Способ исследования капиллярного кровотока

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК1303133 19 1 В 500 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ СТВУ к биологии, едиазначено ),ИНЫ. ЦСЛЬ сти способа.1 ого региона ффуцдируютвор краски ной белками ю)ций через катор (обезГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ А ВТОРСНОМУ СВИДЕ(71) Пермский государственный медицинский институт(54) СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ КА 1 И.1 ЛЯРНОГО КРОВОТОКА(57) Изобретение относитсяа именно к физиологии, и прдля экспериментальной меди 1изобретенияповышение точноДля этого в артерию исследуеьгводят болюс, содержащий недищий индикатор (1%-ный расголубой Эванса, адсорбированплазмы крови) и диффундирувс)о поверхность эцдотелия инди Воженцыи эг 1)Ви спирт) из расчета 5 7 мг краски и 0,5 0.7 мл этилового спирта Прн К 1)ОНОТ)КЕ 1(10 МЛ/)Иц. БОЛЮС ВВОдят 1- 3 с и одновременно из Вены этого региона заОирают кровь В течение 1 мин п 01)циоццо, каждьс 4 -с.,)атем И 1)оводят анализ порций крои. га содержание краски (спектрофогометричсски) и этилового спирта (метод газовой хроматографии). Строят на каждый опыт график хроцокоццецтрационной зависимости, имсюпси вид полусинусоидыЧакси ма,1 ь Ос значение конжцтра ци и краски мказы паст на содержание индикаторов ца Входе В систему микр 1)сосудов, а концентрация с,и рта на ООГ;1 нц)мюс 51 13 сть в крови КЗЦИ,1,ЯРОВ и)и 1 СТЗЦОВИВЦЕМСЯ Диффмзиоццом ранОВссип 1 сж,"1 м кровь 10 и тканями. Величину капиллярцого кровотока определя)от по формуле )л = - Я,К где (;)л капиллярцый кровоток, с) - регионарцый кРОВОток; Адо,151 капиллЯРИОго кРОВО- тока.табл.10 15 20 25 Изобретение относится к биологии, а именно к физиологии кровообрашения, и может быть использовано в экспериментальной медицине.Цель изобретения - повышение тоцности способа за счет испо.ьзования в качестве диффунлируюсцего индикатора этанола, а в качестве недиффундируюгцего индикатора -- красителя голубого Эванса, адсорбированного на белках плазмы.Способ осуществляется следующим образом,В артерию исследуемого региона вводят болюс, содержащий недиффундирующий индикатор (1 О-ный раствор краски голубой Эванса, адсорбированной белками плазмы крови) и диффундируюций через всю поверхность эндотелиг 1 индикатор (обезвоженный этиловый спирт). Доза индикаторов подбирается в зависимости от велицины объемного кровотока через регион из расчета 5 - 7 мг краски и 0,5 - 0,7 мл этилового спирта при кровотоке 100 мл/мин.Болюс вводят в течение 1 - 3 с и одновременно из вены этого региона забирают кровь в течение 1 мин порционно за каждые 4 - 6 с. Затем проводят анализ порций крови на содержание краски (спектрофотометрическим методом) и этилового спирта (метод газовой хроматографии) по стандартным метсдикам. Концентрации указанных индикаторов в порциях венозной крови выража 1 от в относительных величинах, строят на каждый опыт график хроноконцентрационной зависимости, которая имеет вид полу- синусоиды. Максимальное значение концентрации краски указывает на содержание индикаторов на входе в систему микрососудов, а концентрация спирта - на оставшуюся его часть в крови капилляров при установившемся диффузионном равновесии между кровью и тканями.Расчет доли капиллярного кровотока от общего регионарного проводят по фор- муле К (Т. Т )100/оТнгде Т, " - поток (массоперенос) краски голубой Эванса по системе микро- сосудов;Т - оставшийся поток этилового спирта в системе микрососудов.Для выцисления величины капиллярного кровотока используют формулу". Я = - Я К, где с - капиллярный кровоток; Яр - регионарный кровоток; К - доля капиллярного кровотока.