Способ получения jbhomaccbf

1ОПИСАИЗОБРЕТЕНИЯ 357749 Союз Советскии Социалистических РеспубликК ПАТЕНТУ висимый от патентаС 12 Ь 1/08 Заявлено 22 Х.1970 ( 1461271/2870,45-18563, Японт юритет ОЗ.П Комитет по делам аобретений и открытий при Совете Министров СССР.143.14 (088,8) 2. Бюллетень33 ата опубликования описания 06.111.197 Авторы зобретения ИностранцыКиеси Ватанабе, Хирохиса Яно, КеЙосимацу Меката и Хадзиме Ка(Япония)Иностранная фирмаКанегафучи Кагаку Когио Кабусик(Япония) ндзи Сузукивахарада Заявите йся О 10 СОБ ЙОЛУЧБНИЯ БИОМАССЬ 1 кробиопособ и вых микро ырого Изобретение относится к милогической промышленности, точнее к с у получения биомассы.Известен способ получения биомассы путемвыращивания дрожжей, ассимилирующих.углеводороды, например Сапс 1 Ыа, Тогу 1 орз 1 з, Р 1- с 1 иа на среде, содержащей в качестве источника углерода углеводородные фракции нефтив присутствии водной минеральной среды, содержащей источник азота, фосфора, калия,магния и стимулятора роста при аэрациисреды.Предлагаемый способ позволяет проводитьсмешанное культивирование углеводород-ассимилирующих дрожжей с углеводород-неассимилирующими дрожжами,Это обеспечивает повышенны од биомассы, более интенсивный рост организмов и повышенное содержание с протеина в биомассе.Предлагаемый способ предусматривает выращивание дрожжей, ассимилирующих углеводороды, производить совместно с углеводороднеассимилирующими дрожжами, потребляющими мета болиты, продуцируемые первымидрожжами. В качестве углеводород-неассимнлирующихдрожжей используют семейство Сгур 1 ососсаесае в частности виды Тпс 1 тозрогоп рц 11 ц 1 апз,род Сапйт 1 а в частности вид ц 111 тз род КЬодо 5 1 огц 1 а в частности виды гцЬге и пппц 1 а родТогц 1 орз 1 з в частности вид рзепт 1 аепа род ВеЬагуоптусез в частности вид папзепй.Сырьем служат алифатические углеводороды с открытой цепью, имеющие от 9 до 30 ато 10, мов в молекуле, и нефтяные углеводороды, богатые алифатнческими углеводородами с открытой цепью.Выращивание дрожжей ведут в следующихусловиях: рН среды преимущественно равной15;3,5 - 6,0, температура 25 - 40 фС, концентрацияуглеводородов в водной питательной среде от0,01 до 1%.Питательная среда . представляет собойраствор, содержащий помимо нефтяных угле 20. водородов неорганических или органическихазотсодержащих соединений, фосфорсодержащие соединения, а также неорганические солии иногда органические соли. Кроме того, дляускорения роста микроорганизмов добавляют25,раствор, настоенный на зерне экстракт дрожжей и пептон,357749 Экстракт дрожжей 1,0 г Водопроводная вода 1,0 г рн 5,0 га также 75/о фосфорной кислоты 2,7 лл,Дрожжи, предварительно пророщенные, после промывания в воде добавляются так, чтобы концентрация клеток была около 1)(10 ил.Культивирование проводят в течение 48 час при ЗЗС с встряхиванием. Затем определяют 10 выход дрожжевых клеток и содержание сырого протеина в них. Результаты приведены в табл, 1. Таблица 1 15 Углеводород-иеассимилируюВыход клеток,Ов гО Содержание сырого протеина, %щие дрожжи 53,5 55,5 56,1 54,9 54,7 82,3 99,5 103,2 107,7 98,3 Сапйда ц 11 в Тогц 1 орвв рвепйаева ИеЬогуогпусев Ьапвеп Тгтопорав чагао 1 ев25 0,1 г Таблица 2 Совместное выращиваниеВыращивание одного вида Углеводород-ассимилирую. щие дрожжисодержаниепротеина, в В выходклеток,55,7 50,1 52,6 103,6 90,8 87,2 51,3 46,8 48,3 91,3 70,6 75,8 СапдЫа ТгорсасевСапйда рагарв 1 оввТогиорвв гподпо 1 аеЙудовассЬагогпусев ТКшпаеп.ввТогц 1 орвв хуспцв1.уров ассйогогпусев ваКеРсЫа пиво 106,5 85,8 92,1 101,3 51,2 55,5 50,0 48,3 49,7 50,5 45,7 41,1 88,2 69,1 72,3 81,6 Пример 3.30Углеводород-ассимилирующие дрожжи Сап. с 11 да дц 1111 еппопй и углеводород-неассимилирующие дрожжи Тгсйозрогоп сц 1 апсцгп со. вместно культивируют в аэробных условиях в течение 48 час в культуральной среде, состав 35 которой указан в примере 1. Получившиеся культуры двух видов смешивают в соотношении 100: О, 90: 10, 80: 20 и 70: 30 соответственно. Каждую смесь размещают в количестве 10% в 18 л основной культуральнай среды 40 того же состава, помещенной в 30 л фермента- тора. Эту смесь подвергают культивированию при перемешивании со скоростью 100 об/мин при 33 С с аэрацией со скоростью 30 л в минуту, Углеводород, используемый в данном при Таблица 3 Выход клеток,Содержание сырого протеина, в Соотношение дрожжей 93,5 58,9 60,3 598 100:0 90; 10 80:20 70,30 92,5 107,8 109,2 110,6 Способ осуществляется следующим образом.