Способ качественного определения глютаминовой кислоты или цистеина

(71) 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова (72) Н. А. Овеснова и М. Н. Колочевская (53) 543.432(088.8)(56) Зальцберг В. Х. Живописцев В. П., Богословская О. Н. Использование аминона при анализе лекарственных соединений.В сб.: Пиразолоны в аналитической химии. Пермь, 1974, с. 39.Шрайнер Р. и др. Идентификация органических соединений. М.: Мир, 1983, с. 273.(54) (57) СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮТАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ ЦИСТЕИНА путем обработки водного раствора анализируемой пробы. цветореагентом с последуюши м фиксированием окрашивания полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности определения, в качестве цветореагента используют бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метилпиразолон-ил) -карбинол в присутствии хлороформа и фиксируют окраску хлороформного слоя,1191791 Способ Аминокислота Описываемый Известный Лекарственные вещества Окрашивание от.сутствует Фиолетовое окрашивание Аминалон То же То же Гистидин Фиолетовое окрашив ание Глютаминоваякислота Метионин Окрашивание от.сутствует Изобретение относится к аналитической химии, к качественному определению органических соединений, а именнок качественному определению аминокислот: глютаминовой и цистеина, которыеприменяются в фармацевтической практике.Целью изобретения является повышение специфичности определения.Пример 1. В пробирку емкостью 20 млпомещают 0,5 мл 0,0500-ного водного раствора бис-(4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метилпиразолон-ил) -карбинола (аминона), добавляют 0,1 мл О, е 0-ного водного раствора глютаминовой кислоты и 1 мл хлороформа, Содержимое пробирки встряхивают, слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.Пример 2. 0,5 г порошка растертыхтаблеток глютаминовой кислоты по 0,25 г,покрытых оболочкой, растворяют в 5 мл водыи фильтруют через бумажный фильтр.В пробирку емкостью 20 мл помешают0,5 мл 0,0500-ного водного раствора бис-(4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метилпиразолон-ил) -карбинола (аминона), добавляют 0,1 мл приготовленнОгофильтрата и 1 мл хлороформа. Встряхивают содерж имое пробирки. Слой хл ороформа окрашивается в фиолетовый цвет.Пример 3. 0,5 г порошка растертых таблеток глютаминовой кислоты по 0,5 г (безоболочки) растворяют в 5 мл воды и фильтруют через бумажный фильтр, В пробирку емкостью 20 мл помещают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора бис-(4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метилпиразолон-ил) -карбинола (аминона), добавляют0,1 мл приготовленного фильтрата и 1 млхлороформа. Встряхивают содержимоепробирки. Слой хлороформа окрашиваетсяв фиолетовый цвет,Пример 4, 0,5 г порошка растертыхтаблеток глютаминовой кислоты по 0,25 г,растворимых в кишечнике, растворяют в 5 мл воды и фильтруют через мубажный фильтр, В пробирку емкостью 20 мл помешают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора5бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метипиразолон-ил) -карбинола(аминона), добавляют О,1 мл приготовленного фильтрата и 1 мл хлороформа. Встря.хивают содержимое пробирки. Слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.1 О Пример 5. В пробирку емкостью 20 млпомешают 0,5 мл 0,050-ного водного раствора бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-метилпиразолон-ил ) -ка рбинола(аминона), добавляют 0,1 мл 0,05%ного водного раствора цистоина и 1 мл15 хлороформа. Содержимое пробирки встряхивают, слой хлороформа окрашивается вфиолетовый цвет.Чувствительность качественного определения кислоты глютаминовой 40 мкг/мл.цистеина 20 мкг/мл. Вспомогательные вещества, входящие в состав таблеток, определению не мешают; чувствительность определения не меняется,Другие аминокислоты - лекарственныевещества: метионин, гистидин, аминалон,фенилбут, а также прочие а-аминокисло 25ты (см. таблицу) - в указанных условияхне дают окрашенного экстрагируемого соединения с аминоном. Отсутствует экстракция а-аминокислот, в том числе и глютаминовой кислоты и цистеина, с другимнкислотными красителями: бромфеноловымкрасным, бромкрезоловым пурпурным, метиловым оранжевым и бромтимоловымсиним.В таблице представлена специфичность способов идентификации аминокислотПредставленные данные показывают.что описываемый способ качественного определения глютаминовой кислоты и цистеина по сравнению с известным являетсяболее специфичным.1191791 Продолжение таблицы г То же Фенилбутц Фиолетовое окрашивание Прочие Окрашивание огсутствует Алании То же АргининГлицин Изолейцин Лейцин Лизин Норлейцин Оксил изин Окрашивание отсутствует Фиолетовое окра.шивание с - Фенилаланин.-Фенилаланин Редактор Н. ШвидкаяЗаказ 7150/40 ОрнитинПролинСерииТреонин Составитель, В. ШкильковаТехред И. Верес Корректор М. Максим ишинецТираж 896 ПотпнсноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, чл. Проектная, 4