Способ обнаружения ультрамелких форм микобактерий туберкулеза

ЕНИЯ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ ОПИСАНИЕ ИЭОБР А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) Голышевская В.И. Изменчивостьмикобактериальной популяции в процессе леченйя экспериментальногодеструктивного туберкулеза легких.Автореф.дис.докт.мед.наук. М, 1984,(54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ УЛЬТРАМЕЛКИХФОРМ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА(з 4 С 12 Я 1/04//(С 12 Я 1/04, С 12 К 1;32) ской микробиологии и может быть использовано в диагностик- туберкулеза.Цель изобретения - повышение точностии упрощение способа. Сущность способа сводится к тому, что исследуемыйматериал гомогенизируют, вносят вкапсулу, снабженную полупроницаемоймембраной. Капсулу с гомогенатомпомещают в толщу полужидкой питательной среды, предназначенной для выращивания микобактерий, Ультрамелкиеформы фильтруются через мембрану впитательную среду, о чем свидетельствует характерный рост в толще среды внекапсулы. Точность способа повышаетсяэа счет снижения потерь ультрамелкихформ в процессе фильтрации. 1 табл.Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в диагностике туберкулеза,Цель изобретения - повышение точ"5ности и упрощение способа.Способ иллюстрируется следующимпримером.П р и м е р. Экспериментальныйтуберкулез воспроизводят у морскихсвинок путем подкожного введения вправую паховую область 40-дневнойкультуры микобактерий туберкулеза,штамм Воу, из расчета 0,01 мг/кгмассы животного. Животных вскрывают,производят макроскопический осмотрвнутренних органов и забор легочнойткани для бактериологических исследований,Забранный кусочек легкого (массой,0,1-0,2 г) гомогенизируют в физиоло"гическом растворе и помещают в стезрильную капсулу объемом 0,5 смодна из стенок которой образованамембранным фильтром с диаметром пор 250,23 мкм, Капсулу погружают в полужидкую питательную среду Икольниковой и инкубируют при 37 С в течение3 мес. 0 наличии ультрамелких форммакобактерий туберкулеза в патологическом материале судят по появляюще"муся росту в толще питательной средывне капсулы.Через 10-12 дней после посева вучастке среды прилегающему к мембран"35ному Фильтру, отмечалосьпомутнениесреды, которое имело вид дымки,струящейся в толще питательной среды,С течением времени оптическая плотность помутневшего участка среды 40возрастала.Обнаружение ультрамелких форммикобактерий позволяет диагностировать туберкулез в сомнительных случаях, когда у больных не обнаруженыбактериальные формы возбудителя,контролировать эффективность антибактериальной терапии в случаях обезбациливания (в мокроте отсутствуютбактериальные формы) как в процессе лечения, так и после епо окончания,расценивать их присутствие послеокончания лечения как дополнительныйкритерий в прогнозировании степенивероятности обострения или рецидиваболезни, что в свою очередь требуетпроведения дополнительных профилактических мероприятий.Результаты исследования мокроты49 больных туберкулезом легких пред-ставлены в таблице,1Проведенными исследованиями установлено, что вгруппе ультрамелкие формы возбудителя обнаружены у18, а бактериальные у 10 из 27 обследованных. Во 11 группе ультрамел-кие Формы обнаружены у 10 из 22 обследованных, а бактериальные фактически отсутствуют, так как посевы натвердые питательные среды положительных результатов не дали,Кроме того, ультрамелкие Формывыявлены во всех случаях присутствияв мокроте бактериальных Форм.Таким образом, результаты прове-,денных исследований свидетельствуюто том, что предлагаемый способ имеетпрактическое применение и может бытьиспользован в качестве дополнительного критерия диагностики, оценкиактивности туберкулезного процессаи эффективности проводимого лечения.Формула и з о б р е т е н и яСпособ обнаружения ультрамелких форм микобактерий туберкулеза, включающий гомогенизацию и Фильтрацию исследуемого материала, культивирование фильтрата в питательной среде, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, фильтрацию и культивирование осуществляют одновременно путем внесения гомогената в капсулу, снабженную полупроницаемой мембраной, и помещения последней в толщу полужидкой питательной среды.1388426 Методы выявления микобактерий Количест"во больПодгруппы больГруппыбольных Культуральныеметоды Бактериоскопия. ных ных свето- люминес лев. иен.финн.2 вая центная 10 Ф8 В 18 10 1 О 10 27 Всего 13 10 Всего Составитель А.Завадская Редактор Н,Киштулинец Техред А.Кравчук Корректор А.Тяско Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 1(бацило- Авыделители) Б 11(небаци- Алярные)Б Заказ 2549/28 Тираж 520 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5