Способ получения альбуминов и сывороточных белков

(51) М. Кл.е А 23 3 1/14 3) Приоритет - (3 Гооударственныи комете Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий) Опубликовано 05.10.76 Бюллет ) Дата опубликования Описания 3 о 77) Авторы изобрете Клаус Дитер Ш фред Рихтер бара Симск,. рачное предприятиеут фюр Мильхфоршунг"ится к пищевой промыщ способов получения альных белков, основан- комплексообразующих Изобретение отноенности и касается млексо ажден 1 ля оелков дителя для раствора.Осаждение белков комплексообразующ веществами целесооооазно проводить из р вооов, Одеожа 1 ц 11 х соли мкоговалентныхакиОков, преиму-щественно сульфаты натрия, калия, аммония, магния.Растворение комплексов белков илен лучше осуществлять водными растворами хлоридов щелочных и щелочноземельных металлов, преимущественно 3-10% - ным Оастворохл хлористого катрия,Способ осуществляют следующим образ Растительное сырье, наво 11 мед семена апса, ,экстрагируют, получая кислый растьор, который смещивают с раствором хлорис того натрия, после чего проводят пзоэлектри ческое осгждение глобулинов и выделяют их из Оаствора, а затем осаждают альбуминь комплексообразующими веществамп, например сульфатом чекстрана или крахмала, покцосфата. 11 л, танк;Ох;, 11 р 11 этом осаждение белков комплексообразу 1 ощ 11 м 11 веществами пооводят из растворов, содержащих соли говалентных анионов, пое 11 мущественно с уминов и сывороточ ых на использовани имиастосадителеи звестен особ получения альоуминов, льного сырья и сывор например, из рточных белковПо такомуки, пригодные ас осадитеосо ка у нель стве и получить белщевых продукиз экстрактов ов, в частн астений, со и аль жащи умины белки ом. С целью уст а по предлагае одят изоэлектр анения указанного нед ому способу сначала ическое осаждение глотат оули 1 осажов и выделение ают альбумины ществами, напри их из раст комплексоо мер сульфат ла, полифосф 1 ПЛЕКСЬ 1 ПЕР5, после ч бразующими веом декстрана,м Ы ль том крахм тами, таин ВОДЯТ В Р олуч ные ко Н выше раствор ливание р и его ослки саж 00 дают агреван при 5 и выс предпочтительно с киснием ,5 мноу.льлым н ем с последующи ИСПОЛЬЗОВ35314 фата натрия, калия, аммония и магния. Далее переводят в раствор и разлагают на составляющие их компоненты. Растворение комплексов, основанное на электростатическом обменном взаимодействии между белком и полианином, осуществляют водными растворами хлоридов щелочных и шелочноземельных металлов, преимущественно 3-10%-ным раствором хлористого натрия, при рН выше 5.После этого белки осаждают из раствораонагреванием пои 50-100 С или высаливанием предпочтительно сернокислым натрием и оставшийся в растворе комплексоосадитель снова возвращают в процесс для осаждения белков.Полученный осадок, состоящий из неденатурированного белка, способного коагулировать, после растворения в воде может быть подвергнут горячей коагуляции либо после отделения солей с помощью гель-фильтрациираспылительной сушке,Поскольку перед высаливанием белки находятся в щелочном растворе с концентрацией в 10-20 раз большей по сравнению с исходным экстрактом, то необходимое количество соли относительно невелико.Пример 1, Кислый раствор после экстрагирования 160 г семян рапса 1,3 л 3% - ного раствора хлористого натрия и изоэлектрического осаждения глобулина при рН 3 сме шивают с 2,5 г сульфата натрийдекстрана (мол. вес. 500000), растворенного в небольшом количестве воды, осаждение при этом 5,4 г альбумина рапса (87% альбумина) в виде комплекса белка с сульфатом декстрана.Полученный продукт растворяют в 1,25%- ном растворе едкого натра, раствор доводято до рН 9,5 и нагревают 10 мин до 95 С, осуществляя при этом коагуляцию 4,2 г белка. Затем белок отделяют центрифугированием и полученный прозрачный раствор, содержащий осадитель, снова используют для осаждения белка после доведения рН раствора до заданного значения.П р и м е р 2. 