Способ определения наличия спермы в судебно-медицинском исследовании пятна

(51) 5 ТЕНИЯ К АВТО ИДЕТЕЛ ЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Астраханский государственный медицинский институт им. А.В.Луначарского(56) Авторское свидетельство СССРМ 946549, кл. А 61 В 10/00, 1980.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯСПЕРМЫ В СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОМИССЛЕДОВАНИИ ПЯТНА(57) Изобретение относится к области медицины, а именно к способам обнаруженияспермы в составе пятен при судебно-медицинском исследовании и других областях Изобретение относится к области меди-, цины, а именно к биохимии и может быть использовано в частности для обнаружения спермы в составе пятен при судебно-медицинском исследовании, в акушерско-гинекологических исследованиях, в андрологии,Целью изобретения является сокращение времени, повышение чувствительности анализа и упрощение способа.Способ осуществляют следующим образом.Экстракцию пятен проводят 30- 40 мин при 40-45 С., далее аликвоту экстракта смешивают с равнымобьемом 2-3-ного раствора формальдегида на веронал-мединаловом буфере и исследуют во встречном иммуноэлектрофорезе с моно- специфической антисывороткой к простатическому бета-глобулину (ПБГ) и при 2медицины. Цель изобретения - повышение чувствительности и сокращение времени анализа, упрощение способа. Материал с . пятном спермы измельчают, экстрагируют при 45 - 50 С в течение 30-40 мин, затем к экстракту добавляют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5 и проводят встречный иммуноэлектрофорез с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину и при появлении линии преципитации выявляют в пятне сперму, В сравнении с прототипом сокращается время анализа в 15 раз, чувствительность анализа - в 10 раз. При этом происходит упрощение способа эа счет исключения этапа центрифугирования,положительнои реакции судят о наличии спермы,П р и м е р . Кусочек марли с пятном белесого цвета размером не более 0,5 см измельчают ножницами и помещают в пробирку, содержащую 0,9 раствора хлористого натрия. Экстракцию проводят на водяной бане при 450 С в течение 40.мин. Затем отбирают из этой пробирки 10 мкг экстракта и в титровальной доске смешивают с 10 мкг 2-ного раствора формальдегида на веронал-мединаловом буфере. Далее на стеклянной пластине размером 5,0 х 20,0 см, залитой 1-ным агаром на веронал-медина- ловом буфере пробивают два ряда лунок диаметром 2,0 мм на расстоянии одного ряда от другого в 4,0 мм. Анодный ряд запол няют моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину, а катод1682931 Составитель В.ЛитовченкоТехред М.Моргентал Корректор В.Гйрняк Редактор Н,Бобкова Заказ 3409 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, )К, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 ный ряд - последовательными разведениями исследуемых образцов, Каждый образец берут в четырех разведениях 1/2; 1/16; 1/64 1/256), в каждую лунку вносят по 5 мкл. Как минимум в двух разведениях ставят в каждом опыте стандартный препарат ПБГ,Оценку результатов проводят через 30- 40 мин после завершения электрофореза, Исследуемый образец дает линию преципитации с антисывороткой в разведении 1/64 и 1/128. Делается заключение о наличии спермы в составе пятна.Предлагаемый способ дает возможность установить наличие спермы в самых разных смесях и пятнах, При этом время исследования сокращается от 30-40 до 23 ч, так как иммунодиффузионное определение простатического бета-глобулина заменяется встречным иммуноэлектрофорезом, а экстракция проводится при повышенной температуре. Эти изменения стали возможны после изучения физико-химиче" ских свойств ПБГ, Наряду с сокращением сроков исследования способ уменьшает набор необходимого оборудования, так как не проводится центрифугирование. Используется встречный .иммуноэлектрофорез, что повышает чувствительность способа в 10 раз (по известному способу удается об наружить сперму по концентрации ПБГравной 5 мкг/мл, а по предлагаемому способу - 0,5 мкг/мл). Формула изобретения 10Способ определения наличия спермы всудебно-медицинском исследовании пятна путем измельчения материала с пятном, экстракции, иммуноанализа и при наличии по лос преципитации с разведениямисыворотки к простатическому бета-глобулину определяют наличие спермы в пятне, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения сроков 20 анализа, упрощения способа, экстракциюпятен проводят при 45-50 С в течение 30- 40 мин, затем к экстракту добавляют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5, а иммуноанализ осуществляют с по мощью встречного иммуноэлектрофореэа.