Способ получения дезоксирибонуклеиновой кислоты
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
ОП ИЕ 11ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 8789 У Союз Советскик циалистических Республик(5) М. Кл. С 07 д 7/02 заявкирисоединени овета Министров СССРло делам изобретений и открытий публиковано 15,10,75, Бюллетень38Дата опубликования описания 19.04.76 ДК 615,739.6. Б. Шагалов, Ю. П. Вайнберг, И. Г, Аносова, О. И Т. С. Рябоченко, Л. С, Ермилина, А. С, Лоренс и ПИнститут биофизики ябошапко(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЪВУдаРс еен"ый комитет (23) ПриоритетС Изобретение относится к технологии полу.чения биохимических препаратов,Известен способ получения дезоксирибонуклеиновой кислоты из молок рыб, по которомумолоки последовательно гомогенизируют вприсутствии буфера и детергента, прогреваютпри 60 - 75 С 15 мин, охлаждают до 0 - 4 С,выдерживают 2 - 3 час при этой температуре,примесные белки осаждают хлороформом, адезоксирибонуклеиновую кислоту - этиловымспиртом, Однако известный способ являетсятрудоемким.По предлагаемому способу прогревание проводят в течение 1 - 4 час, а очистку осуществляют сорбцией реакционной массы на кизелыуре с последующей элюцией целевогопродукта.Способ осуществляют следующим образом.Г 1 р и м е р. 100 г замороженных молок рыбгомогенизируют в 500 мл холодного цитратносолевого раствора в течение 3 мин при8000 об/мин. Гомогенат центрифупируют нацентрифуге ПЛРв течение 20 мин при2500 об/мин и температуре - 3 С. Надосадочную жидкость сливают, в осадке получаютядерный материал.Осадок ядерного материала переносят вмакроизмельчитель тканей РТ, заливают350 мл цитратно-солевого раствора и гомогенизируют 1 мин при 4000 об/мин, Гомогенат помещают в 10 л-ыи аппарат, добавляют при перемешивании механической мешалкой 2,4 л цитратно-солевого раствора и 680 мл 6%-ного раствора додецилсульфата натрия, не прекра щая перемешивания, нагревают до 60 С и выдерживают при этой температуре 1,5 часа. По окончании выдержки при работающей мешалке добавляют 4 л цитратно-солевой смеси, содержащей 29% поваренной соли и 4,8% 10 трехзамещенного цитрата натрия и продолжают помешивание еще 1,5 часа при 60 С. По истечении этого времени массу из аппарата сливают в кристаллизатор и охлаждают до - 2 - 4 С.15 В смеситель емкостью 30 л помещают4,8 кг кизельгура, охлажденную массу с предыдущей стадии, все перемешивают 3 мин так, чтобы вся охлажденная масса сорбировалась на кизельгур. Элюируют ДНК с ки зельгура 4 л цитратно-солевой смеси, содержащей 14,5% поваренной соли и 2,4% трехзамещенного нитрата натрия, при перемешивании в течение 30 мин. Отделяют элюат от кизельгура фильтрацией на 50 нутч-фильтре 25 через слой бальтинга и фильтровальной бумаги, Элюацию повторяют 3 раза, элюаты объединяют.В стакан помещают 1 л 96%-ного холодногоэтанола и приливают к нему 1 л элюата.30 Смесь перемешивают осторожным переливаСоставитель С. Малютина Техред О. Луговая Корректор О Тюрина Редактор Н. Коган Заказ 674/5 Изд,1874 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 13035, Москва, 5 К, Раушская наб д. 4/5Типография, пр Сапунова, 2 нием из одного стакана в другой до тех пор, пока не сформируется нитевидный осадок ДИК. Сгусток осадка пинцетом переносят в стакан с 50%-ным этанолом, дважды тщательно ополаскивают и помещают в сборник, предварительно заполненный 7%-ным этаноВыход ДНК составляет 3 г от загрузки (3% от веса загруженных молок),Характеристика ДНК,Молекулярный вес 15 10, содержание белка 1,5%, гиперхромный эффект 41%, ширина плавления 5,1. Способ получения дезоксирибонуклеиновойкислоты путем гомогенизации молок рыб, об работки детергентом и буферным раствором,прогревания реакционной массы при 60 - 70 С, выделения и очистки целевого продукта, отл и ч а ю щи й с я тем, что, с целью упрощения способа, прогревание проводят в течение 1 - 10 4 час, а очистку осуществляют сорбцией реакционной массы на кизельгуре с последующей элюцией целевого продукта.
СмотретьЗаявка
1974554, 07.12.1973
ИНСТИТУТ БИОФИЗИКИ
ШАГАЛОВ ЛЕВ БЕНИАМИНОВИЧ, ВАЙНБЕРГ ЮРИЙ ПЕТРОВИЧ, АНОСОВА ИДИЯ ГРИГОРЬЕВНА, РЯБОШАПКО ОЛЬГА ИЛЬИНИЧНА, РЯБОЧЕНКО ТАТЬЯНА СЕРГЕЕВНА, ЕРМИЛИНА ЛЮДМИЛА СТЕПАНОВНА, ЛОРЕНС АЛЕКСАНДР СЕРГЕЕВИЧ, КРАНЦ ПОЛИНА СЕМЕНОВНА
МПК / Метки
МПК: C07G 7/026
Метки: дезоксирибонуклеиновой, кислоты
Опубликовано: 15.10.1975
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-487897-sposob-polucheniya-dezoksiribonukleinovojj-kisloty.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения дезоксирибонуклеиновой кислоты</a>
Предыдущий патент: Способ получения пирофосфоновых кислот
Следующий патент: Резиновая смесь
Случайный патент: Способ определения химической стойкости стекла