об/мин и отсасывают985 о 1 Б : 1478, Из них количест 1 оово РОЛФ - 14 то есть 1"78 х 14=207.Фоов 1 мм крови. Другими словами, величина показателя у данного ребенка с подозрением на хроническое или рецидивирующее неспецифическое воспалительное заболевание бронко-легочного аппарата "укладывается" в диагноз хронической неспецифической пневмонии. Рентгенологическое и бронхологическое исследования подтвердили диагноз. На рентгечограмме легких в мес" те проекции базальных сегментов с обеих сторон легочный рисунок оказался измененным за счет уплотнения и склероза межуточной перибронхиальной и периваскулярной тканей. 50 надосадочный слой, Процедуру отмывания лейкоцитов осуществляют триждыК осадку лейкоцитов добавляют 0,3 млфизиологического раствора и клеточный осадок ресуспендируют,К 0,3 мл полученной суспензии лейкоцитов добавляют 0,3 мл 2-ной суспензии эритроцитов барана в физио"логическом растворе, консервировангных с помощью реактива Олсвера.Зритроциты предварительно трижды отмы- Овают физиологическим раствором с центрифугированием взвеси клеток в течение 15 мин при 1500 об/мин.Пробирку со смесью суспензий лейкоцитов больного и эритроцитов барана ставят на 5 мин в термостат при37 оС, затем в холодильник на 1 ч.После инкубации осадок отмытыхлейкоцитов и эритроцитов,осторожноресуспендируют и наносят каплю полученной суспензии клеток на предметное стекло (концентрация лейкоцитовбольного в 1 мл суснензии - 9,4 х 106концентрация зритроцитов барана в1 мл 2-ной суспензии,5 х 10, отношение эритроциты:лейкоциты=8,1).25Осторожно накрывают каплю покровнымстеклом.Освещение микросокпа с фаэоконт"растным устройством КФ.:устанавливают по Келеру, находят при малом уве- ЗОличении нужное место в нативном препарате, производят смену обычногообъектива на фазовоконтрастный с увеличением 40, Контролируют центровкуколец фазового объектива при кольцевой диафрагме 0 и 40, совмещают светлое и темное кольцо.. Подсчитывают относительное, затемабсолютное число розеткообразующихлимфоцитов (РОЛФ),П р и м е р, У ребенка содержание 4 ОРОЛФ в нативном препарате составило14, количество лейкоцитов в 1 ммЗкрови - 9850,из которых лимфоцитов 15, Для вычисления абсолютного ко"личества РОЛФ определяют сначала абсолютное количество лимфоцитов в 1 ммкрови, которое в данном случае равЗлементы рисунка деформированы, утолщены, с нечетными контурами. На этомфоне видны очаговые тени и ячеистые просветления. Корни легких расширены, тяжесты., Синусы свободны,Сердце в прямой проекции не увеличено.Диагноз: хроническая пневмония,пневмосклероз базальных сегментов собеих сторон. Фаза обострения.Бронхоскопия; двухсторонний, слева диффузный гнойный, справа, катаральный гипертрофический зндобронхит.Бронхография :слева цилиндрические бронхоэктазы нижней доли, деформация бронхов язычкового сегмента,справа - деформация средней доли инижнедолевых бронхов,Результаты изучения показателейсодержания розеткоойразующих лимфоцитов в 1 ммкрови детей, больныххронической неспецифической пневмонией и рецидивирующим бронхитом (возраст детей - от 4 до 12 лет), приведены в табл, 1.В табл. 2 приведены данные о частоте выявления различных величин изучаемого показателя у больных.В табл. 3 представлены даннйе о частоте выявления различных величин показателя содержания РОЛФ в 1 мм крови, не превышающих 350, у 12 детей, больных хронической неспецифической пневмонией.Дифференциально-диагностическаяценность такого исследования выражается более резким снижением уровня)показателя у больных хронической пневмонией, чем у больных рецидивирующимбронхитом (табл. 1),При этом для хронической пневмонии наиболее типичны (табл. 2) величины показателя, не превышающие350 РОЛФ в 1 мм крови (вероятность99), а для рецидивирующего бронхитавеличины в пределах 601-988 РОЛФ(вероятность 96),В подгруппе больных хроническойпневмонией наиболее типичными дляданного заболевания величинами показателя, не превышающими 350 РОЛФ в1 ммоптимальным нижним пределомдиагностического теста явилась цифра151 (табл.3).Способ осуществляется значительнобыстрее (2-3 часа) и является болеепростым, чем реакция бласт-трансфор.мации. Кратковременность исследова"ния избавляет от. необходимости строгого соблюдения правил асептики, антисептики. Подсчет розеткообраэующихлимфоцитов с помощью фазовоконтрастной микроскопии может быть поручендаже начинающему исследователю. Всеэтб позволяет внедрять предлагаемый,способ даже в условиях районных боль- НИЦе759094 Таблица 1 Величина показателя Группы детей Здоровые 18 1342,0 90,11 382,1 Больные хронической пневмонией,в фазе обострениязаболевания 220,23 279,64 30 459,0 25 615 р 0 46,19 55,93 в фазе затихания Больные рецидивируюцимбронхитомв фазе обострениязаболевания 26 7350 9 557,0 68,49 55,96 349,20 170,88 в фазе затихания Р ( 0,001, Р ( 0,001, Р, ( 0,001; Р ( 0,05, Р ( 0,001. Таблица 2 0,99 12 (40,0) 11 (26,7) 7 (23,3) дб 350,0 0,96 3(11,5) П р и м е ч а н и е: Достоверность различия показателей относительной доли ойределяли при альтернативноманализе, применяя формулу Фишера 1=2 ага(пР,где Р - доля особей (в ). При малом численаблюдений в группах в вычислительные процентывносили поправку на непрерывность Иетса. Таблица 3 Количество детей Величина показателя 130-150 РОЛФ/мм151-200201-250251-300301-350 351-600,0601-988,0.989,0 2 (7,7) 8(30,8) 13 (50)759094 рения и упрощения способа, в кровиопределяют содержание розеткообразующих лимфоцитов (РОЛФ) и при величине 151-350 РОЛФ в 1 юРдиагностируют хроническую неспецифическуюпневмонию, а при величине 601-988РОЛФ в 1 мм- рецидивирующий бронхит. СоставительТехред Е.Гаврилешко Корректо И. емчик Тираж 673 ЦНИИПИ ГосударстВенного по делам изобретений 113035 Москва 3-35 Р5 лиал ППП Патент , г. Ужгород, ул. Проектная,Формула изобретенияСпособ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита путем определения в крови показателяТ"Фиетенй иммунитета, о т л и ч а ю- щ и и о.ятем, что; с целью ускоПодписноеомитета СССРоткрытийская наб. д