Способ диагностики заболеваний печени

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 19) ( 1 Х 335 ОПИСАНИЕ ЙЗОБРЕТЕНИЯ тносится к мед иммунодиагност(57) Изобретени не, в частности вляется повыГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯ 14ПРИ ГКНТ СССР(71) Курский государственный медицский институт(56), Спра вочни к по гаст роз нт ер ологИ.: Медицина, 1976, с. 283.(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕ 8 АПЕЧЕНИ Изобретение относится к медицине в частности к иммунодиагностике заболеваний печени.Целью изобретения яшение точности способаСпособ осуществляется следующим образом.У больного берут 5-8 мл крови, получают из нее 2-3 мл сыворотки. 8 деленные от мелкого лабораторного животного, например крысы, тимоциты (от одного животного тимоциты можно использовать в течение рабочего дня) инкубируют с сывороткой больного в течение 1 ч при 370 С, встряхивал через 10-15,мин при этом соотношение компонентов равно 20 х х 10 тимоцитов/мл сыворотки. После инкубации клетки осаждают центрифугированием при 400 ив течение 5 мин и 2заболеваний печени. Цель изобрете" ния - повышение точности способа. У больного берут кровь, выделяют сыворотку, обрабатывают ею тимоциты мыши или крысы, добавляют к ним аутологич ные эритроциты и подсчитывают количество аутологичных розеткообразую" щих клеток. При снижении их количества до 7-111 по сравнению с нормой диагностируют цирроз печени, а при повышении их числа до 28-31 - хрони ческий гепатит. С помощью предлагаемого способа правильный диагноз был установлен в 443 случаях, в то время как по известному способу невозможно было уста новит ь пра вил ь ный диа г коз. ресуспендируют в 1 мл среды 199. Параллельно приготавливает нативные кры синые эритроциты и тимоциты соответственно в концентрациях 0 06 мл иЭ20 х 10 /мл среды 199. Необработанные сывороткой тимоциты (НТ) и эритроциты (НЭ), а также обработанные сы" вороткой больного тимоциты (ОТ) используют для постановки реакции ауторозеткообразования (а-РОК), которую проводят следующим образом: смешивают по 0,1 мп эритроцитов и тимоцитов из исходных приготовленных взвесей (соотношение 50:1), центрифугируют в течение 5 мин при 200.д и инкубируют в течение 2 ч на холоду, после чего фиксируют глютаральдегидом и подсчитывают число а-РОК. При постановке реа кции испол ьзуют следу. ющее сочетание тимоцитов и эритро цитов: 1.НТ+НЭ (контроль), 2. ОТ+НЭ, количество образующихся а-РОК расчитывают в 3 при подсчете на препарате не менее 300 тимоцитов, При использовании тимоцитов, обработанных сывороткой больных с хроническим гепатитом, число образующихся ауто-РОК существенно повышается по сра внению с контролем (до 28-313)Сыворотка больных с цирротическими изменениями печени оказывает Про-, тивоположнь 1 й эффект - снижается до 7-113 по сравнению с нормой.П р и и е р 1. Больной Б 41 год 15 нахоцился в клинике по поводу хронического персистирующего гепатита в стадии обострения . Предъявлял жалобы на ноющие боли в эпигастрии, иррадиирующие в поясницу при физической нагрузке. Болеет с октября 1984 г, лечился в стационаре по поводу гепатитаОбьективно - склеры субэктеричны, пониженного питания, живот болезненный, в правом подреберье печень выступает на 2 см.Лабораторные данные. кровь - эритроциты 4,0 (10 ц гУл) гемоглобин 120, цветной показатель 09 лейко" циты 7,1 (109 ул), эозинофилы 2, па" лочкоядсрные 2, сегментоядерные 48, лимфоциты 40, моноциты 8, СОЭ 6 ммУч .. Общий белок 83,3 (гУл), альбумины 56,0, глобулины", и,4,0 И.-. 7,0, . - .14 О у" 19 О, соотношение. альбул 1 инУглобулин 1,1, Билирубин общий 21,88 (ммольУл) прямой 5,47, непрямой 16,41. Холестерин 3,64 (ммольУл),. ферменты: аспарагинтрансфераза 0,7 ммоль (4 л), аланинтрансфераза 0,9, щелочная Фосфатаза 05 тимоло" вал проба 2 БД.