Способ отбора пробирочных растений земляники для беспересадочного хранения

союз советскихсоциАлистическиРЕСПУБЛИК Ю 1)5 А 01 Н 4/00 И ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУВ,Веселова и рые аспекты старанением растиники 1 п чйго - . доводства: Тезиой научно-пракпосвященной ства. ч.1 - Киев,ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Самсонова О.Н, Некоторения растений в связи с хтельного материала земляПроблемы современного сасы докладов Республикансктической конференции,60-летию УкрНИИ садовод1989, с, 37-39,Изобретение относится к сельскому хозяйству, биотехнологии, в частности к созданию и чтго коллекции оздоровленного сортового материала вегетативно размножаемых растений, а точнее к отбору растений для депонирования без обновления питательной среды.Известен способ отбора растений земляники для длительного сохранения 1 и ч 11 го, основанный на отборе медленно растущих растений из массы культивируемых в обычных условиях эксплантов.Наиболее близким к предлагаемомуявляется способ визуальнои оценки пробирочных растений земляники при их длительном сохранении по четырехбальной системе.К недостаткам способа относятся субьективность визуальных оценок жизнеспо(54) СПОСОБ ОТБОРА ПРОБИРОЧНЫХ РАСТЕНИЙ ЗЕМЛЯНИКИ ДЛЯ БЕСПЕРЕСАДОЧНОГО ХРАНЕНИЯ(57) Изобретение м.б. использовано в сельском хозяйстве, биотехнологии для создания коллекции оздоровленного сортового материала вегетативно размножаемых растений, Отбор пробирочных растений земляники для беспересадочного хранения осуществляют путем определения уровня Замедленной люминесценции листьев, который определяют в динамике в течение 6-8 недель при культивировании растений после посадки их на питательную среду, а для хранения отбирают растения с постоянно нарастающим уровнем замедленной люминесценции, 2 ил 2 табл. 4 собности растений, невозможность прогна- Ц) эирования изменения ихсостояния, а также отсутствие возможкостй отбора долгоживу- у щих пробирочных растений.,Цель изобретения - повышение эффективности способа. ОсПоставленная цель достигается тем, что на протяжении депонирования периодически (раз в две недели) регистрируют через стекло замедленную люминесценцию (ЗЛ) листьев растений, не вынимая их из пробирки, причем долгоживущие растения отличаются постепенным увеличением уровня ЗЛ и его стабилизацией на 4-6 неделе культивирования, тогда как короткаживущие характеризуются резким воэростанием и внезапным снижением максимального и стацйонарного"уровней ЗЛ уже в первые.недели культивирования, на графике выгля дящие как скачкообразные изменения (фиг.1, 2).Способ основан на том, что с возрастанием фотосинтетической активности возрастают уровни ЗЛ, как максимальный, так и стационарный: для долгоживущих растений, сохраняемых в пробирках без обновления питательной среды, характерно постепенное нарастание фотосинтеза и стабильное поддержание его уровня в течение длительного времени, в отличие от неустойчивого фотосинтеза короткоживущих растений,Замедленной люминесценцией называется испускание света фотосинтезирующими тканями, например листьями растений, в течение некоторого времени после прекращения их освещения, Объект освещают кратковременными (в несколько миллисе-, кунд) импульсами света, в промежутках между которыми регистрируют излучение от объекта известным устройством для определения влажности семян, При включении светауровень ЗЛ листьев (находившихся предварительно в темноте) резко возрастает, достигает максимума (максимальный уровень ЗЛ-плакс), затем снижается к уровню, который не йзменяется в течение некоторого времени (стационарный уровень ), По мере роста и развития растений эти уровни постепенно увеличиваются, что свидетельствует об увеличении их фотосинтетической активности.