Питательная среда для идентификации

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯеь ПАеЕИУУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик(З 2) 03,05,76 С 12 К 1/06 Гюеударственный комнтет СССР но делам нэобретеннй и еткрытнй(72) Авторы изобретения Иностранцы, Грегори Дуглас РодгерсЧарльз Мейер(США) жеймс Вэйн Лэнхэм и МайклЗаявите ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИЕЗСНЕВ 1 СН 1 А СОИ2 0,75 - 0,05 -Сапони бтто 1,5 1,5 4,5 5 (мл) п-Кумаровая кисДигидробензойнаякислотаЖелчные солиАнилиновый голВода 0,051,5 -,15 - 3Остальн 5,0 - 6,0 4,0 - 6,0 4,0 - 6,0 0,75 - 1,25 Изобретение относится к области микро логии и может быть использовано для идентификации микроорганизмов.Известна питательная среда для идентификации ЕвсЬег 1 сЬ 1 а со 1, содержащая питательную основу, лактозу, индикатор, ингибитор грамположительной микрофлоры и воду 11,Однако известная среда не обеспечивает быс ой иденти икации ЕвсЬег 1 сЬ 1 а со 11. тр фЦелью изобретения является ускорение :идентификации ЕвсЬег 1 стта со 1.Эта цель достигается тем, что среда дополнительно содержит арабннозу, п-кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, экстракт, в качестве питательной основы она содержит гелизат, в качестве индикатора - анилиновый голубой, а в качестве ингибитора грам-положительной микрофлоры - желчные соли при следующем соотношении компонентов, г/л: 20ГелизатЛактозаАрабинозаДрожжевой экстракт Предлагаемая среда содержит источники са. хара, которые избирательно ферментируются бактериями с образованием кислот, н также содержит чувствительный к рН индикатор ани. липовый голубой, цвет которого переходит в голубой в кислой. среде. Среда также содержит ингибиторы для друтих грам-отрицательных ор. ганиэмов, главным образом К 1 еЬв 1 е 11 а. Комбиюция ингибиторов содержит кумаринавую кислоту, 3,4-дигидроксибензойную кислоту и салоник,Эта комбинация ингибирует К 1 еЬв 1 е 1 а иозволяет расти ЕвсЬег 1 сЬ 1 а со 1,Среда содержит также поверхностно-активныеещества и ингибиторы для грам-положительныхрганизмов.35 0,05 -1,51,5 - 4,515 - 35 (мл)Остальное. ЦНИИПИ Заказ 3247/57 Тираж 522 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 3 74Для предлагаемой среды применяют такжеисточники питательных веществ, способствую.,щнх росту ЕасЬегсЬа со, биологическийиндикатор рН, реагирующий на кислоту,образуемую Е,со 1, и комбинацию и-кумаровойкислоты, саионина и 3,4-дигидроксибензойнойкислоты для ингибирования роста КеЬз 1 е 11 а, атакже другие ингибиторы для ингибированияроста грамположительных микроорганизмов.Большинство штаммов Е.со 1 ферментируют лактозу с образованием кислоты, а-арабинозу применяют в детектирующих средах.Подходящим заменителем гелизата являетсятриптикаэа, финтон и полипептон.Смеси желчных солей применяют для ингибирования роста грам-пложительных организмов. Эти смеси содержат экстрактивныевещества желчи и являются смесью поверхностно-активных веществ, ингибирующихграм-положительные организмы. Другим подходящим поверхностно-активным веществомявляется таурохолевая кислота.Комбинация 3,4-дигидроксибензойной кислоты, сапонина и п-кумаровой кислоты применяют для ингибированйя роста К 1 еЬа е 1 а идругих подобных Е.со 1 организмов, Можетприменяться о- и м-кумаровая кислоты.Предпочтительным индикатором для средыявляется анилиновый голубой.В качестве источника витаминов добавляютдрожжевой или другой подходящий биологический экстракт в количестве 0,95-1,05 г/л.Перед применением среды ее рН должнобыть 7,5,Среду приготавливают следуиицим образом.Смешивают 0,2 г п-кумаровой кислоты,0,2 г 3,4-дигидроксибензойной кислоты с 3 мл1 н. ЙаОН/100 мл среды и 1/4 требуемогообъема дистиллированной воды и получают100 мл среды двойнойкрепости. Эту смесьнагревают до растворения всех твердых веществ. Раствор доводят до 95 мл дистиллированной водой и к нему добавляют 1,0 ггелизата, 1,0 г лактозы, 1,0 г 1.-арабинозы,0,6 г смеси желчных солей и 0,2 г дрожжевогоэкстракта, рН устанавливают 6,2 и добавляют5 мл индикатора - восстановленного анилино.вого голубого с 0,2 г сапонина. Проверяют рНи доводят до 7,2 добавлением основания.Раствор стерилизуют фильтрованием, помещаютв стерильную емкость и метят.805 аПитательную среду применяют следующимобразом.Среду загружают в углубления карточек дляанализа мочи, сушат при температуре нижео0 С и карточки покрывают для защиты среды.Углубления заполняют средой наполовину ихобъема. Затем, когда остающийся объем углуб-лений заполняют образцом мочи, то средаснова гидратируется до нормальной однократной10 концентрации крепости, при которой и работает,Эта среда может обнаруживать концентрацииЕ;со 1 в 10 клеток/мл за 12 ч, Более долгоевремя требуется при более низких концентрациях,Предлагаемая среда ускоряет идентификациюЕзсЬегсЬа со . Формула изобретения 20Питательная среда для идентификации Евсее гсЬа со 1, содержащая питательную основу,лактозу, индикатор, ингибитор грам.положительной микрофлоры и воду, о т л и ч а ю щ а25 я с я тем, что, с целью ускорения идеитификации ЕасЛегсЬа со 1, она дополнительно содержит арабинозу, п.кумаровую кислоту, дигидроксибензойную кислоту, сапонин, дрожжевойэкстракт, в качестве питательной основы онасодержит гелизат, в качестве индикатора -анилиновый голубой, а в качестве ингибитораграм-положительной микрофлоры - желчныесоли при следующем соотношении компонентов, г/л:Гелизат 5,0 - 6,0Лактоза 4,0 - 6,0Арабиноза 4,0 - 6,0Дрожжевой экстракт 0,75 - 1,25С алонии 0,75 -1,25п-Кумаровая кислота 0,05 - 1,5ДигидроксибензойнаякислотаЖелчные солиАнилиновый голубойВодаИсточники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Справочник по микробиологическими вирусологическим методам исследования.Под ред, М, О, Биргера. М., "Медпина", 1973,50