Условия вырашивания следующие:рН среды 3,5 - 6,0; температура 25 - 40 С,предположительно от 27 - 35 С, концентрацияуглеводородов нефти в питательной среде от0,01 до 1%, Во время выращивания в средуподают газ, содержащий свободный кислород.Смешивание дрожжей, ассимилирующие углеводороды, с углеводород-неассимилирующимидрожжами проводят в начале, культивированияили в процессе ферментации,Пример 1.Углеводород-ассимилирующие дрожжи Сапйда Ьгцгпрй и некоторые углеводород-неассимилирующие дрожжи, такие как Сапс 1 Ыа ц 1111 з, Тогц 1 орз 1 з рзепг 1 аев 1 а, РеЬогуогпусез Ьапзепй, Тг 1 допорз 1 в чагаЬ 11 ез совместно культивируют, В 500 мм колбу помещают 30 ллкультуральной среды следующего состава, г:Мочевина 5,0Хлорид калия 2,0Сульфат магния 2,0 гСульфат цинка 0,03 гСульфат двухвалентного же- леза Пример 2.Углеводород - неассимилирующие дрожжи КЬодо 1 огцЬа гцЬга и некоторые углеводородассимилирующие дрожжи, указанные в таблице 2, совместно культивируют, Условия те же, что в примере 1, Результаты приведены в табл. 2,мере, представляет собой Н-парафин удель нога веса 0,792,при 4 С. Содержание Н-парафина 99,7% по весу и 0,025/о по весу ароматических углеводородов. Выход дрожжевых клеток и содержание в них сырого протеина представлено в таблице 3,357749 Таблица 4 Выход клеток, Содержание сыСоотношение зерновых культуррого протеина, зо 54,2 59,8 60,3 100;0 70: 30 30; 70 94,9109,6114,3 Предмет изобретения Составитель М. ЛаринаРедактор Л. Народная Техред А, Евдонов Корректор Т. Медведева Заказ 392/17 Изд,1684 Тираж 406 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/6 Типография, пр. Сапунова, 2 Пример 4.Сапг 1 Ыа г 1 доза и Тг 1 с 1 тозрогоп рц 11 ц 1 апз как зерновые культуры смешивают в соотношении 100: О, О; 30 и 30: 70 соответственно и каждую смесь добавляют к основной культуральной среде так, как и в примере 1. Культивирование приводят непрерывно в качающемся ферментаторе, содержащем 18 л культуральной среды с перемешиванием со скоростью 1000 од/,чин при 33 С и с аэрацией со скоростью 20 л в минуту. Через 68 час определяют степень ассимиляции и содержание сырого протеина в образующихся клетках, Результаты представлены в табл. 4. 1. Способ получения биомассы путем выращивания дрожжей, ассимилирующих углеводороды, например СапдЫа, Тогу 1 орз 1 з, Р 1 сЫа на среде, содержащей в качестве источника углерода углеводородные фракции нефти в присутствии водной минеральной среды, содержащей источник азота, фосфора, калия, магния и стимулятора роста при аэрации среды, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, интенсификации процесса выращивания, а также увеличения содержания протеина в биомассе, выращивание дрожжей, ассимилирующих углеводороды, производят совместно с углеводород-неассимилирующими дрожжами, потребляющими метабо.5 литы, продуцируемые первыми дрожжами.2, Способ по п. 1, отличающийся тем, чтов качестве у глеводород-неассимилирующихдрожжей используют семейство Сгур 1 ососсаесае в частности виды Тг 1 с 1 тозрогоп рц 11 цапз и10 Тгцсйозрогоп сц 1 апсшп,3. Способ по п, 1, отличающийся тем, чтов качестве углеводород-неассимилирующихдрожжей используют род СапдЫа в частностивид цИ 1 з,15 4. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтов качестве углеводород-неассимилирующихдрожжей используют род К 1 тос 1 о 1 огц 1 а в частности вид гцЬге и п 1 пц 1 а.5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что20 в качестве углеводород-неассимилирующихдрожжей используют род Тогц 1 орз 1 з в частно.сти вид рзепйаег 1 а.6, Способ по п. 1, отличающийся тем, чтов качестве углеводород-неассимилирующих25 дрожжей используют род РеЬагуогпусез вчастности вид Йапзепй,7. Способ по пп. 1 - 6, отличающийся тем,что в качестве углеводородов используют алифатические углеводороды с открытой цепью,30 имеющие от 9 до 30 атомов в молекуле, и неф.тяные углеводороды, богатые алифатическимиуглеводородами с открытой цепью.8, Способ по пп. 1 - 7, отличающийся тем,что выращивание ведут при рН среды, преимущественно равном 3,5 - 6,0, и температуре,преимущественно равной 25 - 40 С,9. Способ по пп. 1 - 8, отличающийся тем,что концентрацию углеводород в водной питательной среде поддерживают от 0,01 до 1/о