Способ определения активности антитрипсина в сыворотке крови
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 474735
Автор: Карпицкий
Текст
) Заявлено 16.08.71 1) 1694984/28-1 с присоединением заявки осударствеииыи комитет(23) Приоритет Совета Министров СССРпо делам изобретений(71) Заявит рымский ме нскии институт СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ АНТИТРИПСИ В СЫВОРОТКЕ КРОВИсина определяют сле 15 Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинических и экспериментальных исследованиях.Известен способ определения активности антитрипсина путем инкубации трипсина с 5 исследуемой сывороткой, заключающийся в определении уменьшения трипсиновой активности по перевариванию казеина.С целью повышения специфичности и точности результатов, предложено неингибиро ванный после инкубации трипсин оттитровывать специфической иммунной прсципитирующей сывороткой.Активность антитрипдующим образом.Готовят раствор кристаллического трипсина на 0,85%-ном растворе МаС 1 в день определения, содержащий 500 мкг препарата в 1 мл, рН раствора 5,5 - 7,0; 0,3 мл исследуемой сыворотки вносят на дно обычных центрифуж ных пробирок, затем добавляют 0,2 мл раствора трипсина (100 мкг препарата), размешивают и инкубируют в термостате при 37 С 30 мин, Ставится три параллельные пробы. После инкубации пробирки извлекают из тер мостата и добавляют 0,4 мл специфической иммунной преципитирующей сыворотки, содержащей в 1 мл 0,54 мг белка антител. Иммунную сыворотку перед употреблением осветляют при 10000 д 10 мин, Количества добав ленной иммунной сыворотки колеблется в зависимости от количества белка антител в 1 мл.Оно должно быть таким, чтобы 100 мкг трипсина связывали все антитела, т, е. в зоне эквивалентности, Пробы инкубируют при 37 С 30 мин в термостате. Затем их переносят в холодильник (1 - 5 С) и выдерживают в течение суток.К о н т р о л ь 1. Вместо исследуемой сыворотки 0,2 мл раствора трипсина инкубируют с 0,3 мл 0,85%-ного раствора МаС 1, а затем проделывают те же операции, что и с опытной пробой, Ставится три параллельных контроля.К о и т р о л ь 2. К 0,4 мл иммунной сыворотки добавляют 0,5 мл 0,85%-ного раствора 1 чаС 1. Ставится два контроля. Спустя сутки пробы и контроли извлекают из холодильника, центрифугируют при 1500 - 2000 д 10 мин и отсасывают надосадочную жндкость. Образовавшийся преципитат отмывают от посторонних белков. Для этого во все пробы (опытные и контрольные) добавляют 0,85%-ный раствор КаС 1 в объеме реакций, Затем преципитат осторожно взбалтывают, чтобы не было комков. Снова центрифугпруют при 1500 - 2000 д 10 мин и отсасывают центрифугои, Осадки промывают два раза 0,85% -ным раствором ЫаС 1 и два раза в дистиллированной воде. Затем определяют количества белка по ЛОУРИ: в каждую пробирку добавля474735 Составитель С. МалютинаТехред 3. Тараненко Корректор Е. Рогайлина Редактор А,. Бер,Заказ 2314/1 О Изд.809 Тирак 902 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытии Москва, )К, Раушская наб., д. 4,5Типография, пр. Сапунова, 2 ют по 5 мл реактива для растворения преципитата, получаемого Вдень Опыта путсл смешивания 50 мл 2%-ного раствора К 1,СОз в 0,1 н. растворе КаОН и 1 мл 0,5%-ного раствора Сц 504 5 НзО в 1 /о-ной сегнетовой соли. Затем добавляют 2 мл 0,85%-ного раствора МаС через 10 мин 0,5 мл реактива Фолина. Окраска развивается через 30 мип. Фотометрирование производят на ФЭК-М при красном светофильтре.По полученным экстинциям определяют количество оставшегося неинкубированного трипсина в опытных пробах и количество прореагировавшего трипсина в контроле 1. Лктивность антптрипсина определяют поразности количества трппсина, прореагировавшего в контроле 1, где не было пнгибитора, и опытной пробе (выражается в мкг ин гибировапного трипсина). Предмет изобретенияСпособ определения активности антитрипсина в сыворотке крови путем ее инкубации с 10 трипсином, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности и точности результатов, неингибированный после инкубации трипсин оттитровывают специфической иммунной преципитирующей сывороткой,
СмотретьЗаявка
1694984, 16.08.1971
КРЫМСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ
КАРПИЦКИЙ ВЛАДИМИР ВИТАЛЬЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/16
Метки: активности, антитрипсина, крови, сыворотке
Опубликовано: 25.06.1975
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-474735-sposob-opredeleniya-aktivnosti-antitripsina-v-syvorotke-krovi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности антитрипсина в сыворотке крови</a>
Способ определения инсулина в препарате
Номер патента: 1291869
Опубликовано: 23.02.1987
Автор: Алекперов
МПК: A61K 38/28
...Изобретение относится к производству эндокринных препаратов, а именно к реакции качественного определе" ния инсулина,Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа за счет реакции образования метиленового синего. Составитель Л. ПокрышкинаТехред Л.Олейник Корректор И. Эрдейи Редактор И. Дербак Заказ 225/42 Тираж 777 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Иосква, И, Раушская наб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 П р и м е р. К 0,2 мл раствора ин-Ю сулина с 0,2 ЕД активности добавляют 2 мл 20 ,-ного раствора едкого калия и нагревают на кипящей водяной бане в течение б мин. Раствор охлаждают, добавляют 1 мл 1...
