Способ получения иммуностимулятора

ZIP архив

Текст

. Константинов,ьт язева 88.8) детельство 1 1( 35/30,СР82,ОСУДАРСТНЕНКЫЙ НОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(21) 3588257/28- (22) 03,05,83 (46) 30.10.85. Бю ,(71) Ленинградско и ордена Трудовог производственное промышленности им (72) В,Х.Хавинсон Н.Д.Сидорова, В.Л О.В.Чайка и С.П.К (53) 576,8.097,3( (56) Авторское св В 1112606, кл. А(54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСТИМУЛЯТОРА, включающий замораживаниесырья, измельчение, экстрагирование37,-ным раствором уксусной кислотыс добавлением хлористого цинка, филрование, обработку надосадочной жидкости ацетоном, отделение осадка,перерастворение его в воде и выделение целевого продукта, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения специфической активности целевого продукта, в качестве сырья используют лимфатические узлы животньи,а сырье перед заморозкой обрабатываюацетоном.Изобретение относится к медицинской промышленности и касается способов получения биологически активныхвеществ из животного сырья, в частности веществ, обладающих иммуностимулирующим действием,Цель изобретения - повышение специфической активности целевого продукта.П р и м,е р 1 Берутлимфатические 1 Оузлы животных, удаляют жировой слой,обрабатывают ацетоном с температуо орой 5 С 20 ч, замораживают при -20 С,0,5 кг лимфатических узлов измельчают на волчке, загружают в реактор 15с мешалкой и заливают 5 л 3%-ногораствора уксусной кислоты. Туда жедобавляют 0,005 кг хлористого цинкаи экстрагируют 24 ч, перемешивая1 ч через каждые 8 ч.По окончании экстракции субстратсливают и центрифугируют 20 мин соскоростью 3000 об/мцн, надосадочнуюжидкость декаптируют к ней добавляют ацетон (1 часть элюата и 10 частей 25ацетона), перемешивают ц формируютсадок в течение 20 ч. Выпавпптй осадок в.кушцвают, измельчают и растворя.ют 0,01 кг осадка в 0,5 л воды прцрП:=6,0 (экстрагент - 1%-ньк растворуксусной кислоты), Экстракцию проводят 4 ч. Удаляют балластные веществапутем фильтрации, В прозрачныц раствор добавляют уксусной кислоты дорН=4,0. Раствор стерильно фильтруютчерез пластины ЕКБ, разливают во флаконы так, чтобы в каждом содержалосьпо 10 мг вещества, и лиофилизируют.Выход активного вещества из исходного сырья составит 0,005 кг. ,4 ОП р и м е р 2. Берут лимфатическиеузлы животных, промывают и обрабатывают ацетоном с температурой 3 Св течение 18 ч. Лцетон удаляют иосырье замораживают при=-20 С. 45Берут 1 кг лимфатических узлов,измельчают. Измельченное сырье загружают в реактор с мешалкой и заливают10 л 3%-ного раствора уксусной кислоты, туда же добавляют 0,01 кг хлорисОтого цинка и экстрагируют 28 ч, перемешивая 1 ч через каждые 8 ч.По окончании экстракции субстратсливают и центрифугируют в течение20 мип со скоростью 3000 об/мин, над осадочную жидкость декантируют,и ней добавляют ацетон при 18 Св соотношении 1:10 (1 часть элюата и 10 частей ацетона), перемешиваюти формируют осадок в течение 18 ч.Выпавший осадок высушивают фильтрованием, измельчают и растворяют0,02 кг в 1 л воды при рН=6,0 (экстрагент - 1%-ный раствор уксусной кислоты). Экстракцию проводят 3 ч принепрерывном перемешивании, фильтруют,После удаления балластных веществв прозрачный раствор добавляют уксусной кислоты до рН=4,0. Раствор,стерильно фильтруют через пластиныЕКЯ, разливают во флаконы так, чтобыв каждом содержалось по 10 мг вещества, и лиофилизируют. Выход активноговещества из исходного сырья составляет 0,01 кг.