Способ получения аминокислот

Соитз Соеетских Социалистических Республик. Кл. С 120 13/О Заявлено 18.11.1971 ( 1634058/28-13) црисоедицсцисц заявкиКомитет о ам июритет открытиЯнистров яаобретениЯ и ори Совете МССС ЛК 663.18,088.8 бликовацо 09.Х.1972. Воллстсцьа опубликования описания 9.Х 1.1972 Авторы зобретециЗаявитель Институт микробиологии им. А. Кирхеиштейия АН Латвийской СС И НО КИСЛОТ ОСОБ ПОЛУЧЕ цяльцое госицтсз п 1 тоизводят цякс , я во второй - с бораторцоц колон Вяци 5 иро,1 цсцт ч 295 В псрвои стядцц акоплсцис биомасс -триптофаца. В ля сцтсрс ультивцро офяия-Стпс 1 с 1 я и 1 оц фср-тривего сосреду следу 50 (47 2 оо ахара) 105 51 стсрилизуот отдельно ,75 атл, а мицераль 1 атл; рИ среды услбы круультуры.проводят с цита- убициоз;тсевцого бсолютцо ерабатыДля ток цо массу о ацетон В пр вцачалшест вс жеиовСпос 1,-трип Изобретение отцосится к микробиологисской промышленности.Известен способ получения ямицокислот, например 1,-триптофаца, путем глубинного культивирования продуцсцтов при аэрятии иа питатсльцой среде, содсржащей источники углерода, азота ц биологически дктивцыс вещества, в две стадии с последующим отделецием биомассы от сультурдльцой жидкости и выделением в коицс второи стадии яцицокислоты.Цель изобрстепия - получение аминокислот при полцоц освобождении цикробцых клеток от культуральцой среды.Это достигается тем, что осуществляют отбор всей культуральцой среды многократно после иакоплсция требуемого количества биомассы и замену ее свежей средой, содержащей трацсформирусмое вещество. улучшсция проницаемости оболочек клсслс отбора культуральцой среды биобрабатывяют 1 тяствортелего цяприцср ом.оцессе выращивания воздух подают е цри цоишеццом давлении, прсицушо равном 6 атм, а затее при пони, преимуществсцио равиом 0,001 атл, б получения аминокислот, цапримср офаца, ведут в две стадии. Готовят питательтява, г;Мел асса10 Фосфат калиядвузаксцсцыСульфат цагцияХлористы цкальций15 Мочсвцц яВодя Мслассу и мочевицув тсчсцис 20 лан при 0цую среду - 30 лги притацавливают 7,5 - 8,2.Сапс 1 с 1 а ц 11 в 295-г помещают в оГовой качалси для рязмцожсци кМаксицальиос цакоплсцис биомассыв простсрилизоваццых фермецтеряхтельной средой для осущсствлсция гго культивировация, Количествоматериала составляет це мецсс 89 о асухой биомассы от коццсцтряции цсрваемого сахара,Пред м ет изобретен и я Составитель М, Ларин Техред А, Камышникова Корректор Л. Царькова Редактор А. Бер Заказ 3700/8 Изд.1493 Тираж 406 1 одписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушскан наб., 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 Температура фермецтации 28 - 30 С, рц 7,5 - 8,0. Интенсивность аэрации це менее 120 лсг О,/л лгин (сульфитпый метод).Культивирование ведут при двух поперемеццо мецяющихся режимах аэрации - прц повышеццом давлении воздуха, преиму 1 цествеццо равцом 6 ат,11, и прц поцижеццом давлении до 0,001 атл 1. 11 сриод цзмецеций режимов 15 сек.Пос 1 е размцожсцц 51 цеооходиаОГО коли 1 ества биомассы (це мецес 18 г/л абсолютно сухого вещества дрожжей) концентрация ес повышается путем фильтрации до 120 - 150 г/л, после чего вводят 5%-цый спиртовой раствор ацтрациловой кислоть 1 (срез какдыс 3 час), 10%-цый раствор сахара (через каждые 24 час) и 5%-цый раствор мочевицы (для поддержация оптимального рН).В течец 11 е процесса трацсформации поддерживается К= 60 - 10 мг/л мин, температура 30 С, рН 7,5 - 8,2. ь 1 ерез 96 - 120 час осуцествля 1 от отбор культуральцой жидкости, содеркащей 5 - 6 г/л /.-триптофаца, после чего в фермецтер добавляют новую питательную среду, содержащую сицтезируемос вепсство.Биосинтез осуществляется по принципу противотока, контактируя свежую питательную среду со старой биомассой и наоборот. 1,летки Сапг 11 с 1 а н 1111 э 295-/ способны трацсформировать ацтрациловую кислоту в течение 3 - 4 циклов возобновления среды.С целью улучшения проницаемости оболочек клеток после отбора культуральцой среды биомассу обрабатыва 1 от одним из растворителей, например ацетоном, при цепрерыв 1 гой аэрации, а затем подают цовую питательную среду, содержа 1 цую сццтезцруемое вещество. Предлагаемый способ позволяет увеличить выход У,-триптофаца до 25% от его общего выхода. 1. Способ получения аминокислот, напримерУ,-триптофаца, путем глубинного культивиро вацця продуццру 1 ощих их микроорганизмовпри аэрации ца питательной среде, содержащей источники углерода, азота и биологически активцые вещества, в две стадии, ца первой цз которых производят максимальное цакопле цие биомассы, а ца второй - синтез амицокислот с последующим отделением биомассы от культуральцой жидкости и выделением ца второй стадии аминокислот, отличаюшиися тем, что, с целью возможцости получения 20 аминокислот при полцом освобокдеции микробцых клеток от культуральцой среды, в период накопления требуемого количества биомассы ца первой стадии осуществляют многократцо отбор всей культуральцой среды и за мену ее свежей средой, содержащей трацсформирусмое вещество.2. Способ по п, 1, отличагощиссся тем, что,с целью улучшеция проницаемости оболочек клеток, после отбора культуральцой среды 30 биомассу обрабатывают растворителем, например ацстоцом.3. Способ по и, 1, Отличаюиийся тем, чторежим аэрации измецяют в процессе культивировация, подавая воздух вцачале под повы ше 1 шым давлением, преимущественно равным6 атл 1, а затем -- при пониженном, преимупсствсццо равном 0,001 ат и