Способ определения ингибиторов трипсина в сыворотке крови
Номер патента: 1675776
Опубликовано: 07.09.1991
Авторы: Западнюк, Захария, Кинах, Романишин
МПК: G01N 33/68
Метки: ингибиторов, крови, сыворотке, трипсина
...раствор), стабилен при +4 ОС в течение 5-6 дней, перед исследованием готовят рабочий раствор разбавлением матричного трис-буфера в 20 раз(1 мл содержит 50 мкг трипсина); 10 н, раствор гидроксида натрия.К 0,5 мл разведенной сыворотки прибавляют 0,5 мл рабочего раствора тригсина(25 мкг), Для образования комплекса трипсин-ингибитор смесь выдерживают в течение 15 мин при комнатной температуре.Добавляют в пробирку 5 мг сухого азофибрина, смешивают и ставят в термостат на 1ч при 37 С, Вынимают изтермостата,добав- ,0ляют 3 мл дистиллированной воды, размешивают и центрифугируют 15 мин при ЗОООоб/мин. Отбирают 3 мл надосадочной жидкости и переносят в другую пробирку, прибавляют 0,05 мл 10 н.гидроксида натрия, 15колориметрируют на ФЭКе...
Способ получения иммунной сыворотки против инсулина
Номер патента: 1099954
Опубликовано: 30.06.1984
Авторы: Березин, Гаврилова, Давыдова, Егоров, Карапутадзе, Кирш, Попова, Сорокина
МПК: A61B 10/00
Метки: иммунной, инсулина, против, сыворотки
...инсулина в присутствии поливинилпирролидона по видимому связано с образованием электростатического комплекса,что, с. одной стороны, увеличиваетразмер молекулы инсулина, с другой -замедляет его вывод из организма. Способ осуществляют по выбранной схемеиммунизации. Частичное кровопусканиеиз сердца (5 мл) осуществляют на7-й день после последней инъекции,Первую реиммунизацию проводят через,30 дней. Все морские свинки на протяжении 5 циклов иммунизации, которые проводились в течение 6 мес, оставались живы, чувствовапи себя хорошо, образования подкожных язв не наблюдалось. Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать гипериммунную сыворотку с высоким титром. Антисыворотка может быть использована в радиоизотопном и иммуноферментном...
Способ определения активности ингибиторов трипсина в плазме крови
Номер патента: 1573430
Опубликовано: 23.06.1990
Авторы: Дмитриева, Златин, Ситкевич, Чаленко
МПК: G01N 33/68
Метки: активности, ингибиторов, крови, плазме, трипсина
...0,2 мл буфера, а трипсин вносили после остановки реакции (после добавления трихлоруксусной кислоты) на спектрофотометре Сфпри 280 нм в кю. вете 1 см.Отдельно ставили пробу на активность фермента (контроль): в пробирку наливали 0,2 мл раствора трипсина 74 мкг/мл, 0,8 мл буфера и 1,0 мл 20 1-ного раствора казеина. Инкубировали 20 мин при 37 С, добавляли 3,0 мл 53-ной трихлоруксусной кислоты, фильтровали через бумажный фильтр нсиняя лента" и определяли оптическую плот ность против дистиллированной воды.Степень торможения протеолиза при различных .разведениях определяли по формуле: где Е - количество фермента в пробе;В - количество гидролизованногоосубстрата в присутствии исследуемого образца (соответствует приросту оптическойплотности в...
Штамм культивируемых клеток почки эмбриона коровы для культивирования вируса лейкоза крупного рогатого скота
Номер патента: 1652338
Опубликовано: 30.05.1991
Авторы: Адомайтене, Немейкайте, Рачкус, Садаускас
Метки: вируса, клеток, коровы, крупного, культивирования, культивируемых, лейкоза, почки, рогатого, скота, штамм, эмбриона
...после 2515 пассажей при определении ревертазной активности вирусной фракции культуральнойжидкости 7-суточной культуры М 18 по методу Ложа и др. обнаружена высокая вируспродуирующая активность, достигающая20 10 -10 вирусных частиц в 1 мл.Вирус лейкоза КРС и его антигены, выделенные клетками М 18 в культуральнуюжидкость, выявляются также с помощьюРИД в агаровом геле в варианте для опре 25 деления титра антигена,Наличие зкстрацеллюлярного вирусалейкоза КРС и его антигенов в культуральной жидкости клеток М 18 регистрируюттакже при помощи иммуноферментного30 анализа (ИФА), После осветления культуральной жидкости (5000 об/мин, 30 мин)вирус лейкоза КРС осаждают в 20-номградиенте плоскости сахарозы ультрацентрифугированием, лиэируют,...
Предыдущий патент: Способ количественного определения концевых аминогрупп
Следующий патент: Устройство для бесконтактного измерения скоростей и ускорений движущихся электропроводных тел
Случайный патент: Ротационная машина в. ю. козловского