Способ прогнозирования течения первичной артериальной гипертонии

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК 0еС.М сле ат сы р. Матеь титипов ге ой гипер ни 97 ИРОВАНИЯ ЛЬНОЙ ГИОСУДАРСТВЕНИЦЙ НОМИТЕТ СССРпо делдм изоБРетений и отнРыти(71) Горьковский госудадицинский институт им,и Горьковский научно-иский педиатрический инст(56) Надеждина Е. А. и дческое прогнозированиединамики при артериальну детей. - Педиатрия, 1с. 68-72.(54)(57) СПОСОБ ПРОГНОЗЧЕНИЯ ПЕРВИЧНОЙ АРТЕРИА 8011830 НИИ путем определения типа гемодинамики, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения точности способа в крови определяют содержаниецитохромоксидазы, молочной кислоты,серотонина и гистамина, определяютсоотношение содержания цитохромоксидазы к молочной кислоте, серотонинак гистамину и при уровне первого показателя ниже, а второго вьппе нормна фоне смешанного типа гемодинамикипрогнозируют прогрессирование гипертонической болезни, а при уровнеодного из показателей соотношенийв пределах нормы на фоне гипер- илигипокинетического типа гемодинамики -прогнозируют выздоровление.1 з о) рететтие относится к медицине,т(1(Отто к лабораторной диагнсстике,ожет быть примецецо,для прогнозирования течения первичной яртерияетьтой гипертонии, 5Цель изобретения - повышение точлос. г; способа.С 1,)соб осуществляют следуюшим обУ бо., Ного натощак берут кровь из );ецы и. огтределяют в ней актинност)и ")хг) гмок сидязы котцептряеито могг) (гс) "т ьис,тоть, серотониня и ги тамиОпе)едезтентте цитохромоксидазы в 15)-Рт Г П)2 Х ЗЛЕМЕНтХ КРОВИ ПРОИЗВОДЯТ)г, 1, )Иыг 1 Р О)ОМОГЩэку3 I э мл с.меси кс. Гто гч).; 2)тгтетт 1;3 2.5%-ного водно)"О ряст"В) );: )Суе"Ой КИСЛОТЫ гт 2-ОГО НОДг с) р,с Г)зсра винной кисттоть н г.ро:;гг ,:(, берут О, 5 мл крови из и;., .Пя, п 1)еСизаот до полно г) гегщ 0-.ге цтп ифу гиру ют г) и 1 5 О О о б /мтц;-) :,ирки, кроме нулевой пробы, доба ОТ . ГСт ДИМС)ТИ)тЯРЯФЕЦИПЕНД 1 МИта 11з ого вещества растворяют в .ОО мл с;цзртя) и ставят на 20 ниц ."з тсвог;осЯтЗсттем ОхлажДЯк)т и н Опыт 4 т ь)е пробы добянляот 9 мл 96"-1)ого сптрт, н ко.ттрольную - 6 3 мл спирта н цулеоуо - 6,5 мл и оставляот стоять Йа 1 ч, Зятем центрифугируют 20 мин при 1500 об/мин, Результат смотрят 5 О па 1)ЗК-)1 при длине волны 656, кювете 1,0. на правом барабане. За едицицу активности фермента принимают сгс с и сл Он Од нь й э кн ин я и Р иг на ч и сл с)11 н ый Гто количеству молей образующегося в у реакции срасителя и умноженный ця 10 для удобства расчетов. Результаттрассчитывают по Формуле Х = (экстинция опыта - .)кстиция контроля) х 636.Пацример: Х =- (0,180-0,070 х 63669,9 ед.Опредстление котцецтряции з кровимол)чной кислоть Пров)Дят известнымметодом.Ход оцредезтегНтг: в цецтрифужггые пробирки цазИвяю Г 2 мл 2/ - пой трихлоруксусцой кис:)оты и О,ц мп крови, перемсзцттзаот и ццтриругиру:от 10 миц. Берут 1 мл цецтрифу ятя, прибавляют 0,5 мл 20%-ной СеВО 5 мл 11,0, 0,5 г окиси.кальция (прокялеццои).тщательно перемешит)ают стекцянцой палочкой до появ)1 ения Отубоо с)ср- )1 тНЯНИЯ, ОСтВЛЯЮТ СТОЯТЬ В:ЕчСЗНИЕ 30 миц, затем цецт;)и 1)у; ирукт"тапее н охлажттеццые в ледяной бане;гробит)кп помеоают 0,5 мл е трифугата, 2 кятт - Лц 52 - цой Стт)4, , МВ ХИМИЧР СС)1 ИС" той конце цтт)иротзаглой Б., БО Гдзгя :г)обы Совязтт), тгятезттп 1 о ГСГ)е.еоив:.1)оТ. В КотТрозть б;"ГМ)1 )1, О,кяпггц ),-пой СПБО,. 6 м 1. Бг.,с ( .)яте;т ставят п,)оби)Ки ца 5 минкипящую водяуго бяцю. Потом - ь тедтцую и добяв 1 яг);р 2 спгг Гв ;)тгт - Г,олг) -1 к П1) пят)ас",.ии 1)г 1 Итаме 1 ивяют пя,г)кс)и, ц)(итцатт г 1 с); ",с):т,т)ой Г,роб 1, Прог.Ирк о тг.Я)от з бяИо прц 33-36 С пя "0 .111 1 Осл-:Ро - в кип)(11 у 10 )Яцо 11 гО с (лотт)ясинао (з бане) и от)ять ОКГсзждяо ца еи:у, Казторгметррутг)т ца ) 31)-56 в кюветах 5 мм п(и зеленом фицьтре. Соерж нис. мс)ло)1 НОЙ сце 10 Гы цяхоят О Г:танДЯтЦОй КРИВОЛ )З МГЕ, ГтасРО- С гной по раствогям мото цой кислотыи.