Способ определения степени тяжести язвенного стоматита

(54 ЖЕС СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИ ЯЗВЕННОГО СТОНАИзобретение отнгии. Цель изобреточности способания активности пр ЕПЕ сится к стомаения - повышеза счет опретолтеолитически дел ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ(46) 23.07.86. Бюл. 11. 27 (71) Киевский ордена Трудового Крас ного Знамени медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца (72) К. Н. Веремеенко, Н. Ф. Данилевский, Л. Г. Швец, Л. И. Болохонская и Г, Ф. Карпенко (53) 616.07(088,8)(56) Несин А. Ф, Лечение язвеннонекротических поражений слизистой оболочки рта мефенамина натриевой солью. Канд. дисс. Киев, 1979.Фферментов. До лечений у больного по,лучают натощак 0,2 мл смешанной слюны. В опытную пробирку вносят 0,5 млмединалового буфера с рН 7,6, 0,1 млсмешанной слюны и 0,2 мл 17.-ного .раствора протамина. В контрольнуюпробирку добавляют трихлоруксуснуюкислоту перед внесением субстрата.Пробы инкубируют в ультратермостатеи центрифугируют. В.прозрачном трихлоруксусном фильтрате по реакцииСакагуши определяют количество аргинина, которое служит мерой активности фермента. При активности протеолитических ферментов, равной2,010,1 ммоль аргинина на 1 л ротовой жидкости в 1 ч, определяют легкую степень язвенного стоматита, при3,0 ф 0,1 - среднюю степень, а при величине 3,7 и выше - тяжелую степеньзаболевания. 1 табл.1246008 Количество аргинина в пробе, мкг 0,12 5,0 10,0 0,23 0,47 20,0 25,0 0,70 35,0 40,0 Иэобретение относится к медицине, н частности к стоматологии, и может быть использовано для определения степени тяжести язвенного стоматита.Цель изобретения - повышение точности способа за. сче. определения активности протеопитических Ферментов,. Способ осуществляется следующим образом.Для лечения у больного натощак получают смешанную слюну беэ стимуляторов слюноотделения. Для анализа необходимо 02 мл смешанной слюны, В опытную пробирку вносят 0,5 мл 0,05 М мединалового буфера рН 7,б, О, мл смешанной слюны и 0.-,2 мл 1 Е- ного раствора протамина, приготовленного на том же буфере. Пробы инкубируются в ультратермостате при 37 С на протяжении 30 мин, после че" го реакция останавливается прибавлением 0,8 мл 207.-ного трихлоруксусной кислоты, Параллельно с одытной пробиркой ставится контрольная, к которой трихлоруксусную кислоту прибавляют перед внесением субсрата. Пробы центрифугируют 45 мин при 5000 об/мин. В прозрачном трихлор- уксусном Фильтрате при реакции Сакагуппе определяется количество аргинина, которое служит мерой активности Фермента. Для этого к 1 мл фильтрата добанляют 1 мл воды, 1 мл 0,02" ного раствора оксихинолина и 1 мл 12-ного раствора едкого натра. Пробы перемешивают и прибавляют 0,2 мл 12-ного раствора 11 еЗгО, через 15 с - 1 мл 4 ОЕ-ного раствора моченины.Через 10 мин определяется оптическая плотность раствора, которую измеряют на спектрофотометре при длине волны 508 нм с толщиной слоя кюветы 10 мм, сравнивая опытную пробирку против контрольной. Количество аргинина расчитынается при помощи калибровочной кривой,составленной с солянокислым аргининем (5-40 мкг аргинина н пробе) Припостроении графика на оси ординат -показатели оптической плотности при508 нм, на оси абсцисс - количествоаргинина н пробе (мкг). Данные дляпостроения калибровочной кривой ,.ринедены в таблице,Активность Фермента выражаетсяв ммолях аргинина, отцепленного 1 лслючы н час, Расчет производится последующей Формуле:протеолитическая активность==О, 184 Е ез,где О,84 - расчетный коэффициент;Е- содержание аргинина вопытной пробе, соответ"ствующее ее оптическойплотности, мкг.П р и м е р 1. Больная Г 31год. Жалобы на болезненность и кровоточивость десен. Появились 2 дняназад после переохлождения. Объективно: общее состояние удовлетвори 35 тельное.Десны верхней и нижней челюстей гиперемйрованы, отечны, легко кровоточат при прикосновении.Вершины межзубных сосочков в областиб:344021,2 Я зУбов иэъязвлены, покрытые 3 осерым некротическим налетом, болезненны при прикосновении, Обильноеотложение наддесневого и поддесненого зубного камня, Подчелюстные45 лимфоузлы несколько увеличены, подвижны, болезненны при пальпации,Анализ крови без особенностей, Прибиохимическом исследовании смешанной слюны определена активность про 0 теолитических ферментов. Она равна 1,9 ммоль аргинина/л слюны/ч.Диагноз: остный язвенный гингивит, легкая степень заболевания.П р и м е р 2. Больной Д., 22лет. Жалобы на болезненность и кровоточиносгь десен, Появились 3 месяцаназад. Объективно: общее состояниеудовлетворительное. Десны верхней иЗаказ 3993/37 Тираж 778 Подписное ВНИИХИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5. изъязвлены, покрыты серым некротическим налетом. Десневой край валикообразно утолщен. Подчелюстные лим"фоузлы несколько увеличены, слегкаболезненны при пальпации подвижны.Протеолитическая активность смешанной слюны равна 2,9 ммоль аргинина/л слюны/ч,Диагноз: хронический язвенныйгингивит, средняя степень заболевания.П р и м е р 3Больная Ф., 30лет, Жалобы на слабость, головнуюболь, повышение температуры до 37,8,плохой сон, невозможность принятияпищи из-за резкой болезненности язвв полости рта. Появились 10 днейназад. Объективно: больная нормостенической конструкции, кожные покровы бледные, покрыты капельками пота.На расстоянии слышен гйилостный запах изо рта, Десны верхней и нижнейчелюстей гиперемированы, отечны,десневой край изъязвлен, покрыт некротическим налетом, в области:234в в в "-зубов некроз мягких тканей21:1231 246008 4до бродит до середины альвеолярногоотростка челюстей. В ретромолярномпространстве :8 зуба язвенная поверхность размером 2 х 3 см, покрыта. серым5 налетом, переходящая на слизистую щеки. Подчелюстные лимфоузлы слеваувеличены, болезненны при пальпации,подвижны. Анализ крови: лейкопитоз8,4 10 в 1 л, СОЗ 21 м,ч, Актив 10ность протеолитиче"к:х ферментовсмешанной сионы 4,2;моль аргинина/л/слюны/ч. Формула изобретения Способ опреДеления степени тяжести язвенного стоматита, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, у пациента берут пробу ротовой жидкости, в которой определяют активность протеолитических ферментов с испольэо" ванием в качестве субстрата протамин сульфата и при величине этого показателя 2,ОЙДО,1 ммоль аргинина на 1 л ротовой жидкости в 1 ч опре-, деляют легкую степень, 3,00,1 среднюю срепень, а при величине 3,7 и выше - тяжелую степень заболевания.