378409

3784 О 9 ОП ИСАНИЕИЗОВРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республикг,исимое от а свидетельств Заявлено 16,Х.1969 ( 1370733/30с присоединением заявки-Приоритет = 1, Кл, С 12 п 9 Комитет по делам изобретений и открытий пои Сосете Министров СССо,1 т.1973. Бюллетеньния описания 18 Х 1.197 публикованоата опублнко Авторыизобретен Г. С. Муромцев, Е,. П. Давыдова и М, М, Клягина сесоюзный научно-исследовательский институт фитопатологинзованныхт разветвтосцы пря. руглые и блюдаются гекси мида 1 м призна различных признаков х, на котоичия. Для спользуют сы одного ичия в от. ания (см,Таблица ШтаммгаризованнаоиСходный (. йб)Обильный, палевый,зелановатойелттый (2 ва) леднб-желто-эе.леного пергаментного цвета ульоном оттингер глюкозоПалевый, зеленсый оевая вато желт12 дв Предложенный штамм-мутант Ас 1, з(гер 1 отпус 1 п66 - 463 - продуцент циклогексимида, получен из штамма Ас 1. з 1 гер 1 отпус 1 п 166 в результате многоступенчатого отбора при естественном рассеве и последующей обработ ки зтиленимином и УФ-лучами, Исходный для селекции штамм синтезировал 100 - 200 мг/л цнклогекспмида; штамм-мутант образует 900 - 1200 мг/л,Антибиотик циклогексимнд (актидион, на рамицин) Я 2(3,5 диметилоксициклогексил)- 2 оксиэтил глютаремнд - С 5 Н 2 з 04 применяется как фунгицид для борьбы с возбудителямй многих грибных заболеваний растений, КрОме того, он применяется как рейеллент против 15 грызунов, как ингнбитор синтеза белка, а также испытывается как противоопухолевой антибиотик (Зпрпга а. о., 1958).По таксономическим признакам штамм Ас 1, втгертотпус 1 п 166 - 4 Я близок к штам о мам Яг. дг 1 зецз, которые применяются в США (%ЬШеп, 1948) и Венгрии (1)обоз, 1966) для получения циклогексимида, нО отличается от них культуральными признаками - окраской воздушного мицелия, цветом выделяемогО в среду пигмента, способностью к потреблению различных источников углеродного питания.По морфологическим признакам штамм- мутант Ас 1. зтгертотпусп 1бб - 463 не отличается от исходного для селекции штамма ЗС66. При выращиванин на агар питательных средах штамм образуе ленный воздушный мицелий. Споро мые, собраны в пучки. Споры к овальные.Различия между штаммами на в способности к биосинтезу цикла а также по некоторым культуральнь кам и способности к потреблению источников углеродного питания.Для описания культуральных штаммы выращивают на тех среда рых более четко проявляются разл оценки цвета воздушного мицелия и шкалу Ргапзета. Различные индек и тОго же цвета указывают на разл телках и интенсивности окрашив табл, 1).(2 с)в) ПшеничнаяКартофельная Палево-желтый (2 ва)Палево-желтый (2 ва)Палево-желтый (2 ва) Палево-желтый (2 ва)Палево-желтый (2 ва)Палево-желтый (1 ва)Палево-желтый (1 ва)Палево-желтый (1 ва)Палево-желтый (1 ва)Палево-желтый (2 ва) Палево-желтый (2 с(в)Палево-желтый (1 ва)Палево-желтый (2 с 1 в)Палево-желтый (2 с 1 в)Палево-желтый (2 с(в)Палево-желтый (2 сгв)Палево-желтый (2 с 1 в) Таблица 2 1 Араби- МальтоЛактозаноза Гцер, ) Сахаро- за Штамм Глюкоза Галакгоза Маннит Крахмал+ - Слабый рост; + + - хороший рост; + + + - очень обильньш рост. Ш;аммАгаризованнаярда исходный ( 66) мутант463 Среда с бульономХоттингера исахарозой Среда ЧапекаС ГЛЮКОЗОЙ Среда Чапекас галактозой Среда Чапекас лактозой Среда Чапекас сахарозой Среда Чапекас глицерином Среда Чапекас маннитом Среда Чапека с арабинозой Штамм66 - 463 следует выращивать на голодном агаре (20 г агар-агара; 1. л воды; рН 7,0), а хранить на двух средах: водном агаре и картофельной среде (200 г картофеля, 1 л воды, 20 г агар-агара; рН=7,0),Для накопления циклогексимида культуру следует выращивать в ферментационной среде, в состав которой входят 5 мл кукурузного экстракта, 80 г глюкозы; 5 г (1 чН 4)гЯ 04, 5 г СаСОз, 1 л воды; рН 7,0 - 7,2. В качестве посевной используется среда с соевой мукой и глюкозой (10 г соевой муки; 10 г глюкозы;5 г мела, 1 л воды; рН 7,0 - 7,2). Максимальное количество циклогексимида при глубинном выращивании культур в пробирках ца ротационной качалке (220 - 240 об/мин) образуется на шестые - восьмые сутки ферментации (в ферментерах типа с)гегпар - на шестые сутки). При хранении штамма-мутанта в течение двух лет его активность не снизилась,Предложенный штамм-мутант позволяет увеличить концентрацию циклогекси мида в культуральной жидкости в 5 - 6 раз (по сравнению с исходной культурой). Предмет изобретенияШтамм-мутант - Ас(1 погпусез згер 1 огпуИз приведенных дан видссо, что штамммутант отличается от исходного штамма окраской воздушного мицелия ца всех перечисленных выше средах. Различия наблюдаются 6 и в цвете пигмента, выделяемого в среду. Прцвыращивании на среде с бульоном Хоттингера и глюкозой штамм66 выделяет в среду желтый пигмент, а66 - 463 - желто-бурый; на соевой среде штамм66 выделяет светло бурый пигмент, а штамм66 463 буроватозеленый. Штамм-мутант66 - 463 отличается отисходного штамма и по способности потреблять различные источники углеродного питания, Штамм66 - 463 лучше потребляет галактозу, сахарозу, и арабинозу, но слабее - маннит, крахмал, глицерин, лактозу и арабинозу (см. табл. 2) Штамм-мутант Ас 1. Ягер 1 огпус 1 п 166 - 463 зарегистрирован в коллекции чистых культур Всесоюзного научноисследовательского института фитопатологии (под66 - 463),26 с 1 п 166 - 463 (ВНИИФ) - продуцент цц.клогексимида.Морфология, Воздушный мицелий разветв.ленный, обильный. Спороцосцы прямые, собраны в пучки. Споры круглые и овальные. д 0 В среду выделяет пигмент, цвет которого ззависимости от среды варьирует от желтова. то-зеленоватого до бурого.Агаризованная среда с бульоном Хоттингера и глюкозой. Колонии палевого, зеленовато- желтого цвета, крупные, приподняты над агаром. Основание колоний светло-коричневого цвета, продуцирует желтый пигмент,Жидкая среда с бульоном Хоттингера иглюкозой. На вторые сутки образует желтую 40 пленку беловато-зеленоватого цвета. Продуцирует зеленовато-желтый пигмент.Антагонистические свойства. Активен 1 пУ 11 го против многих грибов, в том числе против Сгур 1 ососсцз пео 1 оггпапз, Касс)загопгусез 46 сегеиз 1 ае, БассЬагопзусез е 111 рзоЫез, Р 1 с 111 агпегпЬгап 11 ас 1 епз, Рогц 1 азрога 1 еггпеп 1 а 11 и Яасс 1 загогпусез раз(ог 1 аппз.Биосинтетическая активность. При глубинном культигировании на, среде с глюкозой и 60 сернокислым алюминием обрааует 900 -1200 лгг/г циклогексимида.