Способ использован в экспериментах на наркотизированных кошках обоего пола весом от 3 до 4,5 кг (9 животных, 15 экспериментов). Под гексеналовым наркозом (100 мг/кг веса) в ветвь верхней брыжеечной артерии вволили болюс с индикаторами, венозную кровь собирали через канюлю,30 35 40 45 50 55 введеннус в верхнюю брыжеечную вену, проксимальный конец которой перевязывали. Концентрацию краски голубой Эванса определяли на спектрофотометре СФ, концентрацию спирта - иа газовом хроматографе. Способ иллюстрируется следуюсцими примерами.Прииер 1. Кот беспородный, вес 3 кг. Введено внутрибрюшинно 300 мг гексаиола; в яремную вену 750 ед. гепарина. Из этой же вены взято 2 мл крови для получения плазмы, которую испльзмкт для осаждения на ее белках краски голубой Эванса. Через 40 мин сделана лапаротомия по средней линии живота.В корне брыжейки отпренарована вена и идугцая рядом верхняя брыжеецная артерия, ветвь которой к поперечц-ооодочной кипке перевязана и в пее вставлены канюля. Канюля вставлена в всрхшою брыжеечную вену, которая перевязана проксимальнее.С 11 омопсью:пприца через артериальную канюлю введен болюс, содержаций 2 мг краски голубой Эванса, разведенной в 0,2 мл физраствора, 0,2 мл обезвоженного спирта, 0,5 мл плазмы. Болюс введен в тецение 2 с и сразу же начат сбор кроьи через венозную канюлю в заранес пригсгговленные 12 мерных пробирок порциями за 5-секундные интервалы. Измерякгг количество крови ь каждой пробирке, берут лля анализа из каждой порции 0,2 мл крови для пссле сования на голуоой крс 1 сиггсл 1 ЭВГ 1 нса и 0,5 мг для ОГределения эгилового спирта.Рассцитывают относительное содержание индикаторов в каждой порции, строят по этим данным график хроноконцснтрационпой зависимости. Максимальное значение голубой Эванса составло 635 10 , максимальное значение этилового спирта 160 Х 10отн. сд. Рассчитывают по указанной формуле долю капиллярпого кровотока в обгцем регионариом, которая равна 74,8 Я. Объемный кровоток через топкую кишку равен 42 мм мин, следовательно, капиллярный кровоток 31,4 мл/мин,Пример 2. Кот беспородный, вес 3,5 кг. Введено внутрибрюшинно 350 мг гексанола, в яремную 1 зену9 ОГГ ед. гепарина. Г 1 одготовка сосудов к эксперименту проведена, как описано выше. Через вснозную канюлю сделано кровопускание (28,6 мл). В артериальную канклю введен болюс: 2 мг голубой Эванса на 0,2 мл физраствора, 0,2 мл этилового спирта, 0,5 мл плазмы крови. Забор крови через 5-секундные интервалы в 12 мерных пробирок. Измерено количество крови в каждой пробирке, взято для анализа из каждой пробирки 0,2 мл крови для исследования на голубую Эванса и 0,5 мл для определения этилсного спирта.(303(33 Относительное максимальное значение голубой Эванса равнялось 485 10 , а этилового спирта 157,5 10 ", Доля капиллярного кровотока составила 67,9 О. Объемный кровоток через регион равен 28,8 мл/мин. Пример 3, А. Кот, 4,0 кг. Введено в артерию региона 2 мг голубой Эванса и 0,2 мл этилового спирта. Объемный кровоток составил 39,7 мл/мин, доза голубой Эванса в пересчете на кровоток 100 мл/мин равнялась 5 мг, этилового спирта 0,5 мл. Голубая Эванса, г/мл Этиловый спирт, 7Б Порциякрови АБ 0 550 10950 10540, 1 0-7 36010 225 10 1,5 3, 15 2,7 1,05 1,9 1,9 1,85 1,85 210 10 560 101,65 1,05 200 10400 0340 10 0,95 1,5 190 10 14010 10010 0,9 1,3 10 200 10 1,2 0,9 14010 " 0,7 12 Максимальная концентрация красителя в первом эксперименте составила 912 Р, К 10г/мл, во втором 950-1 0г/мл; максимальная концентрация этилового спирта 1,9 и 3,15% соответственно. Таким образом, предлагаемый диапазон средней дозы индикаторов создает в оттекающей крови концентрацию индйкаторов, оптимальную для исследования с использованием спектрофотометра и газового хроматографа.