293845

Сойа Соеетскик Сациалистическик РеспубликЗависимое от авт. свидетельства-Заявлено 27,Х.1969 ( 1373322/30-15)с присоединением заявки-ПриоритетОпубликовано 26,1.1971. Бюллетень6Дата опубликования описания ОХ 971 МПК С 120 13/06 но 8 итет по делам изобретений и открытий при Саеете Министрое СССРЪ ДК 57:547.466(088.8) ВСЕСОЮЗНАЯ Авторыизобретения Д. Ф, Петров, М. А. Шилова, И. С. Родынюк, Л, К. Смирнов и Л, Н. Изотова Биологический институт Сибирского отделения АН СССРИзобретение относится к области синтеза ве.цеств биологическим путем.Известны штаммы микроорганизмов, продуцирующие триптофан у бактерий Е. со 11. Вас. тпеда 1 ег 1 цтп и другие, которые синтезируют /.-триптофан из 3-индолпировиноградной кислоты, у дрожжей Напзепц 1 а, Сапйда, Тогца, которые используют для синтеза триптофана антираниловую кислоту и производные индола.Предлагается штамм Ако 1 оЬас 1 ег зц 1 з Ог., продуцирующий 1.-триптофан. Штамм получен в результате воздействия рентгеновскими лучами на А-вц 1 з. Ему присвоен номер Наа (СО АН СССР).Морфологические свойства. Культура нолиморфная. В молодом возрасте клетки имеют вид очень коротких палочек с округлыми краями размером 0,8 - 1 Х 2,5 - 3,2 лтк, затем укорачиваются, становятся кокковидными диаметром 1,2 - 1,5 мк. Подвижна, с полярными жгутиками. Жгутики встречаются чаще всего по одному или по два с одного конца. Грамотрицательна, спор не имеет.Физиолого-биохимические свойства. Культура является факультативным аэробом. На жидкой среде Эшби фиксирует азот до 2 - 2,3 иг на 1 г использованной глюкозы. Использует все сахара пестрого ряда с образованием кислоты и газа, Хорошо растет на средах с солями органических кислот в качестве источника углерода. Не образует индола, сероводорода, аммиака. Температурный оптимум 25 - 30 С, но хорошо растет и при 37 С.5 Культуральные свойства. Культура хорошорастет на белковых, синтетических средах с минеральными источниками азота, а также на безазотистых средах. Колонии на твердых белковых средах белого цвета с гладкой блестя щей поверхностью, с ровными краями, диаметром 1 - 4 ялт. Глубинные колонии мелкие, диаметром 1 - 2 м,ц, прозрачные, со слабым голубоватым флюоресцирующим пигментом. Края колоний ровные, поверхность гладкая. На 15 жидких белковых и синтетических средах -равномерная муть по всей толще. На четвертые-пятые сутки образуется пленка. Требования к питательной среде. Штамм вы соко специфичен. В синтетической среде требует для своего роста наличие тирозина и отличается очень высокой чувствительностью к данному ростовому фактору. Хороший рост культуры наблюдается уже при концентрации 25 тирозина в жидкой синтетической среде0,2 лкг/лл. Максимальный рост - при концентрации тирозина 10 лткг/лл. В отличие от исходного гомосерин-зависимого мутанта тирозин-зависимый мутант А-зцз На, способен да вать довольно хороший рост в жидкой средеРедактор 3. Твердохлебова Техред Л. В. Куклина Заказ 1153/19 Изд, Мв 429 Тираж 473 ПодписносЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Миьисгров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 при высоких концентрациях ростового фактора 400 - 500 мкг/мл,Продуцирующая способность. Способен синтезировать и выделять в культуральную среду триптофан. Первоначальная продуктивность мутанта 0,1 - 0,2 мкг/мл. В результате селекции 1 родуктивность его удалось повысить в пять раз до 0,5 - 0,6 г/л 1.-триптофана на третьи- четвертые сутки. Ферментацию предпочтительно проводить в колбах на качалке при 21 - 23 С, В качестве источника углерода можно использовать меляссу.Синтез Е-триптофана повышается в пять - семь раз при добавлении в ферментационную среду аналога триптофана-метилтриптофана в количестве 10 - 20 мкг/мл. В этих условиях мутант способен синтезировать до 3 - 4 г/л Е- триптофана. Другие аналоги триптофана, такие как 5-метилтриптофан, Х-ацетил-триптофан, Х-ацетил-р-метил-триптофан, подобного действия на предлагаемый штамм не оказывают. Предмет изобретенияШтамм Ако 1 оЬас 1 ег зц 1 з Ог. Нвв 1 СО АН СССР) - продуцент /.-триптофана.Мор ф о лог и я. Клетки штамма имеют вид коротких палочек с округлыми краями разме 4ром 0,8 - 1,0 Х 2,5 - 3,2 мк с полярными жгутиками по одному или по два с одного конца.Грамотрицателен. Спор не образует.Культуральные свойства. Отношение к кис лороду: аэроб. На твердых белковых средахштамм образует колонии белого цвета с гладкой блестящей поверхностью, ровными краями, диаметром 1 - 4 мм. На твердых синтети.ческих средах штамм образует колонии со 10 слабым голубоватым флюоресцирующим пигментом, ровными краями и блестящей поверхностью, На жидких белковых и синтетических средах - равномерная муть по всей толще питательной среды, Использует все сахара 15 пестрого ряда с образованием кислоты игаза. Оптимальная температура роста 25 - 30 С.Нуждается в и-оксифенилаланине 1 тирозине).20 Отличается способностью выделять в питательную среду триптофан до 0,5 - 0,6 г/л на третьи-четвертые сутки ферментации. Синтез 1,-триптофана повышается в пять-семь раз при добавлении в питательную среду ана лога триптофана - 3-метилтриптофана в количестве 10 - 20 мкг/мл соответственно. В этих условиях штамм способен синтезировать до 3 - 4 г/л -триптофана.