600 мл экстракта семян рапса, освобожденного изоэлектрическим осаждением от глобулинов и содержащего 1% хлористого натрия, доводят до рН 3 и затем смешивают с 2 г соли Грахама, в результате чего выделяют в осадок 2,6 г альбумина (64% белка) в виде полифосфатного комплекса, Затем продукт растворяют в 50 мл 1,25%-ного раствора едкого натра и после доведения рН раствора до 9,5 посоледний нагревают 10 мин до 95 С, приэтом коагулирует 1,4 г белка, соотвегствуюшего 54% альбумина, осажденного полифосфатом,П р и м е р 3, Из 800 мл раствора, полученного по примеру 1 из экстракта рап 764са, включающего 10% хлористого натрия ине содержащего глобулина, осаждают добавлением 5 г таннина, растворенного в воде,5 г альбумина (100% белка) в виде танни 6нового комплекса, содержащего 10% белка,После растворения комплекса в 80 мл 0,1 н.раствора едкого натра рН раствора доводятодо 9,5 и нагревают 10 мин до 100 С, врезультате чего выделяют в осадок 4,1 гбелка (82% белка).П р и м е р 4. Полученный по примеру 3 из 1 л раствора комплекс белка итаннина растворяют в 1 н, растворе едкогонатра (суммарный объем 91 мл), затем добавляют 36,4 г сернокислого натрия и осаждаф ют 4,4 г белка (87,5% белка). Белок промывают насыщенным щелочным растворомсернокислого натрия и объединенные растворы над осадками снова используют дляосаждения белка.ф П р и м е р 5, В соответствии с описанным в примере 1 семена рапса гомогенизируют 5%-ным раствором сернокислогонатрия и изоэлектрическим осаждением удаляют глобулины. Присутствующие над осадМ ком в растворе слизистые вещества отделя,ют центрифугированием после доведения рНдо 8,0 добавлением концентрированного раствора едкого натра.Очищенный раствор доводят до рН 1,5ЗО приливанием концентрированной соляной кислоты или разбавленной наполовину концентрированной серной кислоты,при этом содержание азота в полученном растворе составляет 0,16%,ЗЭ С целью осаждения белка к 100 млраствора добавляют при перемешивании 17 мл10%-ного водного раствора сульфата натрийкрахмала с содержанием 14,9% серы. После отстаивания в течение 30 мин образовав 46 шийся рыхлый объемистый осадок, содержаций весь осажденный белок, отделяютцентрифугированием, при этом раствор над осадком содержит 0,06% азота, не осаждаемого трихлоруксусной кислотой.45 Для очистки комплекс белка с осадителем растворяют в 50 мл 0,2 н. раствораедкого натра, получая прозрачный раствор,Затем к раствору добавляют 0,2 н, раствор"оляной кислоты и снова осуществляют пол 9 ное осаждение. Осадок промывают 50 млметилового спирта и сушат в вакууме надсиним гелем, получая примерно 8,4 г объемистого слабо окрашенного в желтыйцветпорошка с влажностью 7,7%. При этом вЭЬ расчете на сухое вещество продукт содержит 80% неочищенного белка и 1,1% золы.Предлагаемый способ по сравнению с изрестным позволяет полностью выделить альбумин рапса, который составляет 50% от60 общего содержания белков в последнем, при531476 Формула изобретения Составитель А. БражниковаРедактор 3. Бородкина Техред Н. Андрейчук Корректор Л, Боринская Заказ 5404/122 Тираж 575 Подписное ПНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 этом белки могут быть получены в нативной или денатурированной, скоагулированной при нагревании форме или в таком состоянии в растворе, в котором он может легка коагулировать,При использовании предлагаемого способа могут быть получены, например, структурированные, порошкообразные, растворенные или гидролизованные продукты.Кроме того, по такому способу могут быть получены путем обработки таннином или другими дубяшими веществами продуктты, используемые в технических целях. 1, Способ получения альбуминов и сывороточныхбелков, отлич аюшийс я тем, что, с целью получения белков, пригодных в качестве пищевых продуктов, проводят изоэлектрическое осаждение глобулинов и выделяют их из раствора, затем осаждаютальбумины комплексообразуюшими веществами,Например сульфатом декстрана или крахмала,полифосфатами, таннином, и полученные комплексы переводят в раствор при рН выше 5,после чего белки осаждают из оаствора наогреванием при 50-100 С или высаливаниемпредпочтительно сернокислым натрием с последующим использованием комплексоосади- Ютеля для осаждения белков из раствора,2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю ш и йс я тем, что осаждение белков комплексообразуюшими веществами проводят из растворов, содержащих соли многовалентных анионов, преимущественно сульфаты натрия, калия, аммония, магния.3. Способ по пп. 1 и 2, о т л и ч а юш и й с я тем, что комплексы белков иосадителей растворяют в водных раствораххлоридов щелочных и щелочноземельных меф таллов, преимущественно в 3-10 оо - ном растворе хлористого натрия.