Способ консервирования спермы рыб

Согоэ Советскик Социалистических РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ИТЕЛЬСТВУ и 786947(2".) Заявлено 040179 (21) 2710095/28" 13с присоединением заявки Но(23) ПриоритетОпубликовано 151280, Бюллетень М 46Дата опубликования описания 15,1280 51)М Кдз А 01 К 61/00 Государственный комитет СССР оо делам изобретеннй и открытийИнститут проблем криобиологии и крномедициныАН УССР(54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ СПЕРМЫ РЫБ 10 Изобретение относится к рыборазведению, а именно к способу консервирования спермы рыб, в частности осетровых, и может быть использовано при воспроизводстве и селекции новых пород рыб,Известен способ консервирования спермы рыб, заключающийся в смешивании ее с защитным раствором, содержащим трис- НСг, буфер, яичный желток и криопротектор - диметилсульфоксид, и в последующем замораживании (1(. Данный способ имеет недостаток, 15 состоящий в том, что при замораживании гибнет большая часть клеток (до 30-40), вследствие чего нельзя использовать для замораживания сперму с активностью ниже 80. 20Целью изобретения является повышение сохранности клеток в процессе консервирования и повьаггение производительности процесса замораживания.25Для достижения этой цели в защитный раствор вводят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание оуществляют сначала до минус 35-45 С со скоростью 30 2снижения 8-12 оС/мин, а затем до минус 196 оС со скоростью 130-150 С/мин,Кроме того, компоненты защитногораствора берут в следующем соотношении, : диметилсульфоксид 18-25,О, 1 н,трис- НСс буфер 65-75, яичныйжелток 7-10, кристаллический иодидсеребра 0,004-0,0008.Способ осуществляют следующимобразом,Сперму разбавляют в соотношении1 г 1 раствором, содержащим трис- НС 6буфер, яичный желток, криопротектор(диметилсульфокснд) и тонкодисперсный кристаллический иодид серебра.После этого разбавленную сперму разливают в ампулы и помещают в замораживающую установку для охлаждения соскоростью 10-120 С/мин до минус 3545 оС, а затем со скоростью 130150 оС/мин до температуры храненияминус 196 оС,П р и м е р . От самца севрюгипосле гипофизарной инъекции получают сперму с начальной активностьюне ниже 70. К 100 мл спермы приливают 100 мл раствора, состоящего из32,5 мл раствора триса (24,33 г .трис-(оксиметил-аминометана в1000 мл Н О),32,5 мл 0,1 н. Н(8 10 ма786947 20 Составитель Е.ЛебедюкРедактор Т.Кинь Техред А.Щепанская КорректорГ.Решетник Заказ 8204/1 Тираж 723 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Иосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 желтка куриного яйца, 2,5 мл диметилсульфоксида,и 0,0004 г тонкодисперсного кристаллического иодида серебра,После перемешивания сперму разливают по ампулам емкостью 1 мл, которыепомещают в замораживающую установкуи охлаждают со скоростью 10 С/мин доминус 40 С, а затем со скоростью150 С/мин до температуры хранения минус 196 С,Технико-экономический эффект способа заключается в повышении сохраннос ти клеток при замораживании активность деконсервированной спермь 1 повышается в 1,4 раза), кроме того, длязамораживания может быть использованасперма с исходной активностью 70. 15При данном способе консервированияповышается производительность работы,так как длительность процесса замораживания сокращается на 40 эа счетвысоких скоростей охлаждения,Формула изобретения1, Способ консервирования спермырыб путем смешивания ее с защитнымраствором, содержащим трис- НС 0 буфер, яичный желток и криопротектордиметилсульфоксид,и последующего замораживания,о т л и ч а ю щ и й с я тем,что,с целью повышения сохранности клеток в процессе консервирования и повышенияпроизводительности замораживания; в защитный раствор вво" дят тонкодисперсный кристаллический иодид серебра, при этом замораживание осуществляют сначала до минус 35-45 ос со скоростью снижения 8-12 С/мин, ао затем до минус 196 ОС со скоростью снижения 130-150 С/мин.2, Способ по и. 1, о т л и ч а ющ и. й с я тем, что компоненты защитного раствора берут в следующем соотношении, Ъ:Диметилсульфоксид 18-250,1 н.трис-НСВ буфер 65-75Яичный желток 7-10Кристаллическийиодид серебра О, 004-0, 0008.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Лвторское свидетельство СССР Р 591164, кл, А 01 К 61/00, 1976.