411129

41 И 29 Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 261972 ( 1742303/31-1с присоединением заявкиПриоритет С 121 1 О М. К осударственный нойнтет Совета Миниотров СССР по делам изобретений и открытийДК 576.8.093,33(088.8 публиковано 15.1 974. Бюллетень2 Дата опубликования описания 1.И 1,19 Авторыизобретения А, Крушинская, И. Л, Маргулис, 3. Д. Михлнн и Т, В. Носальчук ковский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии явител ТАТЕЛЬНАЯ СР КОКЛЮШДЛЯ ВЫРАЩИВАНХ МИ КРОБОВ тение относится к области микроби логии.Известна питательная среда для выращивания коклюшных микробов, содержащая хлористый натрий, хлористый калий, хлористый кальций, хлористый магний, фосфорнокислый калий двузамещенцый, углекислый натрий, крахмал, сернокислое железо, сернокислую медь, агар-агар, ферментативный казеиновый гидролизат, активированный уголь, цистин, дистиллированную воду. Однако указанная среда обладает недостаточно высоким качеством.Цель изобретения - повышение интенсивности роста коклюшных микробов, Для этого в состав среды вводят препарат высушенной культуральной жидкости, полученной при термофильном мета новом брожении меласснозерновой ацетоно-бутиловой барды, и содержание ингредиентов в 1 л среды составляет: препарата сухой культур альной жидкости 0,2 - 0,4%, хлористого натрия 0,45 - 0,55%, хлористого калия 0,015 - 0,025%, хлористого кальция 0,00015 - 0,0002%, хлористого магния 0,002 - 0,0025%, фосфорнокпслого калия двузамещенпого 0,02 - 0,03%, углекислого натрия 0,035 - 0,04%, крахмала 0,08 - 0,15%, серно- кислого железа 0,8 - 1,2 мл 1%-ного раствора, сернокислой меди 0,3 - 0,6 мл 1%-ного раствора, агар-агара 1,8 - 2,0%, активированного угля 0 5 0 7%, цистнна 0,0025 - 0,0035%, ферментативного казеинового гидролизата в количестве, обеспечивающем содержание аминного азота в среде 20 - 150 мг%.5 В качестве источника роста предложен препарат 1(МБ, представляющий собой высушешую культуральную жидкость, полученпуов процессе термофилього метанового брожения мелассно-зерновой ацетоно-бутиловой бар 10 ды, являющейся препаратом, насыщеннымбольшим количеством белков, аминокислот,витаминов, Препарат КМБсодержит сырыепротеины 28 - 37% и белок 17 - 22%, где содержатся незаменимые аминокислоты 1 аргн 15 нин, валин, гнстидип, изолейцш, лизин, лейцин, метиопин, треонин, фенилалаппн), заменимые аминокислоты (алании, аспарагпновая,глютамнповая, пролин, тпрозин, серии, цпстпн), а также следующие витамины в мг на20 1 кг сухого вещества; В, 15, В, 50, В, 45, В 1,100, РР 90, фолиевая 70, пантотеновая 125,биотпп 0,07 и холиноподобные вещества50 г/кг,П р и м е р. Содержание ингредиентов па 1 л25 предлагаемой питательной среды составляет:сухой препарат КМБ0,2 - 0,4%хлористый натрийхлористый калий 0 02%хлористый кальций 0,0002%30 хлористый магний 0,0025%5 10 Предмет изобретения Щеиева Составитель С. Корректор Н. Торкна Редактор Т. Юрчикова Текред Г. Васильева Заказ 1213/Б Изд1237 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 415(двузамеш,енньш)углекислый натрийкрахмалсернокислое железо 1 % р-р сернокислая медь 1 о/о р-р агар-агар11 ермептативныЙ казеиновый гидролизат в количестве в зависимости от того, с каким содержанием аминного азота нужно приготовить средуакгивировапный уголь цистиидистиллированная вода 0,5%0,003%донеобходимогообъемарН среды 7,3 - 7,4Готовят п 1 гтаельную среду с,педующим образом.Необходимое количество сухого препарата 11 ЧБразводят в части дистиллированной воды и оставляют на 15 мин для набухании. Затем добавля 1 от 2 о/о агар-агара и снова оставляют на 15 мин. 1 смеси препарата и агарагара добавляют 0,5% активировапного угля и полученную смесь из трех ингре;иентОВ автоклавируют в течение 1 час при 100 С. В соответствии с нужныл содержаниел аминного азота в среде (20, 50, 100 или 150 л 1 го/о) разводят казеиновый гидролизат дистиллированной водой, добавляют соли в количествах, указанных в составе среды. Далее для приготовления среды используют растворимый крахмал 0,1/ который предварительно растворяют в части дистиллированной воды, а затем добавляют и раствору солей и казеинового гидролизата, Казеиповы гидролизат перед добаВлениел 1 солей и других ингредиентОВ должен иметь рН 7,0 - 7,1. Цистип или добавляют в среду, или готовят в виде раствора, стерилизуют отдельно и добаьляют к среде перед разливкой в чашки Петри. Завершающим этапом приготовления среды является соединение двух частей - автоклавпрованной и смеси солей, казеинового гидролизата и 15 20 25 30 35 40 45 крахмала, После этого среду разливают во флаконы или матрацы и стерилизуют при 110 С в течение 30 мин.Предлагаемая питательная среда обусловливает увеличение микробной лассы коклюшного л 1 икроба в 400 в 5 раз по сравнению с посевной дозой и при этом выход микробной массы составляет 90 в 1 л одномиллиардной суспензии в 1 л среды, что имеет решающее значение в исследованиях, связанных с изучением аптигена и для вакцинного производства. 1. Питательная среда для выращивания коклюшных микробов, включающая хлористый натрий, хлористый калий, хлористый кальций, хлор истый магний, фосфорнокислый калий двузамещенный, углекислый натрий, крахмал, сернокислое железо, сернокислую медь, агар- агар, ферментативный казеиновый гидролизат, активированный уголь, цистин, дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения интенсивности роста коклюшных микробов, она содержит препарат высушенной культуральной жидкости, полученной при терлофильном метановом брожении мелассно-зерновой ацетоно-бутиловой барды.2. Питательная среда по п. 1 отлич ающ а я ся тем, что содержание ингредиентов в 1 л среды составляет; препарата сухой культуральной жидкости, полученной при термофильном метановол брожении мелассно-зерновой ацетопо-бутиловой барды 0,2 - 0,4/о, хлористого натрия 0,45 - 0,55 о/о, хлористого калия 0,015 - 0,025 о/ хлористого кальция 0,00015 - 0,0002 о/о, хлористого магния 0,002 - 0,0025%, фосфорнокислого калия двузамещенного 0,02 - 0,03 о/о, углекислого натрия 0,035 - 0,04, крахмала 0,08 - 0,15 о/о, сернокислого железа 0,8 - 1,2 мл 1 о/о-ного раствора, серно- кислой меди 0,3 - 0,6 мл 1%-ного раствора, агар-агара 1,8 - 2,0%, активированного угля 05 - 07 о/о, цистина 0,0025 - 0,0035 о/о, ферментативного казеинового гидролизата в количестве, обеспечивающем содержание аминного азота в среде 20 - 150 мго/о,