Способ дифференциации мyсовастеriuм аviuм от мyсовастеriuм inтrасеllulаrе

СОЮЗ СОВЕТСКИХшииатаеп 4 ИРЕСПУБЛИК 0 166653 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТГЮ ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ(57) Изобретецинской микро ФФЕРЕНЦИАПИИ МУСОВАСТ МУСОВАСТЕК 1 ПМ 1 ИТВА ние относится к меди-.биологии и касает я ди которые в наклонном ещают в аппарат дляинактивируют (средуо енсена при 90 С в тесреду Финнпри 85 С - .о лобу=от кие пробирки положении по тыванияпеей Левенштеиначение 1 ч, а30 мин). оч ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(53) 576.8,093.1(088.8) Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микроби гии и касается дифференциации во дителя туберкулеза птичьего вида атипичных микобактерий вида интр целлюляре,Цель изобретения - повьппение ности способа.Способ осуществляют следующим разом. Питательную среду ЛевенштеинаИенсена или Финнготовят по общепринятой методике. Затем ее разли вают в две стерильные колбы емкостью 150 ип. В первую колбу,содержавщую 99 мл среды, добавляют 1 мл 57. ного раствора синтайода, чтобы концентрация его в среде была 0,17 и тщательно смешивают, В другую колбу синтайод не добавляют (контроль) . Затем содержимое колб разливают по 1)5 С 12 И 1/20, С 12 ( 1/04,Ференциации возбудителя туберкулезаптичьего вида от атипичных микобактерий вида интроцеллюляре, Цельюизобретения является повьппение точности способа. Питательную средуЛевенштейна-Иенсена или Финн, Содержащую О, мас.Х синтойода в ка-.честве селективного агента, засеваювзвесью двухнедельных изучаемыхкультур. Посев инкубируют при 38 Св течение 20 дней. При наличии ростна среде исследуемую культуру иден-.тифицируют как МусоЬасйег 1 цш пйгасе 11 ц 1 аге, а при отсутствии ростаМусоЬасГегз.цш ачхцш. 1 табл,мл в стерильные бактериологичес Из выросших двухнедельных изучае. - Лмых культур, которые по культурально- Юморфологическим свойствам отнесены С)к комплексу авиум интрацеллюляре,готовят микобактериальные взвеси1 мг/мл на стерильном физиологичес"ком растворе и высевают по 0,5 мл на5 пробирок со средой, содержащей 0,13 ффсинтайода, а также на контрольнуюсреду без синтайода. Пробирки помещают в термостат в горизонтальномположении на 1 сут, Затем пробиркипарафинируют и выдерживают в термо6530 1 О 30 35 50 3 166 стате 20 дней при 38 С. Учет результатов посевов проводят. ежедневно,Дифференцирующнм показателем для МусоЬасг.ег 1 цш 1 пггасе 11 ц 1 аге от 1, ачдцш является рост колоний М. ЫсгасеПц 1 аге на среде Лененшгейна Иенсена или Финн, содержащей 0,1% синтайода, при отсутствии роста у И. ачцш.П р и м е р. Из выросших на среде Павловского двухнедельных испытуемых и музейных культур микобактерий гото . вили взвеси на стерильном Физиологи" ческом растворе из расчета 1 мг/мн, которые стерильными мерными пипетка " ми высевают по О; 5 мп на пять проби-.м рок со средой Лененштейна-Иенсена, которая содержит, мас,%: однозамещен-. ный ФосФорнокислый калий О, 1; серно кислый магний 0,01; лимоннокислый магний 0,03; аспарагин 0,2; глицерин х/ч 0,7; вода дистиллированная 36,3; яичная масса 61,0; 2%-ный раствор малахитовой зелени 1, 2; синтайод О, 5; нли со средой Финн, которая содержит мас.%: магнезия сернокислая 0,01; натрий лимоннокислый 0,03; однозамещенный ФосФорнокислый калий 0,7, аммоний лимоннокислый однозаме.- щенный О, 1; натрий глутаминонокислый 0,3; глицерин х/ч О, 7; железоаммиач.