Способ определения адекватных физических нагрузок у спортсменов

, лцлцццц цццц. п ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ(56) Авторское свидетельство СССР 9 940745, кл. А 61 В 1 О/00, 1 982 . (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДЕКВАТНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК У СПОРТСМЕНОВ (57) Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - повышение точности способа. Для выявления спонтанных роэеткообразующих лимфоцитов (Т-РОК) и нейтрофилов (Б-РОК) взвесь лейкоцитов смешивают с взвесью эритроц ту смесь инку-бируют,цен ыдерживают вохолодильник ч при+6 Сификсируют глутаральдегидом. Смесьцентрифугируют. Осадок переносят настекло, делают мазок. Фиксируют егои окрашивают азур-эоэином. Готовятмазки для выявления комплементарныхрозеткообразующих лимфоцитов (В-РОК)и нейтрофилов (И -РОК). Подсчитываютколичество розеткообразующих клеток,Оставшиеся клетки, которые не принимали участие в розеткообразовании,считали нулевыми лимфоцитами (Л),и нулевыми нейтрофилами (И,). Призначениях Т-РОК 14661118, В-РОК45533; Б -РОК 2063199, М-РОК549146; Л, 14628; Б 1123100 о ределяют адекватную нагрузку для спортсмена, а при снижении показателейотносительно нормы определяют неадекватную нагрузку, 1246009Изобретение относится к медицинеи касается способов иммунодиагностики экстремальных состояний человека.Цель изобретения - повышение точности прогнозирования адекватных физических нагрузок у спортсменов.Определяют число Т- и В-лимфоцитов, спонтанных (Ьз) и комплементарных нейтрофилов И , а также числолимфоцитав (Л) и нейтрофилов (И,),не вступающих в реакцию розеткообразования, и прн значениях Т-РОК 1466+:118,. В-РОК 455+33 И -РОК 2063+199,Лд -РОК 549+46 Л 14628 Б , 1223+100определяют адекватную нагрузку дляспортсмена, а при снижении данныхпоказателей относительно нормы - неадекватную нарузку.Способ осуществляется следующим,образом,1В пробирки с 75 МЕ гепарина забирают 3 мл крови из локтевой вены,затем добавляют 1 мл 3%-ного раствора желатина и выдерживают при комнатной температуре в течение 40-45 миндля осаждения эритроцитов. Надосадочную жидкость отсасывают в силиконированнье пробирки, добавляют среду 199, содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют при 7501000 аб/мин в течение 5 мин. Осадокеще дважды отмывают средой 199, подсчитывают количество лейкоцитов вкамере Горяева и доводят до концентрации 2 Х 10 кл/мл.Для выявления спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Т-РОК) инефтрофилов (Б-РОК) 0,1 мл получен.ной взвеси лейкоцитов смешивают с0,1 мл 0,4%-ной взвеси эритроцитовбарана, которые предварительно отмывают 3 раза физиологическим раствором. Полученную смесь инкубируюто5 мин при 37 С в термостате, центрифугируют 5 мин при 50-1000 об/мини выдерживают в холодильнике в течение 1 ч при +б С. Затем в течение20 мин фиксируют глутаральдегидом,который добавляют в конечной концентрации 0,6%. После этого смесь заливают дистиллированной водой, пипетируют и центриФугируют 5 мин при 7501000 об/мин. Насадочную жидкость сливают, а осадок переносят на предметное стекло и делают мазок, которыйвысушивают при комнатной температуре,фиксируют 10 мин в метиловом спиртеи окрашивают азур-эоэином. 5 10 15 20 25 30 3 40 45 Для выявления комплементарных роэеткообразных лимфоцитов (В-РОК) и нейтрофилов (И -РОК) 0,1 мл взвеси лейкоцитов (2 х 10 кл/мл) смешивают с6о,1 мл 05%-ной взвеси аллогенных эритроцитов, которые предварительно сенсибилизируют кроличьей антисывороткой к эритроцитам человека в субагглютинирующем разведении и комплементом в разведении 1:10. Смесь инокубируют 5 мин при 37 С, центрифугируют при 750-1000 об/мин в течение 5 мин и Фиксируют глутаральдегидом 20 мин. Фиксацию и окраску мазков проводят аналогично спонтанному розеткообразованию.Подсчет роэеткообразующих клеток проводят под имерсионной системой микроскопа при увеличении ОКх 10, ОБх 60. Просчитывают 200 лимфоцитов и 200 нейтрофилов, вычисляют из них процент розеткообразующих и, исходя из общего количества лейкоцитов и формулы крови, производят пересчет на абсолютные числа. Оставшиеся клетки, которые не принимают участия ни в спонтанном, ни в комплементарномрозеткообразований, считают нулевыми лимфоцитами (Л ) и нулевыми нейтрофилами (И,).П р и м е р. Спортсмен М. А. Г., 19 лет, студент, спортивный стаж превышает 3,5 года кандидат в мастера спорта, противопоказаний к участию в соревнованиях не имеет, Обследование в процессе тренировок при аэробно-анаэробном энергообеспечении выявило резкое уменьшение числа нулевых лимфоцитов и нейтрофилов которое для Ла составляет 53, а для И 72 в 1 мкл крови. Участие в соревнованиях этого спортсмена привело к полному исчезновению как Л так и И все лимфоциты и нейтрофилы у него стали розеткообразующими. Количество Т-РОК составляет 910, В РОК 38, И-РОК 98, И -РОК 51. Сделан вывод о срыве адаптационно-приспособительных механизмов имунной системы, что в дальнейшем подтвердилось, ибо продолжениетренировочных занятий вместо рекомендованного значительного сниженияобъема и интенсивности привело у этого спортсмена к исчезновению из крови В-лимфоцитов и резкому снижениючисла Т-лимфоцитов, их число быловсего 610 в 1 мкл крови, что в 2 ра"эа ниже, чем у здорового человека1246009 Составитель Л. АртюшинаРедактор Н. Яцола Техред О.Сопко Корректор М, Пожо Заказ 3993/37 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 без физических нагрузок. Спортсменвременно отстранен от участия в соревнованиях, у него обострился кариес с кистогранулемой. Параллельно слечением кариеса проведена иммунокоррегирующая терапия. Формула изобретения Способ определения адекватных физических нагрузок у спортсменов путем иммунологического исследования крови, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения точности способа, у пациента определяют числоТ- и В-лимфоцитов, спонтанных и комплементарных нейтрофилов, а также 5 число лимфоцитов и нейтрофилов, невступающих в реакпию розеткообразования и при значении Т-РОК 1466-118, В-РОК 455-33, Б-РОК 2063199, Ис -РОК 54946, Л 146-28, И 1123100 1 О определяют адеква: ную нагрузку для, спортсмена, а при сидении данныхпоказателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку.