Способ получения адриамицина

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯй ПАТЕИТУ ЗЗИЗ 7 Соссз Советских СоциалистическихРеспублик Зависимый от патентаЗаявлено 10,17.1969 С 07 с 15/1319914/23-4) Приоритет 12.1 Ъ.19 б 8,15159 А/б 8, ИталОпубликовано 07,111,1972, Бюллетень Л 9 Комитет па дел иэобрете при Сои и открытие Министровсср ДК 547 6 07(088 8 Да бликования описания 18.т/.1972 Авторыпзобрстсш Иностранцыжованни францесчи (Италия) Сергио Пенк амоне,ко 1 ност ранные фирмыарм италия(Италия) явители Сосьета ОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДРИАМИЦИНА роизводные формулы ч-тасти получения адающего цен.С 11,0110 формулуКХ О 1- СНэ - СН - С де ОЕН,0 0 Н О К)иают взаимодейстреде инертногои на получененпроизводное Н, О 1подверг мом в с рителя 14-галог Н - СНэ - СН - СН Нз,заключают ом, что дуаномицин или его Изобретение относится к об антибиотика адриамицина, об ными свойствами.Известен микробиологическ чения адриамицина с помо низма Ягер 1 отпусез репсе 1 шзПредлагаемый химический ния адриамицина формулы й способ полу ью микроорга аг саев 1 пв, способ получе ию с йодом или брорганического раствоое соответствующее действуют ацетатомщелочного металла в среде полярного органического растворителя с последующим щелочным гидролизом полученного 14-ацетоксипроизводного, отщеплением защитной группы и выделением целевого продукта известными приемами.В случае галогенирования дуаномицина йодом желательно, чтобы реакция протекала в основной среде, например в присутствии окиси кальция. Указанная реакция идет преимущественно при комнатной температуре, по ее можно проводить и при нагревании, лучше в среде инертного газа.Найдено, что аминогруппу аминосахара дауномицина целесообразнее защищать соответствующей защитной группой, особенно когда в качестве галогенирующего агента выступает йод. С этой целью можно использовать одну из известных групп, способны.; защищать амипогруппу, например ацилпроизводное либо основание Шиффа, 1 Чожно также защитить эту группу образованием соединения трифторацетилпроизводного либо соответствующего основания Шиффа с салициловым альдегидом,Трифторацетилпроизводное даупомицина получают известным способом взаимодействием дауномицина в виде свободного основания с трифторуксусным ангидридом в присутствии органического растворителя, а основание Шиффа - взаимодействием хлоргидрата дауномицина с салициловым альдегидом,При реакции галогенирования с бромом или йодом получают соответственно 14-бром- или йодпроизводное, которое взаимодействует с ацетатом щелочного металла, например ацетатом калия, в присутствии полярного растворителя такого, как ацетон. Реакция протекает при нагревании в течение короткого промежутка времени либо на холоду, что удлиняет ее продолжительность, В результате образуется 14-ацетоксипроизводное дауномицина, которое после гидролиза в щелочной среде превращается в соответствующее 14-оксипроизводное,В случае использования 14-бромпроизводного соответствующее 14-оксипроизводное можно получить при непосредственном воздействии щелочи на это 14-бромпроизводное.Когда берут дауномицин с аминогруппой аминосахара, защищенной соответствующей защитной группой, перед тем как отделить конечный продукт, эту защитную группу удаляют уже известным способом.Удаление салицилиденовой группы происходит в результате гидролиза М-салицилиденадриамицина в кислой среде, а трифторацетильной группы - после обработки Х-трифторацетиладриамицина этиловым о-муравьиным эфиром и и-толуолсульфокислотой для получения Х-трифторацетиладриамицин,14- этил-о-муравьиного эфира, из которого затем трифторацетильную группу удаляют гидролизом в щелочной среде.