Способ определения внутриклеточной локализации
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 331276
Авторы: Глузман, Киевский, Клинической
Текст
О П И С А Н И Е 331,226ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДНИЛЬСТВУ Союа Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельства-Заявлено 26.Х.1970 ( 1492693/31-16) М. Кл. 6 01 п 1/28 соединением заявкикотеитет по делавт иаобретеиий и открыти при Совете Мииистро СССРриоритет публиковано 07.11,1972, Бюллетень Ло ата опубликования описания 14.1 Ч,1972 Авторизобрете Д. ф, Глузман евский научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической онкологии аявител ЕНИЯ ВНУ 1 РИКЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗА ЭКЗОНУКЛЕАЗ ПОСОБ ОПР 2инуклеотида, 0,05 мг змеино 0,2 моль) трис-солянокислог ), 0,125 мл (0,4 моль) раство нца и дистиллированную вод П редме обретения Изобретение относится к области гистохимии, в частности к способам определения внутриклеточной локализации неспецифических экзонуклеаз.Экзонуклеаза (фосфодиэстраза 1) осуществляет гидролиз поли-, олиго-, динуклеотидов и динуклеозидофосфатов, вызывая разрыв фосфодиэфирной связи и последовательное отщепление нуклеозид-монофосфатов с конца цепи со свооодной 3-гидроксильной группой.Известен способ определения внутриклеточной локализации экзонуклеазы путем фиксации исследуемого объекта в парах формалина, промывки в дистиллированной воде и инкубации в среде, содержащей субстрат, буфер, раствор нитрата свинца и дистиллированную воду,Однако известный способ недостаточно точен и не дает специфичности индикации.В предложенном способе в отличие от известного в качестве субстрата в инкубационную среду вносят никотинамидадениндинуклеотид.П р и м е р. Для определения внутриклеточной локализации экзонуклеазы (фосфодиэстеразы 1) свежеприготовленные и высушенные на воздухе мазки крови и костного мозга крыс фиксируют в парах 10%-ного нейтрального формалина в течение 3 миа и помещают в инкубационную смесь, содержащую 5 мг никотннамидадениндго яда, 10 мл ( о буфера (рН 7,5ра нитрата сви У (до 25 мл),Мазки инкубируют в термостате при 37 С в течение 3 час, промывают дистиллированной водой и погружают на 2 мак в разведенный сульфид аммония. После промывания мазки сушат н микроскопируют. Б процессе обработки мазков внутриклеточная экзонуклеаза (фосфодиэстераза 1) вызывает гидролиз никотинамидадениндинуклеотида, содержащегося в инкубационной смеси. Образующийся при этом аденозин-монофосфат специфически расщепляется нуклеотидазой, являющейся действующим началом диализированного и лиофилизированного змеиного яда, и остатки фосфорной кислоты связываются ионами свинца. Полученные соединения затем переводятся в сульфид свинца, который обнаруживается при микроскоппровании, Места его отложения отражают локализацию активности экзонуклеазы (фосфодпэстеразы 1) . Способ определения внутриклеточной локализации экзонуклеаз, например фосфодиэстео разы 1, путем фиксации исследуемого объекта331276 Составитель 3. Вальковская Текред 3. Тараненко Корректор Е. Зимина Редактор Д. Пинчук Заказ 93,8 Изд. Мв 347 Тираж 448 Подписное ЦН 1 ЛИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр, Сапунова, 2 в парах формалина, промывки в дистиллированной воде, инкубации объекта в среде, содержащей субстрат исследуемого фермента, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности индикации и точности локализации фермента, в качестве субстрата в инкубационную среду вносят никотчнамидадениндинуклеотид.
СмотретьЗаявка
1492693
Д. Ф. Глузман, Киевский научно исследовательский институт экспериментальной, клинической онкологии
МПК / Метки
Метки: внутриклеточной, локализации
Опубликовано: 01.01.1972
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-331276-sposob-opredeleniya-vnutrikletochnojj-lokalizacii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения внутриклеточной локализации</a>
Предыдущий патент: 331275
Следующий патент: Устройство для испытания образцов грунта, бетона и т. п. на одноосное сжатие
Случайный патент: Устройство для извлечения отъемных частей модели