Способ получения протеолитических ферментов

О П И С А Н И Е 340692ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельства4 п 9858 28 1 г) М Кл. С 124 13/10 влено 13 Л.1970 нрисоединением заявкириоритет Комитет по аслам изобретений и открытий при Совете Мииистров СССРУДК 577.15.08(088.8) Опубликовано 05,И.1972, БюллетеньДата опубликования описания АвторизобретенияЗаявитель В. И, Кузнецова 1 а-исследовательский астительных материа Всесоюзный на иститут гидролизав ЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИ 2 я благоприя ом азотного олитических среда в ка ит мелассу ющпм веще бст 1 вует обо ы витаминнь ществами.среды, %; к мик обиологич Изобретение относится р еокой промышленности,Известен способ получения протеолитичсских ферментов путем выращивания их продуцентов, например Лзрегр 1 цз 1 егг 1 соа, па питательной среде, содержаще 11 источо 11 пки углерода, азота, в присуттств 11 и минеральных солей.Предлагаемый способ позволяст получить более высокий,выход протеолитических ферментов, а также сократить:срок ферментации.Это достигается тем, что в,ка 1 естве,источника азота используют оксидат гидролизного лигнина в количестве 2 - 4% по азоту (по Кьелдалю), а в качест 1 ве источника углерода используют мелассу,в количестве, равном 0,5% по редуцирующим вепсествам,При предлагаемом способе получения протеолитических фсрмеитов В состаяв ферментационной среды вьодят оксидат лигнина в количестве 2 - 4% по азоту, который является продуктом окислителыной дест 1 рукции гидролизного ли 11 нина кислородом воздуха,в,присутствии аммиака и содержит 0,8 - 1% аммонийных солей орга 11 пческих кислот (муравьиной, янтарной, уксусной) и в большом количист 1 ве азот В (Виде сулъфа а аъВ 1 ония) аммонийных солей органических кислот и других соединений азота. тным питат лигнина являетс свояемым источник продуцентов проте Ферментационная а углерода содерж 0,5% по редуцир ие мелассы спосо ментационной,сред если активными ве ферментационнойОксидаи легкоуния дляментов.источникличествеДобавленнию фербиологичСостав честве в коства м. гаще МИ И азот оксидата в видесульфата аммония аммонийные соли органических кисловат ,мелассаКН 2 Р 04Мф 04УпЯ 04Ми 04Ге 504 0,8 - 15 (по РВ)1,370,120,010,050,015 ую среду (солизации и доют проросшие 374. Биосинтез осуществляютния продуценкачачке при П р и м е р. В фермент став указан выше) посл 5 ведения рН до 6,8 - 7,0 тсоппдпи Аврегр 1 пз 1 ег 1 протеолптических ферм путем глуб 1 гнного культ 1 та,в колбах Эрлепмейе О 30 С в течение 48 час, ахи он н е ст ер и засева со 1 а 3 нтов вирова ра на340692 Количество известнаяспецифическая среда Показатель предлагаемая среда0,72 0,36 Сахароза, % Глюкоза, оо Меласса, О 1 Оксидат, % 0,21,370,1230,0150,010,050,67 Предмет изобретения 48 - 50 36 - 40 По окончании срока выращивания биомассу гриба отделяют фильтрованием, фермент. ныл препарат выделяют путем осаждения четырьмя объемами этанола с последующисм высушиванием,Составитель М. ЛаринаТехред 3. Тараненко Редактор А. Сер Корректор Т. Гревцова Заказ 1830/1 О Изд. М 820 Тираж 448 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, )К.35, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 КИО: ооКН,РО ооМд 5 ОЪРе 30, %Хп 30,%М 30,жПротеолптическая активность,ед/,илВремя ферментации, час 0,5 (по РВ) 2 - 4 по азоту (опеделен по методу ьельдаля)1,37 0,123 0,015 0,01 0,05 0,78 Определение протеолитической активности(по Ансону) проводят непосредст 1 венно в фильтрате культуральпой жидкости, а,также в растворе сухого препарата фермента, 5 В таблице приведены сравнительные 1 данные по получению протеазы продуцентом АзрегрПпз 1 егпсоа 3374 на специфической ферментацио 1 гной среде, состав минералыных солей которой взят за основу для данного 10 способа. 1. Способ полуа 1 ения протеолитических 15 ферментов,путем выращивания их продуцентов, например Азрегр 11 цз 1 еггьсоа, на питательной среде, содержащей источники угле.рода, азота, в присутствип минеральных солей, отличающийся тем, что, с целью повыше ния выхода и активности ферментов, а такжесокращения процессов ферментации, в качестве источника азота используют оксидат гидролизного лигнина в количестве 2 - 4 по азоту (по Кьельдалю).25 2. Способ по п. 1, отличаюи 4 ийся тем, чтов качестве источника углерода используют мслассу в количестве, равном 0,5% по редуцирующим веществам,