Способ получения гидрокортизона

Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 10.1 Ч.1963 ( 830564/31-16с присоединением заявкил. 12 о, 25 ЗОЬ, 2 го Государственный комитет по делам изобретений и открытий СССРрнорит МП 7 с 11 с 12.Х 11,1964. Бюллетень24вания описания 15.1.1965 публико У Дата опубл АвторыизобретенияЗаявитель К. Никифорова, Л. А. Краснова и Е. Г, Балашоно-исследовательский химико-фармацевтическиинститут им. С. Орджоникидзе. Н. Суворов,Всесоюзный н ПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОКОРТИЗОН одписная группаИзвестны способы получения гидрокортизона с помощью культуры гриба АЬв 1 йа ОгсЬк 11 з на среде, содержащей кукурузный экстракт и глюкозу,При этих способах в качестве исходного продукта используют вещество Я Рейхштейна, которое обычно получают омылением его ацетата с использованием металлического натрия. Выход гидрокортизона при его получении из вещества Я Рейхштейна не превышает 50% от теоретического количества.Описываемый способ отличается от известных тем, что микробиологической трансформации подвергают ацетат вещества Я Рейх- штейна, Это позволяет увеличить выход целевого продукта и упростить процесс его получения. Посевной материал выращивают на среде, содержащей 5% глюкозы, 21% пептона и 0,3% кукурузного экстракта (на сухое вещество) при температуре 27 - 28 С в течение 48 час,Процесс микробиологического превращения ацетата вещества Я Рейхштейна в гидрокортизон проводят на среде, содержащей 1,1% кукурузного экстракта (на сухое вещество) и 2,5% глюкозы, с начальным значением рН = 5,2 - 5,8.П р и м е р. Микробиологический синтез осуществляют в стерильных условиях в ферментере из нержавеющей стали емкостью 250 л,снабженном пропеллерной мешалкой (90 об(мин), барботером для подачи воздуха, обогревом, отборником проб, воздушником, штуцером для введения стероида, загрузочным 5 и выгрузочным люками. Исходные споры куль.туры АЬз 1 йа ОгсЬ 1 йз выращивают на картофельном агаре или пшене на матрацах при 27 С в течение 7 дней, Выращенные споры в асептических условиях заливают стерильной 10 водой в количестве 200 мл на матрац и помещают в 14 литровых колб с 200 мл стерильной среды в количестве 2,6 109 спор на литр среды, В состав среды входит 5% глюкозы, 2% пептона и 0,3% кукурузного экстракта (на су хое вещество). Засеянные колбы помещают накачалку (200 об/лин) и выращивают культуру при температуре 27 - 28 С в течение 48 час.Микробиологическое превращение ацетатавещества Я Рейхштейна в гидрокортизон 20 проводят на среде, содержащей 1,1% кукурузного экстракта (на сухое вещество) и 2,5% глюкозы. В ферментер заливают 70 л указанной среды и стерилизуют ее при 118 - 120 С в течение 30 мин. Посевной материал в виде 2 двухсуточного мицелия асептически вводят вколичестве 2800 лл, выращивают в течение 36 - 38 час при непрерывной подаче стерильного воздуха (1 объем на 1 л среды в минуту) и температуре 26 - 27 С. Мешалка работает в 30 течение всего процесса, В отсутствии посто166926 Предмет изобретения Составитель В. Таратута Редактор П. Шлаии Техред Ю. В. Баранов Корректор Т. С, Дрожжина Заказ 3355/17 Тираж 625 Формат бум. 60 Х 901/, Объем 0,13 изд. л. Цена 5 коп. ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР Москва, Центр, пр, Серова, д. 4Типография, пр. Сапунова, 2 ранней микрофлоры в 32-часовую культуру вводят 1,5 г ацетата вещества 5 Рейхштейна, растворенного в 90 мл горячего (60 С) этанола с целью адаптации культуры к стероиду, Затем смесь разбавляют 30 л стерильной воды и вводят 6,5 г стероида в 390 мл этанола (60 С), через 4 час - 16,5 г стероида в 990 мл этанола, еще через 5 час 16,5 г стероида в 990 мл этанола и в заключение еще через 5 час 13,5 г стероида в 810 мл этанола. Через 10 - 12 час после введения последней порции ацетата вещества 8 Рейхштейна из ферментера отбирают пробу для хроматографического анализа на присутствие непрореагировавшего исходного продукта. В зависимости от качества кукурузного экстракта процесс ферментации заканчивается через 24 - 48 час. Содержимое ферментера переносят на друкфильтр, отжатый мицелий промывают водой, а культуральную жидкость вместе с промыв- ными водами экстрагируют хлороформом. Хлороформные экстракты упаривают досуха и из полученной смеси гидрокортизона и вещества эпи-г выделяют гидрокортизон кристаллизацией из метанола, После трех кристаллиза ций получают 24,4 г гидрокортизона с т. пл,209 - 215 С.По данным количественного анализа пре.вращение ацетата вещества 8 проходит с общим выходом 85 о 7 о (62% гидрокортизона и 10 38% вещества эпи), из которого получаюткортизон- а цетат. 15 Способ получения гидрокортизона с помощью культуры гриба АЫйа ОгсЫс 11 з на среде, содержащей кукурузный экстракт и глюкозу, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта и упрощения 20 процесса, микробиологической трансформацииподвергают ацетат вещества 8 Рейхштейна.