П р и м е р 1. Экспланты земляники сорта Зефир в пробирках на агаровой среде, имеющие один или несколькозеленых листьев, культивируют в стандартных условиях: 16 ч - свет; 8 ч - темнота; освещенность на свету 5-8 клк, температура 20-25 С, Раэ в две недели начиная со второй недели культивирования регистрируют ЗЛ листьев земляники, не вынимая их из пробирки и не нарушая их целостности, через стекло. ЗЛ возбуждают красным светом (640 нм), что предотвращает люминесценцию стекла, которая возбуждается ультрафиолетовым и синим светом (550 нм). Динамика уровней ЗЛ в течение 10 недель культивирования у долгоживущих и короткоживущих пробирочных растений приведена в табл,1 и на фиг,2,Из табл.1 видйо, что у менее жизнеспособных, короткоживущих растений, погибших к концу срока культивирования, .в первые две недели культивирования регистрируется резкое возрастание уровней ЗЛ и вйезапное их снижение, в отличие от долгоживущих. Достижение максимального значения уровней ЗЛ наступает тем позже,. чем дольше живет растение, т,е. чем.вышеего жизнеспособность. Регистрация ЗЛ позволяет выделить из массы объектов те, которые способны сохраняться длительное5 время без пересадки на свежую питательную среду.П р и м е р 2, Экспланты земляникисортов Зефир, Зенит, Алая зорька. Золушкав пробирках на агаровой среде, имеющие10 один или несколько зеленых листьев, культивируют условиях по примеру 1. Динамикауровней ЗЛ втечение 10 недель культивирования у двух контрастных по жизнеспособности вариантов сопоставлена в табл.2 с15 изменениями визуальной оценки жизнеспособности в баллах тех же растений. В табл,2приведены средние значения по 20 растениям указанных сортов,Как видно из табл,2, визуальная оценкарастений двух вариантов совпадает до 6 не 20 дель культивирования, Однако уровни ЗЛкак максимальный, так и стационарный, урастенийварианта достигает максимального значения на 4-й неделе культивирования, а затем снижается. Визуальные25 признаки, которые свидетельствуют о снижении жизнеспособности, в это время ещеотсутствуют. Снижение ЗЛ позволяет предполагать, что растения первого варианта теряют жизнеспособность. Действительно, к30 десятой неделе культивирования они практически все погибли. У растенийвариантанарастание уровней ЗЛ происходило медленно и их жизнеспособность держалась наотносительно высоком уровне в течение35 всего срока культивирования. Таким образом, с помощью контроля эа изменением ЗЛможно прогнозировать поведение эксплантов при депонировании их беэ обновленияпитательных сред, определять предельные40 сроки пересадок на свежую питательнуюсреду,Предлагаемый способ позволяет проводить оценку жизнеспособности пробирочных растений, их устойчивости к45 длительному хранению и чего независимоот субъективного мнения экспериментаторов при обеспечении целостности и стерильности объектов, Кроме того, онпозволяет определять предельный срок50 культивирования эксплантов беэ обновления питательной среды, а также отбиратьдолгоживущие растения земляники, наиболее пригодные для депонирования. Формула изобретен ияСпособ отбора пробирочных растенийземляники для беспересадочного хранения,включающий определение. характеристиксостояния растения, о т л и ч а ю щ и й с я1750556 Таблица 1 П Табли римечание," тения погиб 8 1 сдель нлы 7 уцбд/06 йо с о ремяФиг,1 тем, что, с целью повышения эффективности способа в качестве характеристики состояния растения используют уровень замедленной люминесценции листьев, который определяют в динамике в течение 6-3 е ч а н и е, "." -растение погибло,недель при культивировании растений после посадки их на питательную среду, и для хранения отбирают растения с постоянно нарастающим уровнем замедленной люми несценции.1750556нЕЗЕл Ь Кулб пи 1 иром над Ц о К Мксимишинецактор Л.Пчолинская Техред М,Моргентал Коррект Заказ 2632 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобРетениям и открытиям при ГКН113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4 Дроизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 1