Способ определения азотсодержащих примесей в биомассе

(19 ю)5 6 01 И Т ОБР ПИСАНИ К АВ итарного в в пищекой ССР. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР КОМУ СВИДЕТЕЛЪСТВ(71) Институт ядерной энергетики АН БССР (72) Л,Н,Жигунова, В.В.Полещук и И.А.Савушкин(56) Организация и методика сан контроля за содержанием нитратавых продуктах в условиях Белорусс Рекомендации, Минск, 1986.Спектрофотометрический метод определения нитратов в кор лах, мясе, молоке, - Гигиена и санитария, 1988, В 7, с. 43.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ПРИМЕСЕЙ В БИОМАССЕ (57) Изобретение относится к анализу материалов путем разделения на составные комИзобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для контроля азотсодержащих вредных примесей в воде, сельскохозяйственной продукции и других объектах окружающей среды после их выделения и разделения на тонкослойной хроматографической пластинке.Известен способ анализа азотсодержащих вредных примесей в биомассе, основанный на реакции диазотирования нитритов альфа-нафтиламином и сульфаниловой кислотой по Гриссу с образованием азокраски, с помощью фотоэлектрокалориметра при длине волны 540 нм с дальнейшим расчетом количества нитратов и нитритов по формуле, после гомогенизации и экстракции нитритов с 1,5 - 2 О-ной уксусной кислотой, подогретой до 50 С, нитратов поненты с использованием плоскостной хроматографии и может быть использовано для контроля за содержанием вредных примесей в объектах окружающей среды. Цель изобретения - увеличение селективности и сокращение времени опредления нитрит- и нитрат-ионов. Для этого анализируемую пробу фильтруют, наносят на хроматографическую пластинку, элюируют в системе ацетон - вода - этанол при соотношении компонентов 10:1:0,1,.повторно элюируют в перпендикулярном направлении в системе ацетон-концентрированный аммиак при соотношении компонентов 1:1, Затем пластинку подсушивают на воздухе и проводят количественное определение. Диапазон определяемых концентраций нитрит- и нит- Б рат-ионов составляет 30-3000 мкг/мл. юееЪ 0,1 н. соляной кислотой с последующим восстановлением их цинковым порошком до нитритов и очистки экстрактов гидроокисью алюминия, а в случае сильно мутных экс- Оф трактов - дополнительно активированным 4 углем, ОПродолжительность анализа для нитри- СО тов 1,5 ч, для нитратов 50 мин.Наиболее близким к изобретению является способ определения азотсодержащих вредных примесей в биомассе, включающий обработку пробы с получением фильтрата, содержащего нитрат - нитрит-ионы, проведение диализа с использованием целлофановой пленки (20 мкм), способной пропускать небелковые азотистые вещества, в том числе нитраты и нитриты (продолжительность диализа 2,5 ч при температуре не1728798 выше 250 С), использование реактива Грисса-Илосвая в качестве цветореагента иоценку интенсивности окраски раствора,Недостатками метода являются длительность выделения подготовки пробы к 5анализу и необходимость двойного измерения, Время анализа 1 сут,Целью изобретения является увеличение селективности и сокращения времениопределения азотсодержащих вредных 10примесей в биомассе.Поставленная цель достигается тем, чтоперед добавлением реактива Грисса-Илосвая фильтрат наносят на хроматографическую пластинку, элюируют в системе 15растворителей ацетон - вода - этанол присоотношении компонентов 10:1:О, затем после высушивания пластины элюируют в направлении, перпендикулярном кпервоначальному, в системе растворителей 20ацетон - концентрированный аммиак присоотношении компонентов 1:1, а о количестве исследуемой смеси судят по интенсивности окраски соответствующейхроматографической зоны, 25Способ осуществляется следующим образом,Из анализируемой пробы отделяютжидкую часть, фильтруют и фильтрат анализируют методом тонкослойной хроматографии (двумерное разделение). О количествеанализируемой примеси судят по интенсивности окраски соответствующей хроматографической зоны.П р и м е р, Навеску твердой биомассы 35гомогенизируют, отжимают сок и центрифугируют. Полученный фильтрат, содержащийнитраты, нитриды и органические вещества,и свидетели в одном пятне микрошприцомпо 0,01 мл наносят на пластинку Яойдо и 40помещают в камеру, предварительно насыщенную парами подвижной фазы. Хроматографирование ведут восходящимметодом в системе ацетон - вода - этанолпри соотношении компонентов 10:1:0,1(С - 451), при этом происходит отделение нитрит -нитрат - ионов от органического вещества.После элюирования пластинку с отделенной органической фазой высушивают, отрезают выделенную зону нитрат- и нитрит-ионов (сумма) и свидетелей (сумма) от мешающей органической фазы, разрезают по предварительно нанесенным линиям с одинаковым расстоянием до старта по числу образцов свидетелей в зависимости от размера пластины и повторно в направлении, перпендикулярном к первоначальному направлению элюирования, проводят хроматографирование в системе ацетон - концентрированный аммиак 1:1 (С - 2) для разделения нитрат-иона (Я = 1) от нитритиона (Я = О), Пластинку подсушивают и проявляют. Для экспресс-анализа сопоставляют площадь и интенсивность окраски зон нитрат- и нитрит-ионов, выделенных из исследуемого сока, со шкалой сравнения. Далее пятно снимают с подложки, элюируют и проводят количественное определение спектрофотометрическим методом,Диапазон определяемых концентраций нитрит- и нитрат-ионов предлагаемым способом составляет от 30 до 3000 мкг/мл. Формула изобретения Способ определения азотсодержащих примесей в биомассе, включающий обработку пробы с получением фильтрата, содержащего нитрит- и нитрат-ионы, добавление реактива Грисса-Илосвая в качестве цветореагента и оценку интенсивности полученной окраски раствора, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения селективности и сокращения времени определения, перед добавлением реактива фильтрат наносят на хроматографическую пластинку, элюируют в системе растворителей ацетон - вода - этанол при соотношении компонентов 10:1:0,1, затем после высушивания пластины элюируют в направлении, перпендикулярном к первоначальному, в системе растворителей ацетон - концентрированный аммиак при соотношении компонентов 1;1, а о количестве исследуемой примеси судят по интенсивности окраски соответствующей хроматографической зоны. 50 Составитель В.АгинскийТехред М.Моргентал Корректор М.Кучерявая Редактор Н.Рогулич Производственно-издательский комбинат "Патент", г,. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 1406 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж. Раушская наб., 4/5