Пример 4. А. Кот, 4,5 кг, Г 1 ри заборе крови 4 с максимальная концентрация голубой Эванса в пробирке 5 (20 с от момента введения краски) 8001 Ог/мл, максимальная концентрация спирта 1,9 О.При заборе крови через 5 с максимальная концентрация голубой Эванса в пробирке 4 (20 с от момента введения краски) составила 12 1037 10500 1091210890 10Концентрация этп. индикаторов в оттекающей венозной крови региона представлена в таблице.Б. Кот, 3,5 кг. Введено в артерию региона2 мг голубой Эванса и 0 2 мл этилового спирта. Объемный кровоток составил 28,6 мл/мин, т. е. доза голубой Эванса в пересчете на кровоток 100 мл/мин равнялась 6,99 мг (7 мг), этилового спирта 0,699 мл (0,7 мл) .10Концентрация индикаторов в оттекающейвенозной крови представлена в таблице. 800 10-г/мл, спирта 1,9 О. Капиллярный кровоток равен 77 О от регионарного.При заборе крови через 6 с максимальная 45 концентрация краски в пробирке 3 (8 сот момента введения краски) равна 790 Х К 10г/мл, спирта 1,9 О. Капиллярный кровоток равен 76% от регионарного.Разница значений капиллярного кровотока при заборе крови в диапазоне от 4 до б с составила 1 о.Б. Кот, 3,5 кг. При заборе крови через5 с максимальная концентрация краски составила в пробирке 4 (20 с от момента введения) 950 10г/мл, спирта 3,15 О.Капиллярный кровоток равен 67 О", от регионарного.При заборе крови через 4 с максимальнаяконцентрация краски составила в пробирке 5(через 20 с после введения) 950)Огмл, спирта 3,5 ф о. Капиллярный кровоток равен 67 Я от регионарного.При заборе крови через 6 с максимальная концентрация краски составила в пробирке 3 (через )8 с после введения) 800)Огмл, спирта 2,554 о. Капиллярный кровоток равен 68 о от регионарцого.Разггица значений капиллярного кровотока при заборе крови в диапазоне от 4 до 6 с составила/.1 ОСледовательно, укорочение времени сбора крови до 4 с пе меняет точности исследования по сравнению с забором ее через 5 с; удлинение времени до 6 с допустимо, так кк изменяет расчетные показатели толькоО/Использование изобретения по сравнениго с ивест ым способом исследования капиллярного кровотока повышает точность определения, так как применяется индикатор, диффундирующий через всю поверх- до 1 гость апдотсли 51 к 1 Ги;1,1 51 ров; )счет Величины кпиллярнсцо кровотока проводится ца основании данных о концентрации индикатора ца входе в систему капилляров и в период диффузионного равцовесия между капиллярной кровью и тканями, что достигается порционным забором крови в течение первой минуты после введения индикаторов.ФОРМли иобреГнг 51Способ исследования капиллярного кровотока путем внутриартериального введения диффундирующего и недиффундирующего индикаторов с последующим забором вецозной крови измерением концентрации в ней индикаторов и расчетом величины кровотока, ОтличаОчийсч тем. что, с целью новыпения точности определения, в качестве диффундирующего индикатора используют этанол, в качестве недиффуцдирукпцего индикаторкраситель голубой Эванса, предварительно адсорбированный ца белках плазмы,исследование проводят в динамике через кждые 4.6 с в течениемин.Составитель 11. Г 1 ляеваРедактор М.1 сдолужснко Тсхред Р. Верее Корректор Л. ОбручавЗакал 12385 Тираж 596 Подписное131 РР 111 осударствснного комитета СССР ш делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж - -35, Ра 5 шская наб., д. 45Произво 1 ствснно-полиграфическое предприятие,:. Ужгсрод, ул. Проектная, 4