Способ получения 6-аминопенициллановой кислотыг,; -•.; q1. и1-1: . “ллзтка

ОПИСАНИЕ 17389 ОИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик Зависимое авт. свидетельства М Кл. 30 Заявлено 18.711,964 ( 912825 г 31 ем заявки М присоедин Государственныйомитет ло деламизобретений ЬПК А 611 сУДК 615.779.90,002.2(088,8) Прпорите 06,Ч 11,1965. Бюллетень М 16вания описания 29,1 Х,1965 публиков Дата опубл Авторыизобретения М. М.К, И. В, А, Готовцева ая, Е, М. Савицкая И, Клейнер, Р, И. И й научно-исследова и Рижский завод ме О. Д Н, Н. фо и А.Н,Шн г, Г, Ф. 3 -Плетман нтибиотик ов Левитов Клаповс ская, Г, есоюзнь Юдина,1 Целленбе Б, Денд ерсон, вилейЗаявител ельскиидицински ститут препар ОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 6-АМИНОПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ -"КИСЛОТЫ, под- титееппым ушного а 2%, оводят енную в каОпасная ггчачаа Ло 130 Известны способы получения 6-аминопенициллановой кислоты путем ферментативного )идролиза пенициллина с помощью культуры микроорганизма Е, со 11, полученной на питательной среде, содержащей кукурузньш экстракт и фепилуксусную кислоту. Использование их призодит к образованию незначительного количества фермента и для гидро- лиза растворов оензилпенициллина достаточно высокой концентрации требуется большое количество микробной массы.По предлагаемому способу микроорганизм Е, со 11 многократно (10 - 30 раз) пассируют на агаризованной среде, содержащей кукурузный экстракт. Полученной культурой засевают жидкую питательную среду, выдерживают при температуре не выше 26 С, отделяют биомассу и гидролизуют ею растворы пенициллина. После удаления примесей при значении рН раствора 2 - 3 выделяют целевой продукт при рН около 4,1 - 4,3. П р и м е р, Исходную культуру Е. со 1 держиваемую на полужидком агаре Хот ра, пересеивают в пробирки со скош агар ом следующего состава; кукур экстракта 2% (по сухому весу), агар р 1-1 7. Пассажи на указаной среде пр ежедневно, После 15 пассакей получ активироваппую культуру используютчестве посевного материала для ферментациимикробной массы.Ферментацию осуществляют в коническойколбе емкостью 750 мл, содержащей 100 мл 5 стерильной питательной среды (2%-ного кукурузного экстракта). Засев производят смывом одного агарового косяка пассированной культуры Е. со 11 (штамм 9637), после чего смесь инкубируют на круговой качалке в те чение 18 час прп 24 С. Инокулят асептическипереносят в 70 л питательной среды, содержащей 2% ку.курузного экстракта и 0,05% фенилуксусной кислоты. После ферментации при 23 - 24 С в течение 18 час с аэрацией 15 (0,5 - 1,0 объем воздуха на 1 объем среды вминуту) биомассу отделяют сепарацией.Полученную микробную массу суспендируют в 20 л 6%-ного раствора бензилпенициллина и, регулируя рН добавлением водного 20 раствора аммиака на уровне 7,2 - 7,8. выдерживают при перемешиванпи в течение 5 - 6 час гри 40 - 42 С.Гидролизную жидкость охлаждают до 4 -6"С, подкисляют до рН 2, отделяют мпкроб ную массу сепарацией и подщелачивают прозрачный раствор аммиаком до рН около 4,1 - 4,3. Выпавший кристаллический продукт отфильтровывают, промывают ацетоном и сушат. Получают 440 г препарата с содержа- ЗО нием основного вещества 910 мкг,мг, что173890 Предмет изобретения Составитель В. А. Таратута Редактор Б. А. Шнейдерман Техред А. А, Камышникова Корректор П. Е. МарианнЗаказ 2385,7 1 ира;к 450 Формат бум, 60 Х 90/8 Объем О, изд. л. Цена 5 коп. ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССг Москва, Центр, пр, Серова, д. 4Типография, пр. Сапунова, 2 соответствует 550;в-ному выходу на исходныйбензилпенициллин. Способ получения 6-аминопенициллановой кислоты путем ферментативного гидролиза пенициллина с помощью культуры микроорганизма Е. со 11, полученной,на питательной среде, содержащей кукурузный экстракт и фенилуксусную кислоту, отличающийся тем,что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения способа его получения, микроорганизм Е. со 11 пассируют многократно (10 - 30 раз) на агаризованной среде, со держащей кукурузный экстракт; полученнойкультурой засевают жидкую питательную среду, выдерживают при температуре не выше 2 бС, биомассу отделяют, гидролизуют ею растворы пенициллина, удаляют примеси при 10 рН 2 - 3 с последующим выделением целевогопродукта при рН около 4,1 - 4,3.