После гидролиза адриамицин,14-этил-о 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 муравьиного эфира в кислой среде получают свободный адриамицип.П р и м е р 1. 1,3 г хлоргидрата дауномицина в 30 лл метилового спирта и 100 ял безводного диэтилового эфира обрабатывают 3,3 ял раствора 10 г брома в 100,ял хлороформа. Получеш 1 ую реакционную смесь выдерживают 4 час при комнатной температуре, упаривают досуха при пониженном давлении, полученный осадок растворяют в 5 - 10 лл хлороформа и добавляют к этому раствору трех-пятикратный объем этилового эфира. Хлоргидрат бромдаупомицина выпадает в виде осадка с выходом 1,1 г. После перекристаллизации из смеси растворителей хлороформ - метанол он имеет т. пл. 177 - 178 С,Раствор 1 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 150 лл метилового спирта обрабатывают 70 ял дистиллированной воды, добавляют к этому раствору 0,1 н. раствор гидрата окиси натрия доводят рН до 10,3, и выдерживают его при таком рН 20,нин, Все процессы ведут в среде азота.Затем после разбавления полученного раствора дистиллированной водой его многократно экстрагируют хлороформом до тех пор, пока все окрашивающие вещества не будуг извлечены р астворителем.Объединенные хлороформные экстракты высушивают над безводным сульфатом натрия, упаривают при пониженном давлении до небольшого обьема, смешивают с 1,8 мл 0,6 н, раствора соляной кислоты в безводном метаноле и обрабатывают десятикратным объемом этилового эфира.Получают 0,72 г аморфного осадка, который выкристаллизовывается из смеси метанол - пропанол. При этом выход хлоргидрата адриамицина 0,45 г и т, пл. 205 - 210 С (с разл.).П р и м е р 2. Полученную по примеру 1 суспензию 6,6 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 200 яя безводного ацетона смешивают с 1,8 г плавленого и тонкоизмельченного ацетата калия, фильтруот после нагревания ее с обратным холодильником в течение 45 мин и полученный раствор досуха упаривают при пониженном давлении. Осадок, растворенный в хлороформе, обрабатывают этиловым эфиром и очищают 0,45 г осадка фильтрацией его через колонку, наполненную салициловой кислотой (система растворителя включает хлористый метилен - метанол - воду, взятых в соотношении 120: 20; 2). В результате получают 150 лг 14-ацетоксидауномицина с т. пл. 196 - 198 С.Раствор 0,1 г 14-ацетоксидауномицина в 30 лл смеси ацетон - метанол (2: 1) смешивают с 10 лл 5/О-ного раствора бикарбоната натрия. Смесь выдерживают 3 час при комнатной температуре и затем после разбавления ее водой экстрагируют хлороформом,Полученные хлороформные экстракты соединяют вместе и высушивают над безводным сульфатом натрия, затем упаривают до получения небольшого объема при пониженном давлении, Упаренный раствор смешивают с 0,15 мл 0,6 н. раствора соляной кислоты в безводном метаноле, а затем с трехкратным объемом этилового эфира. Аморфный осадок пропускают через колонку, наполненную 40 г порошка целлюлозы. Его элюируют системой растворителей пропанол - этилацетат - вода, находящихся в соотношении 7: 1: 2 (по объему).Фракции, содержащие адриамицин, объединяют и упаривают досуха. Получают 43 мг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204 - 210 С (с разл.).П р и м е р 3, 4,6 г свободного основания дауномицина в 390 мл хлороформа и 155 мл безводного эфира обрабатывают 9,3 мл трифторуксусного ангидрида. