Способ идентификации вида стафилококка

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 127796 51)4 А 61 К 39 085 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ ЕЛЬСТВ ВТОРСКОМУ СВИ ии институт и инфекционский ные б дицине. ч ности кивают ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВИДАСТАФИЛОКОККА(57) Изобретение относится к меЦель изобретения - увеличение тоспособа. Культуру стафилококка сменс 1 дб-диагностикумом, антивидовыми и контрольными диагностикумами, соответствующими каждому из видовых. Результат реакции учитывают по образованию характерного агглютината. Эритроцитарный 1 дб-диагностикум готовят риванольным методом, а антивидовые - путем конъюгирования эритроцитов с антисыворотками с помощью амидола. При наличии агглютинации со всеми диагностикумами идентифицируют золотистый стафилококк с высоким содержанием белка А. При агглютинации с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или золотистый с низким содержанием белка А и ЯарЬу 1 ососсиз 1 п 1 егп 1 ей 1 цз. При агглютинации с 1 Я 6- диагностикумами и с антивидовыми диагностикумами идентифицируют эпидермальный стафилококк или ЫарЬососсцз 1 п 1 еггпес 1 шз, содержащие белок А.О1Изобретение. относится к медицине, в частности к иммунологическим способам определения бактерий,Целью изобретения является увеличение точности идентификации различных видов рода ЯарЬу 1 ососсцз независимо от их штаммовой принадлежности и наличия белка А на основе определения поверхностных клеточных видоспецифических антигецов. Поставленная цель достигается проведением реакции непрямой гемагглютинации анализируемой культуры стафилококка на стекле в течении 0,5 - 3 мин с различными иммуноглобулиновыми диагцостикумами: эритроцитами, сенсибилизированными 1 уб человека (из нормальной сыворотки), эритроцитами сенсибилизированными антивидовыми стафилококковыми сыворотками и эритроцитами, сенсибилизированными контрольными нормальными кроличьими сыворотками от тех же кроликов до иммунизации. При агглютинации всех используемых диагцостикумов идентифицируют вид ЯарЬ. ацгеяв с высоким содержанием белка А; при агглютцнации только антивидового диагнос 10 15 20 тикума идентифицируют гомологичный вид ЫарЬ. ер)с)еггп 1 с 11 з, ЫарЬ. 1 п 1 епгпес 11 цв или ЯарЬ. ацгецз с низким содержанием белка А; при агглютинации 1 Дб-диагностикума, анти видового диагн ости кума и отсутствии агглютинации других используемых диагностикумов идентифицируют гомологичный вид -Яар 1 п ег 1 с 1 егппс 11 в или ЯарЬ. 1 п 1 еппес)гцв сналичием белка А. 30 только в отношении богатых протеином Аштаммов золотистого стафилококка. Способ осуществляют следующим образом.Выделенную культуру стафилококка, подлежащую видовой идентификации, взятую 35петлей с плотной питательной среды или ввиде капли густой смеси (5 - 20 млрд микробных тел в 1 мл по оптическому стандарту),вносят в каплю каждого из диагностикумов,находящихся ца предметном стекле:1116-диагностикума, ацтивидовых диагностикумов(против ЯарЬ. ацгепз, 81 арЬ. ер 1 с 1 еггп 1 с 11 з,81 арЬ. 1 п 1 егспес)шз), контрольных диагностикумов, соответствугцих каждому из видовых. Капли тщательно перемешивают петлей или стеклянной палочкой и учитываютрезультат реакции визуально через 0,5 -3 мин по образованию характерного агглютината. Используемый эритроцитарный 1 флдиагностикум готовят риванольным методом,а антивидовые диагностикумы -- путемкоцыогирования эритроцитов с антисыворотками с помощью амидола,Положительная реакция всех использованных диагностикумов возможна при взаимодействии этих иммуноглобулинсодержащих препаратов с поверхностным протеиномА стафилококка. Такая реакция проявляется аВ этом случае идентифицируется золотистый стафилококк ЯарЬ. ацгецв с высоким содержанием белка А.Положительная реакция антивидового диагностикума при отсутствии агглютинации других диагностикумов свидетельствует об отсутствии у идентифицируемого штамма протеина А, причем в этом случае вид стафилококка соответствует гомологичной сыворотке против 81 арЬ. ер 1 с)егпис)1 в, 81 арЬ. ацгецз или ЯарЬ. 1 п 1 еггпес)гцРеакция агглютинации 156-диагностикума и одного из видовых диагностикумов при отсутствии агглютинации других диагностикумов свидетельствует о наличии стафилококка, гомологичного вида ЯарЬ. ер 1 с)егпп- Йз или ЯарЬ. 1 п 1 еггпес 11 из, но содержащего белок А.Пример. Суспензии 25 штаммов стафилококка, выделенные от больных и носителей, анализировали перед описанным способом с использованием только антивидовых диагностикумов и по способу идентификации стафилококка независимо от вида с тремя типами диагностикумов. При определении вида по агглютинации двух антивидовых антительных диагностикумов (против золотистого и эпидермального стафилококка) четыре культуры были отнесены к виду Золотистый и три к виду Эпидермальный. Видовая принадлежность 18 культур не была определена из-за агглютинации обоих использованных типов диагностикумов. При определении вида с помощью трех типов диагностикумов 18 культур были отнесены к виду 81 арЬ. ацгецз с высоким содержанием белка А, 4 культуры - к виду 81 арЬ. ацгецз без белка А, 3 культуры - к виду ЫарЬ. ер 1- с 1 егппс)1 з. Доля идентифицированных штаммов повысилась с 28 О по известному способу до 100%, что свидетельствует о большей точности способа.Способ идентификации вида стафилококка дает также дополнительную информацию о содержании белка Л у исследуемых штаммов. Эти сведения, а также быстрота и высокая точность способа могут быть использованы для уточнения этиологии бактериальных заболеваний, вызываемых стафилококком и более обоснованного лечения больных.Формула изобретенияСпособ идентификации вида стафилококка путем определения видоспецифичных антигенов в реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитарными диагностикумами, сенсибилизированными антисыворотками к различным видам рода ЯарЬу 1 ососсцз, отличающийся тем, что, с целью увеличения точности способа, дополнительно для проведения реакции гемагглютинации используют контрольные эритроцитарные диагностикумы, сенсибилизированные Щб человека из нормальной сыворотки и сенсибилизирован1277966 Составитель Л. Падюков Редактор Г. Гербер Техред И. Верес Корректор М. Лсмннк Заказ 6677/3 Тираж 660 По хниснос ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4ные нормальными сыворотками животных, являющихся продуцентам и антисывороток к различным видам стафилококка, и при наличии агглютинации со всеми диагностику- мами идентифицируют Яарп. ацгецз с высоким содержанием белка А, при агглютинации с антивидовыми диагностикумам и идентифицируют Яарй. ерЫегпцсь, Яарп. 1 пФеггпеЙцз или 51 арЬ. ацгецз с низким содержанием белка А, при агглютинации с д б-диагностикумом и с антивидовыми диагностикумами идентифицируют Яарп. ерЫег. пцйз или Яарй. 1 п 1 еггпес 1 шз, содержащее белок А.