вестной тсоттттентряпттсй, 1 ля пере - )зод результат в млмоль/л )Сножютрезультат ца коэффициент 0,111.Г)цределение серотонина и гистаминя ттротзоцят следующим образом.У больного натощак из вены берут 5 и:1 срови и определяют в ней конценгряцию серотоцица известным метоДОф К э мл к 1)они добявляк)т 5 мл 107.-цого раствора трихлоруксусцой кислоты, тщтельно перемешивают и центрифугируют в течение 30 мин при 1500 Об./миц. Центрифугат фильт - руют и разделяют на дне равные части, Оттца из которых исттользуется для определения концентрации серотоцита,другая - гистямица.;ля определеця серотониця фильтрат ттодщелачивяот О, 5 мл 57-ного 4)ЯО)1, добавляют 0,5 мл боратного11830 буфера с рН = 10, 1,5 г ИаС 1, 15 млм-бутанола и встряхивают 10 мин. За-тем отделяют органическую фазу иэкстрагируют из нее серотонин путемвстряхивания 5 мл 0,05 М фосфатного 5буфера с рН 7,0 и 15 мл к -гептана.Встряхивают 10 мин, отделяют нижнююФазу (водную) и добавляют 0,1 мл01 М раствора нингйдрина. Ставятв водяную баню при 75 С на 30 мин, 10Флюориметрируют через 1 ч послебани на ЭФ-ЗМ (длина волны 385 ммк).Количество серотонина в опытныхпробах рассчитывают по стандартномураствору серотонина, в рабочем растворе которого содержится 1 мкг в1 мл воды (2 пробирки; в одной 0,5,в другой 1,0 мп раствора серотонина)Доводят до 5 мл фосфатным буферомс рН 7,0, добавляют 0,1 мл 0,1 М 20раствора нингидрина, и дальше все,как в опыте. Концентрацию серотонинав крови рассчитывают по формуле 0,5 мкг х 0 х 6,17 25 С х 2,5 где 0,5 - количество серотонина,мкгв стандартной пробе;0 - опыт;С - стандарт;.б,17 - коэффициент пересчета измкг/мл в мкмоль/л;2,5 - количество взятой в опыткрови.Например, при флюориметрированииопытной пробы флюоресценция рг вна34, стандарта - 40. Х1, 05 мкмоль /л. фО2 р 5 30 35 Для определения гистамина фильт рат помещают в широкую пробирку со шлифтом, добавляют 1,5 г ИаС 1, 0,5 мл 5 н,ИаОН, 10 мл бутанола. Встряхивают 5 мин и центрифугируют 5 мин при 2000 об./мин. Из пробирки пастеровской пипеткой удаляют нижний слой(водная Фаза). В бутаноловую фазуприбавляют 5 мл 0,1 н.ИаОН, насыщен ной ИаС 1. Встряхивают 1-2 мин и центрифугируют 5 мин при 2000 об./мин 50 Бутаноловую фазу (верхнюю) отсасывают и переносят в другую такую же пробирку, содержащую 4,5 мл 0,1 н, НС 1 и 15 мл гептана. Встряхивают 1-2 мин и центрифугируют 5 мин55 при 2000 об./мин. Нижнюю фазу от. сасывают и.переносят в обычную пробирку. Добавляют 0,8 мл 1 н. ИаОН,77 40,2 мл 1 Е - ного ОФА (орто - фталиевыйдиальдегид Сц Н О, - на метаноле) .После добавления ОФА раствор стоит точно 3,5 мин. Затем прибавляют0,4 мл 3 н. НС 1 и 2,1 мп О, 1 н. НС 1,доводя общий объем до 8 мл. Через3-5 мин пробы флюориметрируют. Количество гистамина в пробах рассчитывают по стандартному раствору гистамина с заведомо известной концентрацией, Для этого готовят сначала маточный раствор гистамина, содержащий100 мкг в 1 мл воды, затем рабочий раствор с содержанием 1 мкггистамина в 1 мл. Последний разводят в пять раз, получая разведение0,2 мкг/мл. Из полученного раствораготовят две стандартные пробы,Первая: 5 мл стандартного раствора, содержащего 0,2 мкг/мл + 0,8 мл1 н,ИаОН + 0,2 мл 1 Е-ного ОФА, далее - как в опыте,Вторая: 2,5 мл стандартного раствора, содержащего 0,2 мкг/мл + 2,5 мл0,1 н. НС 1 + 0,8 мл 1 н. ИаОН ++ 0,2 мл 17-ного ОФА, далее - как вопыте.Опытные стандартные пробы через3-5 мин флюориметрируют на ЭФ-ЗМ сфильтрами ФК(385 ммк) и В, - 2(550 ммк) - боковые.Концентрацию гистамина в кровирассчитывают по формуле0,5 хОх 8,99 Сх 2.,5 где 0 - опыт;С - стандарт;2,5 - количество крови, мл;0,5 - количество гистамина, мкг,ов стандартной пробе;8,99 - коэффициент пересчета измкг/мл в мкмоль/л.