У больного взято 7 мл крови, полу- цена сыворотка, которойобработали тимоциты крысы. и использовали их для постановки реакции ауто-РОК.У этого больного с выраженной клинической картиной хронического гепатита количество а-РОК после обработ,ки тимоцитов и эритроцитов существен-. но повышалось (ОТ+НЭпо сравнению с контролем; НТ+НЭ). Таким обра" зом, у него подтверждается диагноз хронического гепатита .П р и м е р 2, Больной В. 55 лет,55 находился в клинике по поводу портального цирроза печени, стадия сформировавшегося цирроза. Синдром высокой портальной гипертензии, хрон- ческая печеночная недостаточность и,. скешанно-клеточному типу, Предъявлял жалобу на ноющие боли в правом под" реберье, вздутие живота, слабость темный цвет мочи, желтуху.Болеет 5 лет, когда появились боли в правом подреберье, Объективно: склеры и кожа с желтушным оттенком, на коже сосудистые звездочки, печень + 3 см, плотная.Лабораторные данные: кровь - зрит" роциты 41, гемоглобин 130, цветной показатель 0,9, лейкоциты 6,4, эозиноФилы 1, палочкоядерные 4, сегментоядерные 64, лимфоциты 29, моноциты 2, СОЭ 5 УчОбщий белок 81 альбумины 43,6, глобулиные Ы 1 39 й 127 / "- 208, соотношение альбуминУглобулин - 0,7. Билирубин.общий 24,62, прямой 5,47, непрямой 19,15, холестерин 4,81. ферменты: аспарагинтрансФераза 0,65, аланинтрансфераза О щелочная Фосфатаза 0,8, тимоловая проба 2 ЕД.У больного взято 8 мл крови, получена сыворотка, которой обработали тимоциты крысы и использовали их для постановки реакции а-РОК, получены следующие результаты: ОТ + НЭ, НТ+ +НЭ"17. Таким образом, у данного боль" ного подтвердился цирроз печени.Предлагаемый способ диагностикизаболеваний печени позволяет досто" верно осуществлять дифференциальный диагноз между хроническим гепатитом и циррозом печени, При этом сокращается время для исследования отпадает необходимость в дорогостоящих, дефи цит ных реа кти вах по сра в нению с прототипом. Техника выполнения предлагаемого способа значительно доступнее по сравнению с прототипом. Ис" пользуемые в настоящее время в большинстве лечебных учреждений способы диагностики при нетипично протекающих формах хронических поражений пе" цени не позволяют четко разграничить хронический гепатит и цирроз печени, поэтому не приводится сравнение с об" щепринятыми в клиниках способами ди" агностики. С помощью предлагаемого способа правильный диагноз был установлен в 443 (из 50 обследованных - 22 боль"35221 ных с правильно поставленным диагнозом). Составитель В. ЛитовченкоРедактор К. Крупкина Техред Л.Олийнык Корректор Э. Лончакова Заказ 6853/11 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб д. Й/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина,101 В сравнительных же экспериментах по исследованию активности ферментов у людей (прототип), сыворотка которых использовалась для постановки а-РОК, было выявлено, что активность аспарагинтрансферазы, аланинтрансО феразы и щелочной трансферазы повышалась (причем одинаково) не только у больных хроническим гепатитом и циррозом печени, но и у людей, отравленных ядохимикатами, и с функциональной гипербилирубинемией. Отмечен также большой разброс показателей (по прототипу) у отдельных людей,04 6Формула и з обретенияСпособ диагностики заболеваний печени путем выделения сыворотки из крови больного с.последующим ее исследованием, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, после выделения сыворотки, ею обрабатывают тимоциты мыши или крысы, добавляют аутологичные эритроциты этих животных и подсчитывают количество аутологичных розеткообра" зующих клеток и при снижении количе" ства розеткообразующих клеток до 7".11 ь по сравнению с нормой, диагностируют цирроз печени, а при повышении их числа до 28-313 диагностиру" ют хронический гепатит.