Способ определения степени зрелости икры рыб

( 9) аа,1 К 6 ГОСУДАРСТ ПО ИЗОБРЕ ПРИ ГКНТ С ЕННЫИ КОМИТЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМСР ОП И РЕТЕ, дФм:."л К АВТО ственный универ дство в естественромиздат, 1956, с,аааа МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(56) Черфас В.И. Рыбоных водоемах, У,: Пищ113,Изобретение относится к рыбоводству,а именно к проблеме определения степенизрелости икры рыб и может быть использовано в практике рыборазведения.,В данное время в рыбоводстве нет способа обьективного определения степенизрелости икры, Как правило, пользуютсявнешним осмотром производителя, определением его текучести (скорости выхода зрелой икры при нажатии на брюшнуюполость).Известен способ определения зрелостисамок и икры путем определений степениразмягчения и западания стенок брюшнойполости в заднем отделе при подьеме захвостовой стебель.Однако этот способ требует большогопрактического опыта работ ников, Кроме того, такое определение весьма субъективно.Иногда. кроме внешнего осмотра проводят исследования крови в процессе овогенеза, например, определяют гемоглобин.Известен способ определения зрелостиикры по ее размерам и по степени поляризации ядра.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ЗРЕЛОСТИ ИКРЫ РЫБ(57) Сущность изобретения: способ заключается в измерении интенсивности собственной флуоресценции икры, находящейся на разных стадйях зрелости, и при достижении стабильного уровня интенсивности икра считается зрелой. Для каждого вида рыб заранее устанавливают уровень максимальной интенсивности флуоресценции, Способ позволяет обьективно с большой точностью подбирать зрелых производителей. Наиболее близким является способ определения степени зрелости икры, включающий взятие пробы икры, установлениепоказателя, коррелирующего со степеньюзрелости икры, а затем путем сравненияполученного показателя с эталонным судято степени зрелости,Основным недостатком указанных способов является то, что они субьективны, неточны, требуют много времени в случае проведения двух последних определений,Цель изобретения - создание экспрессметода, позволяющего объективно, с большой точностью оп ределять степень1зрелости икры,Поставленная цель достигается путемизмерения интенсивности собственнойфлуоресценции икры, находящейся на разных стадиях зрелости При достижении стабильного уровня интенсивности икрасчитается оптимально зрелой. Для каждоговида рыбы устанавливают свой уровень максимальной интенсивности флюоресценции,П р и м е р. Работа выполнялась насамках вьюна одного возраста и одинакового1746960 35 Составитель Т.ШульгинаТехред М.Моргентал Корректор М.Демчик Редактор И.Кэсэрдэ Заказ 2447 Тираж Подписное8 НИИГ 1 И Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский. комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 веса, находящихся на разных стадиях зрелости икры: 1 -ооциты. И - незрелая икра,И - зрелая икра (после инъекции хориогонина).Образцы по 60 мг наи И стадиях брали, 5вскрывая брюшную полость, а на И 1 стадииобразец брали известным в рыбоводствеспособом, протыкая брюшину щупом,Измерение собственной флуоресценции икры проводили на спектрофлуориметре "Та 3 со, Р 1-550" при спектральномразрешении 3 нм (возбуждение) и 5 нм (испускание).Для измерения образцы готовили путемнанесения 40 икринок на внутреннюю поверхность треугольной кварцевой кюветы(каждый образец в свою кювету), после чегокювету накрывали, чтобы предотвратить высыхание образца, который оставался настенках кюветы в виде сплошного слоя в 20течение всего опыта,Спектры испускания флуоресценцииикры имеют характерный для белковой флуоресценции вид с Л =334 нм, а спектры возбуждения сильно структурированы с 25проявлением четкого пика при Л =293 нм.В процессе оогенеза .интенсивность флуоресценции растет в последовательности 1-.- И- И стадии развития. У зрелой икры интенсивность флуоресценции была наибольшей, 30что свидетельствует о суммарно высокомсодержании естественных флуорофоров . -триптофанилов в зрелой и текучей икре, Таким образом, интенсивность флуоресценции может быть использована как объективный и очень чувствительный метод при оценке степени зрелости икры,Как известно, процент оплодртворения в большей степени зависит от зрелости икры. Зрелость является основным показателем качества икры и определяет успех всех этапов рыбоводного процесса,Способ позволяет всегда точно подбирать зрелых производителей, что гарантирует 90 - 95% оплодотворения, в то время как базовым способом процент оплодотворения определяется в пределах 80-85 при условии большого практического опыта работников,Формула изобретения Способ определения степени зрелости икры рыб, включающий взятие пробы икры, установление показателя, коррелирующего со степенью зрелости икры, и суждение о степени зрелости путем сравнения полученного показателя с заранее установленным эталонным, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения объективности и точности способа, в качестве показателя, коррелирующего со степенью зрелости, измеряют интенсивность собственной флуоресценции икры, при этом к зрелой относят икру, у которой при сравнении показатель совпадает с эталонным, а за эталонный принимают максимальный уровень интенсивности флуоресценции,