Например, при флюлориметрированииопытной пробы флюоресценция равна41, стандарта - 52.0,5 х 41 х 8,99Х 52 2 5 1,42 мкмоль/л.фТип гемодинамики определяют посоотношению минутного объема крови и периферического сопротивления, которое получают известным методом на основании величины систолического и диастолического давления и частоты пульса. Выявляют три типа гемодина - мики: гиперкинетический, гипокинетический и смешанный. Определение типа1183077 ВНИИПИ Заказ 6187/4 Тираж 721 Подписное Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул.Проектная, 4 гемодинамики может быть осуществлено любыми существующими методами,Получив результаты определенияв форменных элементах крови. активности цитохромоксидазы, выраженныхв условных единицах, и концентрациимолочной кислоты - в ммоль/л, рассчитывают полученные величины впроценте отклонения от нормы, и опре Оделяют соотношение этих показателей(ЦХО/МК). Так же, получив результаты определения концентраций серотонина и гистамина, выраженных вмкмоль/л, рассчитывают процентное 15отклонение их от нормы, и определяютих соотношение (сер./гис.),При соотношении показателей цитохромоксидаэы и молочной кислоты,равном 0,4-0,9 и серотонина и гистамина, равном 1,44-2,23, в сочетании со смешанным типом гемодинамикипрогнозируют неблагоприятное течение,а при значении этих соотношений 0,911,27 и 0,9-1,43; 0,91-1,27 и 1,44- 252,23, а также 0,4-0,9 и 0,9-1,43в сочетании с гипер- или гипокинетическим типом гемодинамики - благопрчятное течение,П р и м е р 1. Коля А., 12 лет. ЗоВ анамнезе: корь, коклюш, ветрянаяоспа, свинка, грипп, ангина, Повышенное артериальное давление. У материи дедушки гипертония. Отец умер откровоизлияния в мозг. Мальчик эмоционально лабилен, легко возбудим,трудно привыкает к новой обстановке.При поступлении в клинику в 1969состояние удовлетворительное. Сердце: границы нормальные, тоны слегка 4 Оприглушены, выслушивается систологический шум П,И ступени по левомукраю грудины. В легких без патологии.Артериальное давление колеблетсяв пределах 120/80-146/90 мм рт.ст. 45Дифференциальный диагноз проводятмежду первичной и симптоматическойгипертонией. Глазное дно обоих глаз:спазм сосудов сетчатки гипертонйческого характера без элементов склероза.Мальчика консультирует эндокринолог. Патологии не выявлено. Невропатолог днагностирует неврологическое состояние, Рентгенография черепа,грудной клетки и урография - патологии не выявлено.Биохимический анализ крови:серотонин 1,07 мкмоль/л (137,27, отнормы), гистамин 1,18 мкмоль/л(74,77. от нормы), цитохромоксидаза77,3 ед, (91,5 от нормы), молочнаякислота 2,99 ммоль/л (219,87 отнормы),Тип гемодинамики у больного смешанный, о чем свидетельствует повы шение минутного объема крови и повышение периферического сопротивления.Таким образом, соотношение ЦХО/МК 91,57равно= 0,42, а соотношениео137, 27.сер./гис. равно 4= 1,84, что,опозволяет диагностировать у больного гипертонию прогностически неблагоприятного течения при клиническом диагнозе: гипертоническая болезнь 1 А стадия.Катамнестическое наблюдение за больным подтверждает неблагоприятный диагноз заболевания, За период с 1969 по 1981 г. больной постоянно находился под наблюдением по поводу гипертонической болезни, лечился амбулаторно и дважды в стационаре, Будучи студентом университета, в связи с ухудшением состояния вынужден был дважды брать академический отпуск. Артериальное давление колеблется в пределах 160/90-180/120 мм рт.ст. Госпитализирован в больницу. Клинический диагноз; гипертоническая болезнь ПБ стадия,Невростенический синдром.Данный клинический пример ярко демонстрирует высокую информативность предлагаемого способа прогнозирования течения гипертонии, который позволяет выявить склонность к прогрессированию патологического процесса еще в самом начале формирования гипертонической болезни.