Питательная среда для культивирования l-форм микробактерий туберкулеза

Союз Советск ихСоциалистическихРеспубпик О П И С А Н И Ец 908794ИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ 1. - ФОРМ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА. Лююоннокислый натрииЛимоннокислое железо 10,0-25,0 001 02 0,003 - 0,006 аммиачноеФосфорнокислый калийоднозамеще нныйСернокислая магнезияГлицеринБураМалахитовая зеленьБриллиантовая зеленьЭтиловый спиртАгар - агарВодаП р и м е р , 11 риготпнпсние 0,01 - 0,20,02 - 0,620,1-0,30,0002 - 0,00050 005 - 0 0150,01-0,050,01 - 0,050,25-0,4Остальное Изобретение относится к микробиологиии касается питательных сред для выращивания1:форм различных видов микобактерий.Известна питательная среда для культивирования 1:форм микобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахарозу,. нативную сыво.ротку крови, лимоннокислый натрий, лимоннокнслое железо аммиачное, минеральные соли,агар агар н воду 1.Однако известная среда не обеспечивает10быстрого роста Е-форм микобактерий туберку.леза,Цель изобретения - ускорение роста деформмикобактерий туберкулеза.Поставленная цель достигается тем, что пита 1тельная среда для культивирования 1-форммикобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахароэу, нативную сыворотку крови,лимоннокислый натрий, лимоннокислое железоаммиачное, минеральные соли, агар-агар и воду,дополнительно содержит глицерин, буру, малахитовую зелень, бриллиантовую зелень, этиловыйспирт 96, в качестве источника азота онасодержит глнкокол и алании, в качестве минеральных солей - фосфорнокислый калийоднозамещенный н сернокислую магнезию, приследующем количественном соотношении компонентов, вес.%:3 908794Для приготовления одного 1 л питательнойсреды берут слсцуюцие навески ингредиентовпо рацеиу:Калий фосфорнокислыйоднозамешенный, г 1,0 5Сернокислая магнезия, г 3,0Лимоннокислый нагрий, г 1,0Лимоннокислое железоаммиачное, г 0,04Глнкокол, г 0,7 10Алании, г 0,2Глицсрш, г 2,0Бура, г 0,003Малахиговая зелень, г 0,1Бриллиантовая зелень, гЭ гнлоный спирт 96, г 0,3Агар-агар, г 3,0Сахароза, г 200,0Натианая сыворотка, мл 175Вода До 1 л ОНавескн буры малахитовой и бриллиантовойзелени предварительно растворяют в 0,3 млэтилового спирта, добавляют 2,0 мл глицеринаи тщательно смешивают. Полученный такимобразом раствор бактерицидных веществ 5смешивают с раствором остальных ингредиен.тов, предварительно растворенных в 820 млподогретой дистиллированной воды, и автоклави.Руют при 1,5 атм 1 мин.Приготовление рабочей среды,К 825 мл среды - заготовки стерильно до.бавляют 175 мл нативной сыворотки крупногорогатого скота или лошади, тщательно переме.шивают и разливают по 5 мл в стерильныепробирки,Хранение и транспортировку проводят вгерметично закупоренных пробирках притемпературе от 0 до +22 С до 3 - 4 мес.Результаты испытаний различных питательных сред для 1:форм микобактерий представле.ны в таблице.40 Питательные среды состава Показатель изве ного аемого максим аль. 45 ог риготовление Перед ис. Заблаговременнопользоваем Сроки хранения, недель 3 - .4 Температура хранения, ьС 0-5 Сроки роста Ьколоний, сутштамм БЦЖ 20 штамм НзтРу 25 2 16 0 - 2 6 14 0 18 15 9Продолжение таблицы Питательные среды состава Показатель предлагаемого извест ного макси. мини- опти маль маль.ного ного мального Высеваемость,% 2 18 20 19 Количествопроростов, % 13 12 1 О 32 Использование предлагаемой питательной среды позволяет ускорить рост колоний 1 форм на 4 - 7 дней, уменьшить количество проростов микрофлорой загрязнения в 3,8 раза и повысить высеваемость форм из патологического материала на 60%.Формула изобретенияПитательная среда для культивирования форм микобактерий туберкулеза, содержащая источник азота, сахарозу, нативную сыворотку крови, лимоннокислый натрий, лиьгоннокислое железо аммиачное, минеральные соли, агар-агар и воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью ускорения роста -форм мнкобакте. рий, она дополнительно содержит глицерин, буру, малахитовую зелень, бриллиантовую зелень, этиловый спирт 96, в качестве источника азота она содержит гликокол и алании, в качестве минеральных солей - фосфорно- кислый калий однозамешенный и сернокислую магнезию, при следующем количественном соотношении компонентов, весЯ:Глнкокол 0,001 - О, 5Алании 0,0025 - 0,03Сахароза 18,0 - 22,0Нативная сывороткакрови 10,0 - 25,0Лимоннокнслый натрий 0,01 - 0,2Лимоннокислое железо 0,003 - 0,006 аммиачноефосфорнокисчый калийоднозамешенныйСернокислая магнезияГлицерин 0,01 - 0,20,02 - 0,620,1-0,30,0002 - 0,0000,005 - 0,0150,01 - 0,050,01 - 0,050,25 - 0,4Остальноеации;ри экспертизелк А. В. Часто ураалахитовая зеленьриллнантовая зеленьвый спиртагар ЭтилоАгар -Вода сточник прин тые во внимание и рожкова И. Р., Во1:форм мнкобакт Д индукции нод влия с другим У 9, 197 ии туберкулезаего сочетаний нием циклосеринаи препаратами. - "2,итибиотикн".,