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 30 мин, экстрагируют водой и органическую фазу упаривают досуха под вакуумом. Осадок растворяют в 100 мл безводного метанола и нагревают с обратным холодильником 10 лин, Раствор метанола упаривают досуха, и осадок, выкристаллизованный из смеси растворителей тетрагидрофуран - петролейный эфир, дает выход 4,5 г М-трифторацетилдауномицина с т. пл. 169 - 171 С.0,6 г М-трифторацетилдауномицина в 30 мл тетрагидрофурана и 20 мл безводного метанола смешивают с 0,5 г йода и 0,5 г тонко- измельченной окиси кальция. Смесь выдерживают в среде азота при одновременном встряхивании 5 час, затем ее фильтруют и раствор, разбавленный хлороформом, взбалтывают вместе с водой при подкислении соляной кислотой до изменения окраски лакмусового индикатора. Органическую фазу упаривают досуха под вакуумом, осадок растворяют в небольшом количестве хлороформа и затем подвергают хром атогр афическому р азделению при элюировании хлороформом, содержащим повышенные количества этил ацетата.Целевой продукт элюируют хлороформом, в котором концентрация этилацетата составляет примерно 10%. Получают 0,25 г 14-йод- К-трифторацетилдауномицина с т. пл. 172 - 175 С.0,8 г этого соединения в течение 15 мин нагревают с обратным холодильником вместе с 60 мл безводного ацетона в присутствии 1,5 г плавленого и тонкоизмельченного ацетата калия. После фильтрации этот раствор в хлороформе взбалтывают с водой при медленном подкислении разбавленной соляной кислотой (до изменения цвета лакмусового индикатора). Органическую фазу упаривают почти досуха под вакуумом и к осадку добавляют петролейный эфир. При осаждении получают 0,62 г 14-ацетокситрифторацетилдауномицина с т, пл. 150 - 153 С.1,4 г этого продукта, растворенного в смеси 50 мл метанола и 100 мл ацетона, смешивают со 100 мл 5%-ного водного раствора бикарбоната натрия. Полученную смесь выдержи 5 10 15 20 25 30 35455055 вают 3 час при комнатной температуре и в среде азота, затем смешивают с водой, подкисляют водным раствором винной кислоты до тех пор, пока рН не станет равным 5 - 6, и многократно экстрагируют хлороформом при общем количестве используемого растворителя 350 мл. Органические фазы объединяют и упаривают при пониженном давлении, При этом образуется 0,95 г твердого осадка, который растворяют в хлороформе и разделяют в хроматографической колонке. Полученный таким образом Х-трифторацетиладриамицин элюируют хлороформом, содержащим 15 огго этилацетата. При объединении элюатов и последующем их упаривании получают 0,56 г целевого продукта с т, пл. 174 в 1 С.0,45 г Х-трифторацетиладриахгицина в 80 игл диэтилового эфира смешивают с 10 м,г этилового о-муравьиного эфира и 3 мг гг-толуолсульфокислоты. После выдержки в течение 48 час при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют хлороформом и промывают водой прп интенсивном взбалтывании в дел ительной воронке, Органическая фаза, упаренная до небольшого объема, образует 35 г осадка при добавлении петролейного эфира. Полученный продукт разделяют в хроматографической колонке, заполненной 7 г салициловой кислоты, при элюировании хлороформом, содержащим 104 этилацетата. При упариванпп элюата образуется 80 мг 9,14-х 1- трифторацетиладриамицинэтилхлормуравьиного эфира с т. пл. 162 - 164 С.0,2 г этого соединения растворяют в смеси 10 мл ацетона и 40 м г 0,1 н. раствора гидро- окиси натрия в среде чистого азота. После выдерживания раствора в течение 20 мин при комнатной температуре добавлением 1 н. раствора соляной кислоты доводят рН до8,6 и этот раствор многократно экстрагируют 50 лгл хлороформа до тех пор, пока все красящие вещества не перейдут в растворитель.Объединенные хлороформные экстракты упаривают, пока не останется небольшойобъем, и подвергают хроматографическому разделению в колонке, заполненной 4 г салициловой кислоты. Элюирование осуществляют смесью растворителей хлористы й метилен - метанол - вода в соотношении 50: 10; 1, Приупаривании элюата получают 0,11 г адриамицин,14-этил-о-муравьиного эфира с т. пл.203 в 2 С.