Способ определения фертильности эякулята

. А.В.Луна шакова ность мужчин53.ФЕРТИЛЬНОСТИ тся к медиципредназначе бретение относиее к биохимии,СУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ ОПИСАНИЕ ИЗОБР И АвтОРСНоюЮ СаидкткльСТ(71) Астраханский госумедицинский институт ичарского,ЯО 1409943 для установления степени нарушениясперматогенеза. Для этого спермальную плазму получают центрифугированием эякулята при 3000 об/мин, Вспермальной плазме иммунологическимметодом рассчитывают концентрациюпростатического /-глобулина, лактоферина, кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентрацийпростатического р -глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и по значению этого показателяделают вывод о состоянии эякулята -интерфильном, субфертильном илифертильном. 1 табл.Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано, в частности для установления степени нарушения сперматогенеза.Цель изобретения - повышение точности способа.Пример 1, Больной Л.,30 лет. Получена сперма для исследования степени нарушения фертильности.Определение проводится следующим образом. Спермальную плазму получаютцентрифугированием эякулята в течение 10 мин при 3000 об/мин.На стеклянные пластинки размером98 см заливают 10 мп агаразы, содержащей 57. моноспецифической кроличьей антисыворотки к лактоферринучеловека (стекло 1), 57. моноспецифической антисыворотки к простатической кислой фосфатазе человека (стекло 2) и 102 моноспецифической антисыворотки к простатическому бетаглобулину (стекло 3) соответственно,После застывания агара в нем пробивают 12 лунок диаметром 30 м, в которые вносят пробу спермальной плазмы больного, а также при разведениистандартного препарата лактоферрина(стекло 1), простатической кислойфосфатазы (стекло 2), простатического бета-глобулина (стекло 3).Объем всех проб по 20 мкл. Пробуспермальной плазмы больного исходноразводят в 20 раз электродным буфером. Затем из этого раствора дляопределения простатического бета-глобулина готовят окончательные разведения 1:200, а для определения кислой фосфатазы (К)-1:300, лактоферрин определяют в исходном раэведе"нии.После внесения проб пластинки помещают в аппарат для электрофореза.ПЗФ-З, Ванны заполнены веронал"мединаповым буфером, рН 8,6, на котором приготовлена и агароза, Злектрофорез проводят в направлении анода (в течение ночи) при напряжении3 В/см.Окончание элерстрофореэа оценивается визуально по завершению формирования ракетообраэных преципитатовстандартов. Затеи измеряют высотупиков у соответствующих проб лунокбольного и высоту пиков стандартныхбелков. По высоте пиков стандартныхбелков строят калибровочный график10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 и вычисляют концентрации исследуемых белков.У больного Л. концентрация простатического бета-глобулина равна112 мг 7., лактоферрина - 28 мг 7 апростатической кислой фосфатазы -706 мг 7 Подставив эти данные в формулу, получают следующую величину112+28коэффициента фертильности= 0,2Вывод; эякулят инфертилен,данные цитологического исследования - объем 5,5 мл, желтоватая жидкость, сперматозоиды отсутствуют,через 45 мин полного разжижения нет,Азооспермия.П р и м е р 2. Больной Б.,23 года. Получен эякулят для иссле"дования степени нарушения сперматогенеза. Определение проводится также, как в примере 1. Концентрацииисследуемых белков у больного: простатического бета-глобулина -137 мгХ, лактоферрина - 36 мг 7.,простатической кислой фосфатазы -522 мгй. Подставив эти данные вформулу, получают величину коэффици.137 + 36цента фертильности = 0,33.Вывод:; эякулят инфертилен. Данныецитологического исследования; 0,5 млбеловатой жидкости, сперматозоидыотсутствуют, разжижение через 45 минполное. Азооспермия.