ZIP архив

Текст

1О П И С А Н И Е 35276ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Соаетских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельстваМ Кл б 01 п 1/28 Заявлено 26.Х.1970 ( 1492692/31-16)с присоединением заявкиПриоритетОпубликовано 21,Х,972, Ьюллетень28Дата опубликования описания 11.Х.1972 Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Мииистрое СССРЗаявитель СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ ФОСФОДИЭСТЕРАЗЪ 1120 Предмет изобретения Изобретение относится к области гистохимии ферментов, в частности к способам определения внутриклеточной локализации фосфодиэстераз.Известны способы определения внутриклеточной локализации фосфодиэстераз путем фиксации объекта в парах формалина, инкубации, промывки, обработки сульфидом аммония, сушки и микроскопирования.Однако такие способы не позволяют определить внутриклеточную локализацию фермента фосфодиэстеразы 11.В предложенном способе в качестве субстрата используют витамин Вд, который вносят в инкубационную среду, что позволяет определить внутриклеточную локализацию фосфодиэстеразы 11.Для определения внутриклеточной локализации фосфодиэстеразы 11 свежеприготовленные и высушенные на солнце мазки крови или костного мозга фиксируют в парах 10%-ного формалина в течение 3 мин и помещают в инкубационную смесь, содержащую: 5 мг витамина Вд, 0,05 мг змеиного яда;12,5 мл 0,1 М веронал-ацетатного буфера (рН 6,75); 0,125 мл 0,4 М раствора нитрата свинца и дистиллированную воду.Мазки и отпечатки инкубируют в термостатс при 37 С в течение 16 час, промывают дистиллированной водой и погружают на 2 мин в разведенный сульфид аммония. После промывки мазки сушат и микроскопируют.5 В процессе обработки мазков фосфодиэстераза 11 вызывает гпдролиз молекул витамина В 1 ь содержащегося в инкубационной смеси, Образующиеся рибонуклеозид-фосфаты расщепляются нуклеотидазой, являющейся дей ствующим началом диализированного и лиофилизированного змеиного яда, и остатки фосфорной кислоты связываются ионами свинца. Полученные соединения затем переводятся в сульфид свинца, который обнару живается при микроскопировании. Места егоотложения отражают локализацию активности внутриклеточной экзонуклеазы (фосфодиэстеразы) 11. Способ определения внутриклеточной локализации фосфодиэстеразы 11 путем фиксации объекта в парах формалина, инкубации, про мывки, обработки сульфидом аммония, сушки и микроскопирования, огличаюитийся тем, что в качестве субстрата фермента в инкубационную среду вносят витамин В,з.

Смотреть

Заявка

1492692

Д. Ф. Глузман, Киевский научно исследовательский институт экспериментальной, клинической онкологии

МПК / Метки

МПК: G01N 1/38, G01N 33/48

Метки: 352176

Опубликовано: 01.01.1972

Код ссылки

<a href="https://patents.su/1-352176-352176.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">352176</a>

Похожие патенты