Штамм с1-продуцент -аспарагиназы

(32) Приоритет Государственный комитет Совета Министров СССР ло селам изобретений Опубликовано 15.08.75. БюллетеньДата опубликования описания 28.10.7 УДК 577,15.08(54) ИТАМ к медицинской и фер и направлено на по ммов - п од центо матовые, неправиламетре 2 мм;в) на агаризовкачестве источниклонии выпуклые,округлой формы вг) на агаризовкачестве источникколонии матовые,мы без ободка в д ои формы ьнои анной с а углерблест диамет анной а угле неправи иа метре еде, содержащеи в да 2% глюкозы, кощие, неправильной ре 1 мм;реде, содержащей в рода 2% глицерина, л круглой форьной о 0,8 мм. ин. Нетема для овиях ержа- тече- елаювировании2 реда состоит из 4ого экстракта, со еводов, с добавко ржа,1 % Изобретение относитсяментной промышленностилучение активных шта р у в1.-аспарагиназы.Известны штаммы Езстег 1 сЫа со 11 С 1 нпродуценты 1.-аспарагиназы.Ферментативная активность этих штаммовсоставляет около 2 международных единиц(МЕ) 1.-аспарагиназы на 1 мг сухого вещества бактерий. 10Предлагаемый штамм отличается от известных морфологическими и физиологическимисвойствами, обладает более высоким уровнембиосинтеза фермента и характеризуется повышенной устойчивостью ситеза 1.-аспарагиназы к наличию углеводов в питательной среде.Штамм Е. со 11 С 1 образует в среднем 3,4 -4,0 МЕ/мг Ь-аспарагиназы,Штамм имеет следующую характеристику.Морфология. 20Палочки размером 1 Х 2 мкм, грамотрицательны,Физиологические признаки,Колонии, образуемые при культив течение 18 час при 37 С: 5а) на 1,5%-ной мясо-пептонной агаризованной среде выпуклые, матовые, неправильнойокруглой формы с неоформленным центром;б) на агаризованной среде, содержащей кукурузный экстракт, колонии конусовидные, ЗО Штамм образует индол, дает отрицательнуюреакцию фогес-Проскауера.Отношение к источнику углерода.Усваивает глюкозу, фруктозу, галактозу,лактозу, арабинозу, мальтозу, глицерусваивает сахарозу, нитрат и маннит.Факультативный аэроб, Оптимальнаяпература роста 37 - 42 С.Пример использования данного штаммполучения 1.-аспарагиназы,Культивирование в лабораторных услпроводят в колбах емкостью 750 мл, содщих 100 мл ферментационной среды, вние 18 - 20 час на подвесной качалке, дщей 270 об/мин,Ферментационная с % (посухому весу) кукурузн дещего меньше 0,2% угл йсульфата аммония.Ме/мг Ме/мл 2,2 3,6 2,1 4,0 11,0 19,0 9,0 19,0 исходный штаммштамм Сисходный штаммШтамм С 1 Составитель Л, Минеева Техред 3. Тараненко Корректор Л, Котова Редактор Л. Василькова Заказ 2587 у 3 Изд, Уз 1675 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 Засев производят из расчета 0,04 мг клеток (по сухому весу) на 1 мл питательной среды,Культивирование в полупроизводственных условиях ведут в ферментерах емкостью 100 л на той же ферментационной среде.В таблице показано сравнение .-аспарагиназной активности исходного штамма и штамма С. В отличие от исходных штаммов предлагаемый штамм обладает большей активностью.В отличие от всех других, описанных в литературе штаммов Е. со 11, продуцентов .-аспарагиназы, штамм С 1 имеет то преимущество, что является более устойчивым к репрессорному влиянию глюкозы на биосинтез .-аспарагиназы. Предмет изобретенияШтамм ЕзсЬег 1 сЫа со 1 С 1-продуцент 1.-аспарагиназы,4Штамм хранится в музее культур ВНИИАза г 1 в 1527. Морфология.5 Палочки размером 1 Х 2 мкм, грамотрицательны.Физиологические признаки.Колонии, образуемые при культивированиив течение 18 час при 37 С:1 О а) на 1,5% -ной мясо-пептонной агаризованной среде выпуклые, матовые, неправильнойокруглой формы с неоформленным центром;б) на агаризованной среде, содержащей кукурузный экстракт, колонии конусовидные,15 матовые, неправильной округлой формы в диаметре 2 мм;в) на агаризованной среде, содержащей вкачестве источника углерода 2/о глюкозы, колонии выпуклые, блестящие, неправильной20 округлой формы в диаметре 1 мм;г) на агаризованной среде, содержащей вкачестве источника углерода 2% глицерина,колонии матовые, неправильной округлой формы без ободка в диаметре 0,8 мм,25 Штамм образует индол, дает отрицательнуюреакцию фогес-Проскауера.Отношение к источнику углерода.Усваивает глюкозу, фруктозу, галактозу, 30 лактозу, арабинозу, мальтозу, глицерин, Неусваивает сахарозу, цитрат и маннит.Факультативный аэроб. Оптимальная температура роста 37 - 42 С.