Способ получения ингибитора амилазы

Оп И САНИ ЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Секта Советских Социалистических Республик.Ч. Кл, А 611 1 Приоритет пп. 1, 2 29.1.19 О,Р 2003934.3,по п. 3, 11 Л 1,1970,Р 2028739.2, ФР Комитет по стела эобретеиий и открытии ДК 615 Л 5:615.779 ллетець28 строе и Совете СС-ете и-, -.,ь1 А Го ,Ф ата опубликования описания 9.Х.1972 сАвторы сзобрете состранцыдт и Вальтер ПульсРеспублика Германии)раниая фирмабрикен Байер АГРеспублика Германии) Дельф ШмиЗаявител СПОСОБ ПОЛУЧЕ биох сиги(. луче влет Зависимый от патентаОпубликовано 21 1 Х.1972. Изооретсиие относится к имии ц касается способов получения г титорд амилазы.Известен способ получения ицгибитора амилазы путем экстракции пшеничной муки спиртом с последующим выделением целевого продукта.Указанный способ це обеспечивает по ция достаточно чистого препарата с удо ворительным выходом.Целью изобретения является повышение выхода и степени чистоты целевого продукта.Эта цель достигается тем, что исходное сырье экстрягирусот 10 - 90%-ныхт водным раствором низших спиртов (С, - С,) или водными электролитами при рН 1 - 7, В качестве сырья можно использовать муку грубого помола или пшсицчцую клейковину (глготец).П р и м е р 1, 1 кг пшеничной муки гомогецизтсрусот в 2 л 66 со-ного этацола, доводят значение рН до 3 - 3,5 добавлением соляной кислоты, перемешивают 30 лин при комнатной температуре и цеитрифугируют 10,цин при 6000 об/,тсисс. Надосадочиую жидкосгть отделяют, а осадок повторно экстрдгируют при тех же условиях, Объединенный экстракт нейтрализуют аммиаком, отделяют выпавший осадок балластных белков цецтрифугпровацием, а раствор упаривают до 300 лсл при остаточном давлении 20 лслс рт. ст. и температуре ИНГИБИТОРА АМИЛАЗЫ 1 О - 50 С. Остдток вновь цецтрифугируют и после диал гза в течеии 8 час подвергают лиофилизации, Получают 10 г препарата, содержащего40.000 ед/г ингибитора панкреатической5 дмилазы,П р и м е р 2. 1 нг пшеничной муки гомогецизируют в 2 л 30 осо-ного этанола, доводят рНдо 3 - 3,5 соляной кислотой, перемешивают втечение 1 час при комнатной температуре и10 центэифугиругот 1 О лин при 6000 обслсссн, Надосддочикг жидкосгь отделяют, нейтрализютаммиаком до рН 6,8 и отделяют осадок оялла.тцых белков цс нтрифугированием. Грозрдчиый раствор выдерживают в течение ночи15 при темпсрдтре минус 15 С, прозрачный раствор декацтируют, а осадок цецтрифугируютири минус 15 С в течение 10 лин при6000 обслссссс. К остатку добавляют охлажденный абсолютный этдцол и сушат в вакуум су 20 шильцом шкафу. ПолучаютО г препарата, содержащего 160.000 ед/г ацгибитора амилазы.П р и мер 3. 200 г пшеничной мчси гомос еггизируют в 800 л.г воды, доводят рН до 3,3,перемешивают 30 лсси при комнатной темперд 25 т ре ц центриф 4 тируют 30 лсин. Нддосадочцую жидкость нейтрализуют аммиаком, сновацецтрифугируют и дооавляют к раствору110 лл аосолютного этанола, Смесь фильтруют и осаждают целевой продукт из раствора30 добавлением 5.г абсолютного этанола. Осадок352440 Предмет изобретения Составитель В, Таратута Техред Л, Евдонов Корректор Л. Бадылама Редактор Т. Каранова Заказ 3224 у 9 Изд.1330 Тиране 406 ПодписноеЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 промывают абсолютным этаполом и сушат в вакууме. Получают 1,5 г препарата, содержащего 90.000 ед/г иигибитора амилазы.П р и м е р 4. 500 г пшеничной муки гомогенизируют в 2 л 75%-ного метанола, перемешивают в течение 1 час и фильгруют. Фильтрат по каплям добавляют в 6,4 л ацетона, отделяют выпавший осадок декантацией и промывают его абсолютным этаиолом. После высушивация в вакууме получают 12 г препарата, содержащего 40,000 ед/г ингибитора амилазы.При мер 5. 10 кг пшегп 1 чиой клейковины при перемешивапии добавляют к 50 л 30%-ного метанола, доводят рН соляной кислотой до 3,5, перемешивают 45 пин и нейтрализуют аммиаком, Осадок отделяют цептрифугированием в течение 10 мин при 2000 об/.иии, а иадосадочную жидкость оставлячот иа ночь при температуре минус 10 С, Выпавший осадок отделяют декантированпем, затем центрпфугируют при минус 5 С, промывают спиртом и эфиром и сушат в вакууме, Получают 180 гпрепарата, содержащего 775.000 ед/г иигибитора амилазы. 1. Способ получения ипгибптора амилазыпутем экстракции пшеничной муки спиртом с последую 1 цим выделением известными приема.10 ми, отличаюи 1 ийся тем, что, с целью повышеииа выхода и степени чистоты целевого продукта, исходное сырье экстрагируют 10 в 90%- вым водным раствором низших спиртов (С - Сз) или водными электролитами прп 15 рН 1 - 7.2. Способ по п. 1, отличаюи 1 ийся тем, что вкачестве исходного сырья использу 1 от пшеничную муку грубого помола.3. Способ по п, 1, отличаюи 1 ийся тем, что в 20 качестве исходного сырья используют пшеничную клейковину (глютен).