Раствор 0,1 г этого соединения в 9 мл ацетона смешивают с 1 мл 1 н, раствора солянойкислоты. Этот раствор выдерживают при комнатной температуре 20 час, Полученный осадок, выкристаллпзованный из системы растворителей метанол - пропанол, дает 40 ,ггг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204 в 2 С 6065(с разл.).П р и м е р 4. Раствор 1 г хлоргидрата дауномицина в 30 мл дистиллированной воды смешивают с 0,1 и. раствором гидроокисп натрия до рН 8,6, а затем его раствор обрабатывают 10 м,г 10 ого-ного раствора салициС 0 Н пенной 3 г салициловой кислоты. Элюирова ние осуществляют смесью растворителей хлористый метилен - петролейный эфир - метанол в соотношении 10: 50: 5.Фракции, содержащие исходный продукт и прочие примеси, сливают, а остальные соби рают и упаривают, в результате чего получают 65 яг салицилиденадриамицина с т. пл. 194 С (с разл.).Раствор 0,2 г салицилиденадриамицина в 20,чл хлороформа трехкратно экстрагируют 45 0,1 и. раствором соляной кислоты, добавляя каждый раз по 10 лл, Окрашенный продукт полностью переходит в водную фазу, который в среде азота подщелачивают гидратом окиси натрия до рН 8,6 и экстрагируют хлорофор мом вплоть до полного обесцвечивания экстрактов, Эти экстракты объединяют и сушат над безводным сульфатом натрия, упаСН - СН - СН где К имеет формулуХХ ОН- СН 1Н - СН гден нХ -Н Сподвергают взаимом в среде инерителя и на 114-галогенпроизвщелочного металнического раствлочным гидролизпроизводного, снделением целевприемами. ОЧ=СН-илиОСР,модействию с йодом или брортного органического раствоголученхое соответствующее одное действуют ацетатом ла в среде полярного оргаорителя с последующим щеом полученного 14-ацетоксиятием защитной группы и выого продукта известными ривают при пониженном давлении до тех пор, пока не останется 5 лл, и смешивают с 0,5 мл дактор Л. Ильин Г. Жук Корректоры: Е, Исакова .и Т, Бабакина стави Заказ 1333/5 Изд.554 Тираж 448 ПодписноЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий прн Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская иаб., д. 45 р. Сапунова, 2 погра и лового альдегида в метаноле. Осадок извлека 1 от и промывают водой, затем его кристаллизуют из этанола и в результате получают 0,97 г салицилидендауномицина с т. пл, 168 - 170 С.Раствор 0,5 г салицилидендауномицина в 20 лгл тетрагидрофурана смешивают с 10 лгл безводного метанола, 1 г йода и 1 г окиси кальция. Смесь медленно нагревают с обратным холодильником 40 лик, фильтруют и упаривают досуха при пониженном давлении. Осадок растворяют в 22 лл хлороформа, Хлороформный раствор, промытый водой при взбалтывании и высушенный, упаривают, оставляя небольшой его объем, и смешивают с петролейным эфиром для полного осаждения продукта. Получают 0,41 г сырого 14-йодсалицилидендауномицина,Этот продукт растворяют в 20 лл безводного ацетона, обрабатывают 80 г плавленого и тонкоизмельченного ацетата калия и нагревают с обратным холодильником 20 мин, Затем эту суспензию охлаждают, фильтруют и фильтрат досуха упаривают в вакууме. Осадок, состоящий из 14-ацетоксисалицидендауномицина, растворяют в смеси равных частей растворителей метанола - ацетона и смешивают с 18 лл 5-ного водного раствора бикарбоната натрия. Эту реакционную смесь экстрагируют хлороформом при комнатной температуре в течение 3 час. Хлороформный экстракт упаривают до тех пор, пока не останется примерно 10 лел, и подвергают разделею в хроматографической колонке, запол 10 15 20 25 Зо 0,6 н. раствора соляной кислоты и десятикратным объемом безводного этилового эфира, Получают 0,12 г хлоргидрата адриамицина с т. пл. 205 в 2 С (с разл.). Предмет изобретения Способ получения адриамицина формулыотличающийся тем, что дауномицин или егопроизводные формулы