Способ определения форидона в плазме крови

) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОРИДОНА ВЗМЕ КРОВИ) Изобретение относится к медиУту цине, а именно к способу, определения форидона в плазме крови. Целью ис- изобретения является упрощение спо логии ба определения форидона в плазме е крови для использования вклинических т ис исследованиях, Сущность изобретениясостоит в том, что препарат экстрагируют из плазмы крови этилацетатом, 1 еч А,Р, выпаривают до сухого остатка, раство Ьо 1 вш ряют в диметилсульфоксиде, для повыщ. щения чувствительности флюоресцент- (1), наго анализа переводят форидон ванионную форму добавлением гидроксида калия .и определяют интенсивностьфпюоресценции клиническим флюоримет- ром инститнтеза чно кардиОтокма 9ел.П, Ск С. О Мей Агвпе5, ч.3 способамсредств в тения - у ощение спо Цель изобрба. Способ осущ яетс У обр Иэ локтевой вены берут кровь, получают плазму и помещают ., мл плазмы в пробирку со шлифом (конт роль). После взятия контрольного образца крови больному наэначаот 20 мг форидона и через 3 ч берут кровь, получают плазму крови (рН 7,2-7,6), 1 мл плазмы помещают в бирку со шлифом (опыт). В обе пр ки добавляют по 6 мл этилацетата про- бир ОсудАРственный конитетПО ИЭОВ ЕТЕНИЯМ И ОТКЮТИЕЮПРИ ГННТ СССР 1(7) Рижский медицинскийИнститут органического сАН ЛатвССР н Латвийскийследовательский институт(56) Рагхпоч 7.1 Ойлеей а 1.РпадаасоИпей 1 св аой Куойдрдпе ьп Ваяв.РогвсЬ. Эгиду, Кев1989 5, р.,808-813. д Изобретение относитспределения лекарственныхиологических жидкостях встряхивают 20 мин и отстаивают .30 мин. Верхний слой экстракта помещают в колбу и получают сухой остаток путем отгонкн с помощью роторного испарителя. Полученный сухойостаток растворяют в 5 мл диметилсульфоксида, прибавляют 0,05 мп1 н.раствора гидроксида калия, инкубируют смесь в течение 4-6 мин и определяют интенсивность флюоресценции опытного и контрольного образцов клиническим Апюориметром при Явозбуждения 436 нм и М флюоресценции 510 нм. По разнице интенсивности флюоресценции опытного образца иконтроля по калибровочной кривойопределяют содержание аниона форидона в 1 мп диметилсульфоксида и переО 5 20 25 30 35 49 45 50 55 3 14975считывают содержание форидона в 1 млпл аз мы.Построение калибровочной кривой.В ряд пробирок кмп плазмы мккрошприцем прибавляют стандартныйраствор (А кли Б) форидона в этанолетак, чтобы 1 мп плазмь содержал от20 до 1000 нг форидона, встряхиваюти прибавляют по 6 мл этилацетата.Далее проводят анализ,Интенсивность флюоресценцки опытого образца отн. ед. 26,8, интенсивость флюоресценции контрольного об 1 азца 24,8 отн. ед., разница составюяет 2,0 отн.ед.1По калибровочной кривой находятсколько аниона форидона соответствЗют 2,0 отн.ед, интенсивности флюо/ресценции, Получают 9,0 нг анионаоркдона в 1 мп диметилсульфоксида.Для анализа использовано 5 мп диметипсульфоксида 9,05 = 45,0 нг.Следовательно, 1 мп плазмы крдвисодержит 45 нг форидона.Используемые реактивы: этилацетат,дважды перегнанный при 77 С, диметклсульфоксид, сушенный гидроксидомКалия, перегнанный в вакууме, 1 н,раствор гидроксида калия, стандартные растворы форидона в этаноле;раствор А - 0,1 г стандартногообразца форидона в .100 мл этанола(АД) 165/105 Ъм рт.ст., частота сердечных сокращений (ЧСС) 71.По предлагаемой методике больному брали кровь до приема препарата(контроль) и через 3 ч после одноразового приема 20 мг форидока (опытный образец). Получили плазму крови,рН плазмы крови 7,2. 1 мл контрольНой и опытной плазмы экстрагировалис 6 мл этилацета".а, получили сухойостаток, котогый растворили в 5 млдиметилсульфоксида, прибавилк 0,05 мл1 н.раствора гидроксида калия, инку 3бировали раствор 5 мин и определилиинтенсивность Алюоресценции опытного и контрольного образцов при возбуждения 436 нм к / флюоресценции 510 нм. По разнице интенсивности флюоресценцик, используя калибровочную кривую, определилк, что 1 мп плазмы крови больного содержит 92,9 Ф +3,4 нг форидона, Несмотря на то,что концентрация форидона в кровибольного была достаточной для получения гкпотензивного эффекта, эффект отсутствовал, а именно, артериальное давление через 3 ч оставалось165/105 мм рт.