П р и м е р 3. Больной М. Получен эякулят для определения степенинарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следуюшие концентрации белков: простатического бета-глобулина - 130 мг 7., лактофферина -35 мг 7., кислой фосфатазы - 470 мг 7Подставив эти значения в формулу, получают следующее значение коэффициен 130 + 35та фертильности 4 = 0,35.Эякулят субфертилен. Цитологическоеисследование: 2,0 мл беловатой жидкости, сперматозоиды 0-3-5, слабоподвижны, разжижение через 45 минполное. Олигоэоспермия.П р и и е р 4, Больной М. Получен эякулят для определения степенинарушения сперматогенеза. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации и следуемых белков: простатического бета-глобулина 156 мг 7., лакто943 Известный Предлагаемый Совпадениеспособ способ заключений,% Заключения 12687,3 110 фертильный 96,8 185 179 Субфертильный 161 93,8 151 Стерильный 3 1409феррина - 40 мг%, кислой фосфатазы390 мг%, Подставив эти значения вформулу, получают следующее значение156 + 40коэффициента фертильности = 5= 0,5. Эякулят субфертилен, Цитологическое исследование; 5,0 мл белесой жидкости, вязкая, сперматозоиды30-50, слабоподвижны, характер движения поступательный, разжижение через45 мин полное. Олигоэоспермия.П р и м е р 5. Больной С26 лет. Получен эякулят для определения степени нарушения сперматогенеза. 15Определение проводится так же, какв примере 1, Получены следующиеконцентрации исследуемых белков:простатического бета-глобулина -222 мг%, лактоферрина - 46 мг%, кислой фосфатазы - 358 мг%. Подставивэти значения в формулу, получают ко 222 + 46эффициент фертильности= 0,75. Эякулят фертилен, Цитологическое исследование: 25 мл, сперматозоиды 50-65-80, подвижны, движениявращательно-поступательные. Нормозооспермия,П р и м е р 6. Больной К. Получен эякулят для выяснения степени,нарушения сперматогенеэа. Определение проводится так же, как в примере 1. Получены следующие концентрации белков: простатического бетаглобулина - 242 мг%, лактоферрина -52 мг%, кислой фосфатаэы - 326 мг%.Подставив эти значения в формулу,получают коэффициент фертильности242 + 520,9. Эякулят фертилен. 40Цитологическое исследование %13231:5,0 мл белесой жидкости, сперматозоидов много, хорошо подвижны, разжижение через 45 мин полное. Нормо, зооспермия,Предлагаемый способ дает возможность установить степень нарушениясперматогенеза. При этом нет необходимости в цолучении эякулята непосредственно перед исследованием, чемрешается ряд организационных и этических проблем. Способ лишен субъективизма в оценке, унифицирован, позволяет одномоментно исследовать несколько образцов, прост в осуществленииИсследовано с вычислением коэффициента фертильности в общей сложнос ти 456 проб спермальной жидкости.Учитывая, что известный способ не поддается количественной оценке, можно только оценить совпадение сделанных заключений (см.таблицу),Различия по предлагаемому способу между коэффициентами фертильности, по которым делается разное заключение, следующие: между минимальным коэффициентом, при котором эякулят считают фертильным 0,7, и высшим, при котором эякулят уже субфертилен 0,5, достоверность значима (Р ( 0;01) то же касается и различия между коэффициентами инфертильности й стерильного зякулята. В промежутке 0,7-0,5 и 0,33-0,35 во всем исследованном материале коэффициент не получался ни разу. формула изобретения Способ определения фертильности эякулята путем исследования спермы, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности, в спермаль" ной плазме иммунологически онределяют концентрацию простатического бета-глобулина, лактоферрина и кислой фосфатазы, рассчитывают отношение суммы концентраций простатического бета-глобулина и лактоферрина к концентрации кислой фосфатазы и при показателе, равном 0,2-0,33, оценивают эякулят инфертильным, 0,35-0,5 - субфертильным, 0,75- 0,9 - фертильным.