П р и м е р 3, Подготавливаютсырье - лимфатические узлы животных,и обрабатывают его ацетоном с температурой 1 С 24 ч, ацетон удаляют изамораживают при =-20 С. Берут 10 кглимфатических узлов, измельчают.Измельченное сырье помещают в реактор с мешалкой и заливают 100 л водного раствора.3%-ной уксусной кислоты, добавляют 0,1 кг хлористого цинка и экстрагируют 36 ч при беспрерывном перемещивании в течение часачерез каждые 8 ч,По окончании экстрагирования субстрат отделяют и центрифугируют егов течение 20 мин со скоростью3000 об/мин, Надосадочную жидкостьдекантируют, к ней добавляют ацетонв соотношении 1: 10 (на 1 часть элюата 10 частей ацетона), перемешиваюти формируют осадок 24 ч. Выпавшийосадок в количестве 0,2 кг высушивают Фильтрованием, измельчают и растворяют в 2 литрах воды, подкисленной,до рН=7,0 уксусной кислотой,1Проводят экстракцию при непрерывном перемешивании 3 ч, удаляютбалластные вещества путем фильтрации.В отфильтрованный раствор добавляютуксусной кислоты до рН=4,0. Растворстерильно фильтруют через пластины ЕКБ, разливают во Флаконы по10 мг в каждый и лиофилизируют. Выход активного вещества, полученногопредлагаемым способом, относительноиспользуемого сырья составит 0,1 кг.Биологическую активность вещества,выделенного из лимфатических узлов,оценивают следующим образом.Животных, морских свинок, самцоввесом 200-250 г разделяют на 2 груп5 Тираж 721 ПодписноИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий5, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 П "Патент", г.ужгород, ул.Проектна Фили 3 11 пы - опытную и контрольную по 25 штук в каждой. Опытным животным вводят по 1 мг биологически активного вещества, полученного из лимфатических узлов, растворенного в 0,5 мл физиологического раствора. Вещество вводят внутримышечно в течение 4 дней ежедневно. Контрольным животным вводят по 0,5 мл физиологического раствора по аналогичной схеме. На пятые сутки всех животных забивают, выделяют тимус, селезенку и лимфатические узлы, определяют в них удельную концентрацию лимфацитов (удельная концентрация - это количество клеток в тысячах на 1 мг ткани).Результаты исследований отражены в таблице. Введение вещества, полученногоиз лимфатических узлов, приводитк значительному увеличению лимфоцитовво всех органах иммунной системы5 в среднем в 1,5-2 раза. Вещество, полученное иэ лимфатических узлов, представляет собой 1 О комплекс низкомолекулярных белковыхвеществ. При изучении токсичности обнаружено, что вещество не обладает в терапевтических дозах нобочнюю эффектом. Вещество может быть исполь зовано в качестве иммуностимуляторас высокой биологической активностью.

Смотреть

Заявка

3588257, 03.05.1983

ЛЕНИНГРАДСКОЕ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ МЯСНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ ИМ. С. М. КИРОВА

ХАВИНСОН ВЛАДИМИР ХАЦКЕЛЕВИЧ, МОРОЗОВ ВЯЧЕСЛАВ ГРИГОРЬЕВИЧ, СИДОРОВА НИНА ДМИТРИЕВНА, КОНСТАНТИНОВ ВЛАДИМИР ЛЕОНИДОВИЧ, ЧАЙКА ОЛЕГ ВАСИЛЬЕВИЧ, КНЯЗЕВА СЕРАФИМА ПЕТРОВНА

МПК / Метки

МПК: A61K 35/30

Метки: иммуностимулятора

Опубликовано: 30.10.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1187824-sposob-polucheniya-immunostimulyatora.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения иммуностимулятора</a>

Похожие патенты