Способ получения 16, 17 -изопропилидендиоксипрегна-1, 4 диен-3, 20-диона

1111 457722 ОПИСАН ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУРеспублик 1) Зависимое от авт. свидетельства 22) Заявлено 11.09,73 (21) 1961998/28-1 С 124 13/00С 07 с 167/00 51) с присоединением заявки Ье твенный комитет Го(32) ПриоритетОпубликовано 25.01 овета Министров СССпо делам изобретений н открытий 53) УДК 663,1(088 Бюллетеньисания 21.03.7 а опубликования 2) Авторы изобретени мерницкий, А, Д, Карева, И. Г, Леонтьеи А, И. Поселенов етерсо 71) Заявите, Зелинск нститут оргаиическои химии им 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 16 а, 17 а-ИЗОПРОПИЛИДЕНДИО П РЕГНА,4-ДИЕН,20-ДИОНА Культуру МусоЬа ыращивают 7 суток мясо - пептонный агар затем пересевают в й из 1 % кукурузног озы; рН 7,0. с 1 епцтп на скои сус мл экстПример 1.д 1 оЫоггпе 193 шинном агаре ло в аг 1: 1), среды, состоящ ракта и 1% глю Изобретение относится к микробиолопической промышленности,Известен способ получения 16 а, 17 а-изопропилидендиоксипрегна,4-диен,20-диона из16 а, 17 а - изопропилидендиокоипрегна-ен-Зрол-она.При таком способе 16 а, 17 а-изопропилидендиоксипрегн,4-диен,20-дион получают окислением 16 а, 17 а-изопропилидендиоксипрегна 5-ен-Зр-ол-она до 16 а, 17 а-изопропилидендиоксипрегна-ен,20-диона и дегидрированием последнего химическим путем,Недостатками такого способа является егодвустадийность и связанный с этим низкийвыход целевого продукта, 15С целью упрощения процесса и увеличениявыхода продукта, предложено получать16 а, 17 а - изопропилидендиоксипрегн,4-диен 3,20-дион микробной трансформацией с использованием микобактерий вида МусоЬасепшп д 1 оЬ 11 огтпе. Из вида МусоЬас 1 ег 1 цшд 1 оЬНогтпе рекомендовано использоватьштамм 193. Все процессы выращивания и трансформации проводят на этой среде в колбах объемом 750 мл, при 28 С на качалке, вращающейся со скоростью 240 об/мин,Через 67 час выращивания в жидкой среде культуру используют,как посевной материал, который вносят в количестве 5% в 100 мл свежей среды,Через 24 час роста добавляют 16 а,17 а-изопропилидендиоксипрегн-ен-Зр-ол-он (в концентрации 1 мг на 1 мл среды), растворимый в этиловом спирте. Всего трансформируют 1,2 г стероида в течение 52 час, после чего культуралыную жидкость трижды экстрагируют хлороформом. Экстракт сушат над Мд 504 и упаривают. Маслообразный остаток кристаллизуют в метаноле, Полученный после первой кристаллизациями продукт содержит примесь промежуточного Л 4-3-кетона, которьш отделяют от целевого Л 1,4-3-кетона хроматографированием,на А 10 з в системе эфир - гексан (5: 1). Получают 550 кг Ь 1,4-3-кетона (45%) и 70,мг Ь 4-3-кетона (6%). Аналитическии образец 16 а, 17 а-изопропилидендиоксипрегна,4-диен,20-диогена имеет т. пл. 202 - 7 (метанол), литературные данные 202 - 4 (эфир).УФ-спектр: Хмакс. 245 н.м., в=14200; ИК- спектр: 1710, 1665, 1625, 1610 см в .457722 П-р.е д м е т и з о б р е т е н и я Составитель Л, Минеева Техред В, Рыбакова Редактор А. Бер Корректор А, Васильева Заказ 732/17 Изд.302 Тираж 529 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж-З 5, Раушская наб., д. 4,5Типография, нр. Сапунова, 2 3Пример 2. 700 мл поеевного материала МусоЬас 1 епцт д 1 оЬ 11 оппе 193 в возрасте 50 час вносят в 5 л среды и выращивают клетки 22 час в ферментере (Швейцария Б - 10). Прибавляют 3,7 г стероида в 70 мл этанола и 5 мл пеногасителя. Трансформацию ведут 4 час, культуральную жидкость трижды экстрагируют хлороформом и экстракт упаривают. Полученный маслообразный продукт фильтруют через колонку с А 120 з под давлением азота при элвировании смесью эфир - хлороформ 9: 1. Получают 2360 мг смеси Л 4 и Ь 1,4-3-кетона, общий выход 65,57 о. Выход 16 а,1 а-изопропилидендиоксипрегна - 1,4-диен,20-диона при этом составляет 60%,1. Способ получения 16 а, 1 а-изопропилидеядиокси 11 регна,4-диен,20-диона из 1 ба, 5 1 сс-изопропилидендиоксипрепна - 5 - ен-Зр-,ол 20-она, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и увеличения выхода продукта, получение 16 а, 1 к-изопропилидендиоксипрегна,4-диен,20-диона ведут микробной 10 трансформацией с использованием микобактерий вида МусоЬас 1 епцгп доЬНоггпе,2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что из вида МусоЬас 1 епшп д 1 оЬНоппе используют штамм 193.15