Способ количественного определения тиолов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(51)М. К.2 С 01 Ы 21/24 с присоединением заявки Нов Государственный комитет СССР ио делам изобретеиий и открытий(088. 8) Дата опубликования описания 070480(72) Авторы изобретения А, И. Бусев и Л, И. Тетерников Московский ордена Ленина и ордена Трудового КрасногоЗнамени государственный университет им, М. В. Ломоносоваи Центральный научно-исследовательский институтшерстяной промышленности(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИОЛОВ Изобретение относится к областианалитической химии, а именно к способу количественного определениясульфгидрильной группы, и может. быть 5использовано для экстракционно-Фотометрического определения микрограммовых количеств тиолов,Известен способ количественногоопределения тиолов, заключакщийсяв обработке анализируемой пробы пхлормеркурбензоатом, с последующимфотометрированием полученного окрашенного раствора (1).,недостатком способа является низкая точность определения.Наиболее близкимк изобретению потехнической сущности и достигаемомурезультату является способ количественного определения тиолов, заключакщийся в последовательной обработкеанализируемой пробы дифенилкарбазоном, ацетатом натрия в смеси этанолаи бензола с последующим титрованиемполученного раствора п-диалкиламинофенилмеркурацетатЬм до появленияустойчивой сиреневой окраси (2). Недостатком способа является низкая чувствительность,т.е.способ поз- З 0 воляет определять только милиграммовые количества тиолов в пробе.Целью изобретения является повышение чувствительности определения,Поставленная цель достигается способом количественного определения тиолов, заключакщимся в обработке анализируемой пробы п-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом и и-диалкиламинофенилмеркурацетатом 1:1,5-2 с последукщей .обработкой полученного раствора дифенилкарбаэеном в бензоле при рН сре- ды 5,8-10,2 и спектрофотометрированием окрашенного бензольного слоя,Отличительным признаком .способа является обработка анализируемой пробы п-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом и п-диалкиламинофенилмеркурацетатом 1:1,5-2, последующая обра- ботка полученного раствора дифенил карбазоном в бензоле при рН среды 5,8-10,2 и спектрофотометрирование окрашенного бензольного слоя.П р и м е р 1, Й экстракцнонную пробирку с .притертой пробкой вводят 10 мл водного 10М раствора диэтилдитиофосфата, приливают 10 млгент Введеномкг Определяемо вещество,70 339,7 ,9468,6 ,49 17,63 4 2 0 324,00 318,70 32,40 32,42 16 к 20 1609 2,6 1,5 3,2 2 10 М водно-этанольного стандартного раствора п-диметиламинофенилмеркурацетата, добавляют буферный раствор с рН 10,2, приливают 10 мл5 10 М раствора дифенилкарбазоьа вбензоле, доводят объем водной фазыдо 40 мл дистиллированной водой,встряхивают не менее 1,5 мин и измеряют оптическую плотность бензольного слоя при 540 мм на любом фотоэлектроколориметре на Фоне холостого опыта. Количество непрореагировавшего п-диметиламинофенилмеркурацетата находят по калибровочному графику, построенному в тех же условияхв координатах оптическая плотность -количество 2 10, М раствора п-диметиламинофенилмеркурацетата. Количест- .во диэтилдитофосфата вычисляют поформуле ".а = Т.Ч.Г,где а - количество найденного тиола, 20мкг;Т - концентрация и-диметиламинофенилмеркурацетата, мкг/мл 1Ч - объем п-диметиламинофенилмеркурацетата, пошедшего на 25связывание определяемого тиола, мл;Г - отношение молекулярноговесаопределяемого тиола к молекулярному весуп диметилами- ррнофенилмеркурацетата.Объем Ч нах.эдят как разностьмежду введенным объемом п-диметиламиноКосвенное экстракционно-фотиолов (и = 5,Фенилмеркурацетата (10 мл) и объемом,найденным по калибровочному графику,т.е. по измеренной оптической плотности бензольного слоя.Результаты определений приведеныв таблице.П р и м е р ы 2-4. Определениепроводят с помощью стандартного раствора и-диметиламинофенилмеркурацетата с экстракцией при рН 6,5 или 8,0в условиях примера 1,П р.и м е р ы 5 и б Определение проводят с помощью стандартного раствора п-диэтиламинофенилмеркурацетата при рН 8,5 или 7,0 в условиях примера 1. К преимуществам предлагаемого способа относятся повышение чувствительности определения по сравнению с чувствительностью известного титриметрического способа на порядок; универсальность способа, который позволяет определять различные тиолы в одинаковых условиях;. возможность определения микрограммовых количеств тиолов, что необходимо для биологических и других объектов; большая разница в спектрах поглощения исходных веществ и фотометрируемого комплекса; большой коэффициент молярного погашения фотометрируемого комплекса (0,819") и степень однократного извлечения (95),Таблица тометрическое определение 0,95) 16,6 114,2 4 46,64 45,52 2 11,66 11,29 5726473 Продолжение таблицы Определяемое веществоН. Стец ме48/35 Тираж 1019ЦНИИПИ Государственного комитетапо делам изобретений и откры13035, Москва, Ж, РаушскаянабщЗаказ пн д. 4/ П Патент, гУжгород, ул Филиа ектна Способ количественного определения тиолов с использованием п-диалкил-. аминофенилмеркурацетата и дифенилкарбазона, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности определения, анализируемую пробу обрабатывают и-диалкиламинофенилмеркурацетатом при мольном соотношении между тиолом и-диалкиламино мфенилмеркурацетатом 1:1,5-2 с последующей обработкой полученного раствора дифенилкарбазоном в бензоле при рН среды 5,8-10,2 и спектро щ фотометрированием окрашенного бен.зольного слоя. Источники инф принятые во внимание п Ю, Воуег Р, Ь,определение ЯН-гр меркурбензой кисл Спею, Яос 1964,2. Авторское с 0 Р 295058, кл. 6 0