ст., частота сердечныхсокращений 78. Следовательно, дальнейшее увеличение дозы форидона нецелесообразно.и при проведении терапии рекомендовано форидон заменитьдругим препаратом, Больному назначена терапия праэозином, который оказал положительный гкпотейзивный эффект,П р и м е р 2. Больная С., 43 лет.оЖалобы на давление в висках, усталость, Артериальное давление повышено с 1979 года. Последние 3-4 годаАД было повышено до 240/150 мм рт,ст,Диагноз: артериальная гипертензия.Сопутствующие заболевания - бронхиальная астма, легочно-сердечная недостаточность 1, энфизема легких.АД при поступлении 200/120 мм рт. ст,ЧСС 80 раз в минуту.По методике изобретения больнойбралк кровь до приема препарата(контроль) и через 3 ч после одноразового приема 20 мг форидона (опытный образец). Получили плазму крови,рН плазмы крови 7,61 мл контрольной и опытной плазмы экстрагировалис 6 мп этилацетата, получилк сухойостаток, который растворили в 5 мпдиметилсульфоксида, прибавили 0,05 м1 н.раствора гидроксида калия, инкубировали раствор 5 мин и определилиинтенсивность фпюоресценцки опытного и контрольного образцов при Л воз.буждения 436 нм кфлюоресценцик510 нм, По разнице интенсивностифлюоресценции, используя калибровочную кривую, определили, что 1 млплазмы крови больной содержит 22,5+13,3 нг форидона,После приема 20 нг форидоначерез 3 ч, т.е, в пик максимальногогипотензквного действия АД снизилосьс 180/120 на 1 бУ/100 мм рт,ст. Однако гипотензивный эффект не достигжелаемого уровня к концентрация форкдона (22,5 нг) в крови была нижеоптимальной (40 нг/мл концентрации).Составитель А.В. Скурат Техред Л,Олийнык Редактор Л. Пчолинская Корректор С. Щекмар Заказ 4439/47 Тираж 789 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат."Патент", г.Ужгород, ул, Гагарина,10 5 1497С целью увеличения эффекта больной в дальнейшем назначили увеличения дозы Форидона по 20 нг 4 раза в день, т.е. 80 мг в сутки. После такого увеличения дозы через 8 дней терапии исходное АЛ до приема препарата было 160/105, через 3 ч после приема 20 мг Форидона 150/100 мм рт.ст. Побочные реакции не отмечались. 0В дальнейшем рекомендовано применение Форидона по 20 мг 4 раза в день амбулаторно.По предлагаемой методике было обследовано 49 больных артериальной гипертензией. При обычной дозировке 1 О или 20 мг Форидона у 60,7 Х больных через 2-4 ч после приема препарата был получен нормальный гипотензивный эффект,. который коррели О ровал с концентрацией форидона (40- 90 нг/мл) в плазме крови.У ЗО,ЗЕ больных при этой дозе Форидона гипотензивный эффект был незначителен или отсутствовал. Опреде ление Форидона в плазме крови показало, что у 8,1 Х больных через 3 ч после приема препарата концентрация Форидона была недостаточна (ниже 40 нг/мл ). Это явилось причиной от О сутствия желаемого терапевтического эффекта. Лозу препарата, следователь 571 6но, надо было увеличить до до тижсния оптимальной концентрации40- 90 нг/мл) Форидона в плазме крови,У остальных 22,57. больных с недостаточно выраженным гипотензивнымэффектом концентрация Форидона в крови была достаточной для получения терапевтического эффекта, им было нецелесообразно далее увеличивать дозу форидона, Для получения терапевтического эффекта необходимо было заменить препаратФормула изобретенияСпособ определения форидона в плазме крови путем экстракции, выпаривания и анализа сухого остатка в опытном и контрольном образцах, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа, экстракцию проводят этилацетатом при рН 7,2- ,6, сухой остаток растворяют в диметилсульфоксиде, добавляют к раствору 1 н.раствор гидроксида калия при соотношении диметилсульфоксид - гидроксид калия 100 : 1, инкубируют смесь в течение 4-6 мин и определяют разницу интенсивности Ьлюоресценции опытного и контрольного образцов при длине волны возбуждения 436 нм и длине волны Флюоресценции 510 нм.