Способ обнаружения антител

)М.К А 61 соединением заявки Гкударатаеевб аампат СССР аа делам ааебретекк и открытей(71) Заяви нтральны ский институт научно-исспед эпидеми оп оги и 54) СПОСОБ ОБНАР ИЯ АНТИТ эритро- сфатно-бу дварительную ом проводят обес- стовернос Изобретение относится к области медицины, а именно вирусологии,Известен способ обнаружения антител к гемагглютининам арбовирусов путем предварительной обработки исследуемой сыворотки взвесыо каолина в буферном растворе и гусиными эритроцитами с лоследующи м соединением обработанной сыворотки с. раствором гемаггнютинина и взвесьто эритроцитов и учетом резуль- татов реакции Я .Однако известный способ не обеспечивает достаточной воспроизводимости и достоверности результатов.Целью изобретения ,являетсяпечение воснроизводнмости и доти способа.Это достигается тем, что по предлагаемому способу обработку сыворотки каолином проводят в кислом фосфатнобуферном растворе, затем обработанную сыворотку и гемаггпютинин разводят трис-борат-трилон Б буферным раствором и полученные разведения соединяют со взвесью формалинизированныхцитов нескольких доноров в фоферном растворе.Кроме того, пре обработ. ку сыворотки каолин при5 рН 5,8 6,4Используют фор мали низированныеэритроциты нескольких гусей (смесь)в качестве стандартизованного стабильного индикаторного компонента серолота гических реакций - вирусной гемагглютинации и ее торможения.Раствор для титрованяя сыворотки крски и вирусного гЕмаггпютинина, взвесигусиных формалинизированных эритроцитов для удаления антител к эритроцитамгусей яз сыворотки готовят на основеборатно.-буферного коммерческого раствора путем уменьшения концентрациисолей и добавления основного триза, борной кислоты и трилона Б в раствор дляприготовления взвеси формалинизированнь 1 х эритроцитов гусей, участвуюших всерологических реакциях, и для приготовЭ 6460 евина взвеси каолина, используемой для удаления неспецифических ингибитобов вируеной гемагглютйнации иэ сыворотокФосфатно-буферный, рН;5 3 и рН,4 соответственно.П р и м е р, Испытуемую сыворотку разводят 0,85%-ным раствором хлорида натрия (1:5-1:10), соединяют с 25%-ной взаесью каолина в 1/15 М фосФатио-буферном растворе рН 6,4 в ооо в нощении объемов 1:5 и оставляют на 20 мин нри комнатной температуре со встряхиванием, затем центрифурйруют, а надосадочную жидкость соединяют с равным объемом 10%-ной взвеси обмытых формалйнизированных эритроцитов гусей в трио-борами-трнлон Б буферном растворе рН 9,0. После контакта на холоду пробы центрифугируют, надосадочные жидкости титруют в трис-борат-три 2 О лон Б буферном растворе рН 9,0, затем к каждому разведенао добавляют равные объемы рабочего раствора (4-8 ГЕ) вирусного гемагглютинина, например25 , возбудителя клещевого энцефалита, приготовленного на том же растворе, смеси оставапот для взаимодействия на холоду до следующего дня, затем в каждую из них вйосят 0,5%-ную взвесь отмытых формалинизированных эритроцитов Гусей в фосфатно-буферном растворе рН 5,3, О наличии антител свидетельствовало предотвращение гемагглютинации, учтенное через 1-1,5 ч после внесения35 вритроцитов. Предлагае мый способ обеспечивает воспроиэводимрсть и достоверность результатов.Формула изобретения1. Способ обнаружения антител к гемагглютининам арбовирусов .путем предварительной обработки исследуемой сыворотки вэвесыо каолина в буферном растворе и гусиными эритроцитами с "последующим соединением обработанной Сыворотки с раствором гемагглютинина и взвесьюэритроцитов и учетом результатов реакции, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью обеспечения воспроизводимости и достоверности способа, обработку сыворотки каолином проводят в кислом фосфатнобуферном растворе, затем обработанную сыворотку и гемагглютинин разводят трио-морат-трилон Б буферным раствором и полученные, разведения соединяют со вэвесыо формалинизированных эритроцитов нескольких доноров в фосфатнобуферном растворе.2. Способ по п,1, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что предварительную обработку сыворотки каолином проводят при рН 5,8-6,4.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Временное МРТУ, утв. КВС МЗ СССР, 1973.Составитель С. МалютинаРедактор Л, Баталова Техреа М. Борисова КорректорМ. ДемчикЗаказ 185/3 . Тираж 6 1 Подписное ЫНИИПИ Государственного комитете СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва, ЖРаушская наб., д, 4/5 Филиал П П Патент", г. жгород, ул. Проектная , 4