Штамм coxiella вurnеттi, используемый для получения гипериммунных сывороток

(55 С 12 й 1/00, А 61 К 39/40 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ,г не мож антиге телСЬ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Вопросы инфекционной патологии и иммунологии, - М.: Медицина, 1976, с. 171-186,Асте ч гоо 9 у, 1987, т. 31. с. 156-157. (54) ШТАММ СОХЕЛ А ВОВИЕТТ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННЫХ СЫВОРОТОК Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в вакцинно-сывороточном производстве для приготовления диагностических препаратов.Известны зарубежные штаммы коксиелл Бернета "Найн Майл", "Хензерлинг" и др., однако они выделены более 30 лет назад, многократно пассировались на развивающихся куриных эмбрионах, что приводило к снижению их антигенной активности и возможному переходу фазового состояния.Известен штамм "М", используемый для производства живой вакцины и сухого корпускулярного антигена для реакции связывания комплемента, однако в результате длительного пассирования на куриных эмбрионах перешел во второе фазовое состояние, т.е. утратил некоторые антигенные(57) Использование: медицина, диагностика, микробиология - получение гипериммунных сывороток с целью идентификации коксиелл Бернета в первой фазе. Очищенную дифференциальным центрифугированием яичную культуру коксиелл в разведении 10с, интервалом в 3 дня вводят внутрибрюшинно кроликам. Первую инъекцию в объеме 0,5 мл, вторую 1 мл, третью 2 мл. Через 10 дней после последней иммунизации получают гипериммунную сыворотку, Сыворотка не реагирует с антигенами риккетсиальной природы (риккетсии Провачека, риккетсии Сибирина), не теряет своей чувствительности в течение 2-х лет. субстанции и ет вызывать образование антител к нам первой фазы коксиелл,Цель изобретения - получение штамма, обладающего выраженными антигенными свойствами и оЬусловливающего получениеЬ сыворотки с высоким содержанием анти к антигенам коксиелл первой фазы, ООПредлагаемый штамм коксиелл Берне- (Д та, названный "Вологда", выделен от овец в Вологодской области. Депонирован во Всесоюзном музее риккетсиальных культур научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им, Н.Ф.Гамалеи АМН СССР под М 105 от 25 мая 1989 г,Морфология и культуральные свойства. Коксиеллы находятся в первом фазовом состоянии, при окраске по РомановскомуГимзе и Гименец - морфология типичная,1724683 Составитель Н. ТокаревичТехред М.Моргентал Корректор М, Кучерявая Редактор Н. Яцола Заказ 1150 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 Культивируются в развивающихся куриных эмбрионах или в селезенках белых мышей. Наибольшее накопление возбудителя в оболочке желточного мешка при заражении 5-дневного куриного эмбриона получают при инфицировании их материалом, содержащим риккетсии в больших ко 5 нцентрациях , в разведении 10 -10 в объеме 0,4 мл.Патогенные свойства. При подкожном заражении морских свинок массой 300- 350 г 1,0 мл яичной культуры в разведении 10 вызывает развитие лихорадочной реакции продолжительностью не менее 3 сут.Антигенность. Антигенная активность штамма выражена: в ответ на однократное внутрибрюшинное введение кроликам массой 3 - 3,5 кг 1,0 мл яичной культурыв разведении 10, уже на седьмой день после иммунизации выявлялись с помощью реакции связывания комплемента (РСК) антитела к антигену первой фазы в титрах 1:20 - 1:40. Максимальная концентрация антител наблюдается на 21-23 дни после однократной иммунизации, в этот период титр антител составляет к антигену первой фазы 1;163-1:320, В дальнейшем концентрация антител постепенно снижается, однако и че-. рез 1 год после заражения (срок наблюдения) у большинства животных определяются антитела к первой фазе коксиелл (в титре 1:10-1:20). П р и м е р, Для получения гипериммунных сывороток частично очищенную от тканевых примесей дифференциальным центрифугированием яичную культурукок 7 сиелл штамма "Вологда" в разведении 5 10 последовательно с интервалом 3 днявнутрибрюшинно вводили кроликам массой 3-3,5 кг в объеме 0,5; 1 и 2 мл. Через 10 дн после последней иммунизации получали гипериммунную сыворотку. Титры антител у 10 животных, зараженных коксиеллами штамма "Вологда", к антигену первой фазы коксиелл составили 1:640 - 1:1280. Сыворотка нереагировала с другими антигенами риккетсиальной природы (риккетсии Проваче ка, риккетсии Сибирика), Сыворотка,хранившаяся в замороженном состоянии при -20 С не теряла своей активности на протяжении двух лет (срок наблюдения)Для сравнения антигенных свойств предла гаемого штамма с международным штаммом, аналогичным образом получали .сыворотку от кроликов, зараженных штаммом "Хензерлинг". Титр антител у этих животных к антигену первой фазы коксиелл 25 составил 1:80 - 1:320, т,е. был значительнониже, чем у животных, иммунизированных коксиеллами штамма "Вологда".Формула изобретения Штамм Сох 1 еИа Ьцгпеп "Вологда" НИ ИЭМ М 105, используемый для получениягипериммунных сывороток.