Способ определения пригодности материалов для аллопластики

С ото з СоветсинкСоциалистическиеРеспублик ОЛ ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКЬМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1 и 942694(5)М. Кл. А 61 В 10/00 е 1 твударвтевикыв каеетвт евер ао дввви изобретеии и отерыти 11Олубликовано 15.07,82. Бюллетень Рй 26 Дата опубликования ояисаиия 18. 07,82(53) УДК 616. .07(088.8) сердечно-сосудистои хирургии им. А.Н. Бакулева 5 Ч СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИГОДНОСТИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ АЛЛОПЛАСТИКИ1Изобретение относится к медицине и может быть использовано при отборе материалов, предназначенных для изго товления протезов кровеносных сосудов, протезов клапанов сердца, внут 5 рисосудистых катетеров.Известен способ определения пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим иссле о дованием тромбоцитов 111.Однако известный способ не обеспечивает высокой точности.Цель изобретения - повышение точности способа.15Поставленная цель достигается тем, что при определении пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим исследованием 20 тромбоцитов дополнительно исследуют цитратную бестромбоцитарную плазму, определяют в ней БАЭЭ-эстеразную (бензоиларгинина этиловый эфир) активность, затем в тромбоцитах определяют 5-нуклеотидазную активность и по величине этих активностей определяют пригодность материалов для аллоплдстики.П о и и е р 1. Для определения БАЭЭ-эстеразной активности калликреина во фторопластовую пробирку при 37 С помещают 0,5 мл плазмы и исопытуемый материал, Через 3 мин добавляют 1 мл раствора, содержащего 20 мМ й-бензоиларгинин этилового эфира и 1 мл вероналового буфера (рН 7,8) и инкубируют 1 ч при 37 С. Эатем добавляют 1,5 мл 103-ного раствора трихлоруксусной кислоты и смесь центрифугируют при 2500 об/мин в течение 1 О мин. К 2 мл супернатанта приливают 2 мл щелочного гидроксиламина, 1 мл раствора соляной кислоты, 2 мл 103-ного раствора хлорного железа в 0,1 н. растворе соляной кислоты и через 15 мин раствор фотометрируют на спектрофотометре при 540 нм.3Количество гидролизованного БАЭЭ определяют по градуировочному графику, построенному по известным концентрациям БАЭЭ в координатах: оптическая плотность - концентрация БАЭЭ. Активность выражают в микромолях гидролизованного БАЭЗ в течение 1 мин 1 л плазмы для поверхности в 1 см 942694 В таблице представлена тромбогенная активность исследуемых материа-, лов.45 П р и м е р 2. Для определения 10 5-нуклеотидазной активности исследуемые материалы (такой же площади, как в примере 1) инкубируют с 1,5 мл цельной крови во фторопластовой пробирке 15 мин, отмывают Физиологическим раствором для удаления неадгезированных на поверхности форменных элементов крови, Затем добавляют следующие реактивы: О, мл (20 мМ) раствора сернокислого марганца + 20 + 1,5 мл (40 мМ) вероналового буфера РН 7,5 + 0,2 мл (10 мМ) раствора аденозин-монофосфата, выдерживают 30 мин при 37 С, добавляют 2 мл ох 0лажденного до 4 С 104-ного раство ра трихлоруксусной кислоты, инкубируют 15 мин, центрифугируют 20 мин при 5000 об/мин. Для определения неорганического фосфора к 2 мл супернатанта добавляют 0,6 мл 2,54-но- зю го раствора молибденовокислого аммо" ния в 3 н. серной кислоте + 0,4 мл 0,5-ного раствора амидола в 54-ном растворе сульфата натрия + 0,5 мл бидистиллированной воды. Через 15 мин раствор фотометрируют на спектрофотометре при 660 нм. Активность выражают в микромолях субстрата, гидролизованного в течение 1 мин 1 л исследуемого раствора для поверхности в 1 см, 4Продолжение табл. Резина наоснове силиконовогокаучука 21,8 22,8 0,215 0,640 Стекло Для оценки пригодности материала для аллопластики учитываются одновременно 2 показателя: способность материалов расщеплять БАЭЭ и 5-нукле отидазная активность на их поверхности, Наименьшие показатели (ниже .1,5 для БАЭЭ-эстеразной активности и 0,035 для 5-нуклеотидазной активности) являются показателями низкой тромбогенной активности материалов и пригодности их для аллопластики.Предлагаемый способ позволяет быстро и точно определить в течение 2-3 ч пригодность материалов для аллопластики,Как видно из данных таблицы, поспособности активировать контактнуюфазу свертывания крови наименьшейтромбогенностью обладает фторопласт(1,5), наибольшей - стекло (22,8).Наименьшая тромбогенность по способности взаимодействовать с тромбоцитами у фторопласта ( 0,035), а наибольшая - у поливинилхлорида(0,709).Эти результаты совпадают с известнойнизкой тромбогенностью фторопласта,ввиду чего он используется в сердечно-сосудистой хирургии для изготовления клапанов сердца, и высокойтромбогенностью стекла, ввиду чегоэтот материал для предотвращениясвертывания крови в гематологии в необходимых случаях покрывается кремнийорганической пленкой (силиконируется),формула изобретения атериа пригодностистики путем емого материащим исследовал и ч а юцелью идополнитстромбоцв ней Б с,О Полиэтилен Поливинил- хлорид овыше ельно итар- АЭЭ-.э 11,7 1,5 0,035 плас Способ определенияматериалов для аллоплвзаимодействия исследула с кровью с последуюнием тромбоцитов, о тщ и й с я ,тем, что,ния точности способа,исследуют цитратную бную плазму, определяюСоставитель С. МалютинаРедактор Е. Лазуренко Техред М. Рейвес Корректор М, Коста Тираж 714 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Рауаская наб., д. 4/5 Заказ 4933/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 5 94 теразную активность, затем в тромбоцитах определяют 5-нуклеотидазную активность и по величине этих активностей определяют пригодность материалов для аллопластики. 2694Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Доброва Н.Б, и др. Актуальныепроблемы гемостазиологии. М.,"Наука",1972