- ные квасцы 0,001, вода дистиллирован" ная 36,0; яичная масса 61,5; синтайод О, 1," 2%-ный раствор малахитовой зелени 1,2, а также на 2 пробирки со средой Левенштейна-Йенсена или Финнбез синтайода (контроль).Рост колоний микобактерий на средах, содержащих 0,1% синтайода, на бпндают на 7-10 день у одной испьзтуемой (У 230) и у контрольной куль-. туры нида М. ьпггасе 11 ц 1 аге. На сре-. де без синтайода рост колоний обна. - руживают как у всех испытуемых, так и у контрольных культур микобактерий на 7-10 день. Испытуемые культуры (Р 354, 249 и 227), а также контрольная культура И. ачцш не растут на средах с 0,1%"ным содержанием син-. тайода.Результаты представлены в таблице,Из данных таблицы видно, что приизучении четырех культур микобактернй.,55на плотных яичных средах финн "2 иЛевенштейна-Иенсена с 0,1%-ным сии=тайодом рост колоний микобактерийобнаружен у одной культуры (В 230) и у контрольной культуры И, пгасеПц 1 аге на 7 деньУ трех культур(9 354, У 249 и 227), а также уконтрольной культуры М. ачыш ростаколоний не выявлено,При изучении культур на полусинтетической жидкой среде Шула с О, 5% ным иодоналом Б выявлено, что культура У 230 дает рост через 8 дней, а культуры У 354 и Р 249 дают через 9 дней неопределенный результат в виде рыхлого осадка на дне пробирки. Культура Р. 227 не дает осадка на дне пробирки. В контроле М. ачхцш дает неопределенный, а М. пйгасе 11 ц 1 аге положительный результат. Для изученияобразовавшегося осадка делают мазки,красят по методу Циль:-Нильсена и проводят микроскопическое исследование.При зтом микроскопия мазков показынает, что в поле зрения наряду сюаслотоустойчивыми палочками обнаружены частички коагулированного белкасреды Шула.1 Из сравнительного анализа предлагаемого способа с известным следует, что предлагаемый спас,об дает более четкие результаты исследования, со кращает срок идентиФикации культур на 1 2 дня и не требует проведения дополнительных исследований (приготовление мазков, окраска их по Циль-. Нильсену и микроскопическое исследо-. вание) . формула изобретения Способ диФФеренциации ИусоЬасегхцш ач 1 цш от ИусоЬасСегдцш дпггасе 11 ц 1 аге путем посева исследуемого материала на плотную питательную среду дпя выращивания микобактерий туберкулеза с добавлением селективного агента с последующим инкубированием посевов и учетом результатов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с. целью повышения точности способа, посев осуществляют на среду Финн -2 или Лененштейна.-йенсена, содержащую в качестве селективного агента сии тайод нконцентрации 0,1 мас.% ипри: наличии роста культуру идентиФицируют как МусоЬасегхцш хпгасе 11 ц 1 аге,при отсутствии роста - МусоЬасгегцш ачхцш.1666530 Вфр культур Предлагаемый способ Известный способ ид культуры Среды Финн, Левенштейнбейсена с 0,12 "ным синтайодом ез дней биаруиен рост через дней И. ач 1 ца 1. Не опред лене 27 н И. аиста1 ате 1 ц+ ег. ен е ч а н и е. +рост колоний микобактерий;рост колоний отсутствует; + ф. получен неопределенный результат. Составитель А.ЗавадскаяТехред М.Моргентал Корректор М.Демчик едактор Н.Ки не аказ 2498 Тираж 376 ВНИИПИ Государственного комитета по изоб 113035, Москва, Ж, РаПодписноеениям и открытиям при ГКНТ СССкая наб., д. 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 КонтрольМ.ацдцщ Р 11М,псгасе 11 ц1 аге Р 128 обнаруаеи рост 78 Полусинтетическая ладкая среда Шула с 0,52иым иодоналом Б Вн 11 культурц Не опрленМ.агавНе опр