Способ получения рибонуклеозид-5-три фосфатов или сахарофосфатов

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СоветскииСоциапистицескииРеспубпин(22) За явлено 06,01.7 092898/О присоединением заявкисудоостоенный номитеавета Министров СССРпа делам иэобретенийи отирытий,Бюллетеньсания 06.09,76 2) Авторы С, Э. Ансберга, А. М. Ирген, изобретения Брод, В. Р. Кестере и В. П, К Латвийский филиал Всесоюзного ордена Трудового Красного Знаменинаучно-исследовательского института химических реактивови особо чистых химических веществ 71) Заявит РИБОНУКЛЕОЗИД-ТРИАРСфОСфАТОВ ТОВ 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕН ИЛИ СИзобретение относванному способу по-5 -трифосфатов и сприменяемых в биолне. 2 С и рН среды совершенство- нуклеозидов, широко ике и медиц теэа протекает6 5-7,5.Контроль з снижелучения рибо ахарофосфатогни, генет процессом ведется инеорганического фтепень ос о или ов уклеозидфосфатотранен метод бвания нуклеоэидо(окислительноеслучае биосинтеом ферментов и В производстве и харофосфатов распрос ческого фосфорилиро ле озидмонофосфа тов лирование), В атом ществляется катализ пекарских дрожжей используют голуол.и са ологи в и нукосфори-э осу вных икоторых я плазмолиза ледят по способа оде ржа является и влече кта 1, н способ х за процессом ия неорганичес трудоемким ит за собой сниж го фосолгимние вы онуклеоэид биохимиполучения риб ахарофосфатов анием сахаров ми системами осфатов и осфоридир ферментн фосфорил ические и их пр орилирования при ос 6,50 до 6,55 ввс дичество пивных дрож В процессе биофос ны ирующим агентом являют. фосфаты. Процесс биосингановке снижения дят дополнительн В атих снижению фора, что процессом хода проду Известеиию количества осфора в среде, выход (с ф ф р р ания) 75-82% 31.В известном способе, однако, наблюдается снижение выхода целевого продукта за счет недостаточного контроля процесса биосинтеэа, гак как возможны потери при разложении целевых продуктов.Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта и обеспечение контроля и регулирования направдейного бис синтеза.Биосинтез рибонуклеозид-трифосфатов или сахарофосфатов регулируется прибавлением дополнительного количества биокагалиэатора (пивные дрожжи) и о ходе реакции биосинтеэа судят по изменениям рН среды, что контролируется автоматически рН-метром,35жей, оавпое объема среды, и прекрашают процесс при остановке повышения рН,Предлагаемый способ дает возможностьповысить выход целевых продуктов до 9899% (степень биофосфорилирования).П р и м е р 1. 200 г аденозина растворяют в 7,6 л воды. К раствору прибавляют 074 кг неорганических фосфатовКН РО:(рН среды 7,0 при 37 оС),За ходом фосфорилирования следят по изменению рН автоматической регистрациейрН-ме тром., Реакцию фосфорилирования прекращают при рН среды 6,75,Для прекращения реакции прибавляют 2 кг трихлоруксусной кислоты при остановке повышеьия рН.Степень биофосфорилирования 98%. Выход 200 г аденозин-трифосфата.П р и м е р 2. 20 г натриевой соли цитидинмонофосфорной кислоты растворяют в 760 мл воды. К раствору прибавляют 63,8 г неорганических фосфатов КНРО 4.йй Н 7 ОР Н., О в соотношении 1:4, 1,44 г М С " б Я, О, 40 г сахарозы, 1 л пивных дрожжейи 60 млтолУола (РН сРеды 7,0 пРи 37 оС).За ходом фосфорилирования следят по изменению рН автоматической регистрацией рН=метром, Реакцию фосфорилирования прекращают при рН среды 6,75.Для прекращения реакции прибавляют 200 г трихлоруксусной кислоты при остановке,. повышения рН.Степень биофосфорилирования 90%. Вы= ход 15 г цитиднн- трифосфата.П р и м е р 3, 20 г йатриевой соли уридин-монофосфорной кислоты раствориют в 760 мл воды, К раствору прибавляют 98 94 г неорганических фосфа тов К Н РОе :МО. НРОв 11 И О в соотношении .1:4, 1 г КС 1 в 1 г ВЙ:ЬН Сй, 33,3 г сахарозы, 1 л пивных дрожжей 60 мл толуола (рН среды 7,0 при 37 оС).За ходом фосфорилирования следят по изменению рН автоматической регистрацией 4рН-метром, Реакцию фосфорилирования прекращают при рН среды 6,75,Для прекращения реакции прибавляют200 г трихлоруксусной кислоты при останонке повышение рН.Степень биофосфорилирования 90%. Выход 15 г уридин-трифосфата.П р и м е р 4. 110 г сахарозы, 33 гнеорганических фосфатов КН РО: Ка ЯРО4ЫН О в соотношении 1:4, 5 г Мдб 610,395 г КС 1 растворяют в 60 мл воды, прибавляют 200 г пивных дрожжей и 27 млтолуола,Биофосфорилирование проводят при 37 оСи рН среды 7,0.За ходом фосфорилирования следят по изменению рН автоматической регистрациейрН-метром. Для прекращения реакции прибавляют 200 г трихлоруксусной кислотыпрн оотвновие повышения рН.фф Степень фосфорилирования 95%, Выход110 г бариевой соли 1,6-дифосфата фруктозы,Формула изобре гения МСпособ получения рибонуклеозид-трифосфатов или сахарофосфатов путем биохимического фосфорилирования сахаров илиих производных в присутствии ферментныхсистем пивных дрожжей при 35-38 С и рН6,9-7,0 с последующим выделением целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения выхода и обеспечения контроля и регулирования направленного биосинтеза, в процессе биофосфорилирования при остановке снижения рН в пределах от 6,50 до 6,55 дополнительно вводятпивные дрожжи в количестве -. объемабсреды и прекращают процесс при остановкеповышения рН,Источники информации, принятые во внимание при экспертизе изобретения:1. Патент США2174475 в кл,195-12,1937 г.45 2, Авторсксе свидетельство СССР395082, М.Кл, А 61 К 19/ООи 1973 г.3. Патент США Ь 3138539,кл. 195-28,23,06,1964 г. (прототип), СоставительЧерноваРедактор Д, Пинчук Техред И, Ковав 1 Корректор А. Гриценкоовине,3575 г 318 Тирвы 575 Подписное ЫНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по дедам изобретений и открытий 113035, Москва, ЖРаушская наб., д, 4/5 г Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4.