Способ определения т-лимфоцитов в крови у птиц

Номер патента: 1635135

Авторы: Алиев, Барклай-Де, Сухинин, Шабанова

ZIP архив

Текст

(51)5 6 01 Й 33/48 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР 22 г 1, .ль. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Всесоюзный научно-исследовательскийветеринарный институт птицеводства и Ленинградский государственный институт усовершенствования врачей им. С.М, Кирова(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ Т-ЛИМФОЦИТОВ В КРОВИ У ПТИЦ Изобретение относится к ветеринарии, я частности к иммунологии птиц,и касается количественной оценки Т-системы иммунитета. Цель изобретения - упрощение способа количественного определения Т-лимфоцитов в крови птиц и повышения его точности.Способ осуществляют следующим образом.Лимфоциты из гепаринизированной (25 ед/мл) крови птиц выделяют центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографина (б = 1,082) при 1500 об/мин в течение 35 мин, Собранные иэ интерфазы лимфоциты трижды отмывают средой 199 в течение 5 мин при 1500 об/мин и доводят концентрацию лимфоцитов до 2 - 3 млн/мл.Для определения Т-лимфоцитов птиц к 0,1 мл суспензии лимфоцитов добавляют равный обьем трижды отмытых средой 199 эритроцитов барана в соотношении 1:10. Й 2 1635135 А 1(57) Изобретение относится к ветеринарии, в частности к иммунологии птиц, и касается количественной оценки Т-системы иммунитета, Цель изобретения - упрощение способа количественного определения Т-лимфоцитов в крови у птиц и повышение его точности. Исследуемую суспенэию лимфоцитов крови птиц инкубируют с эритроцитами барана в присутствии 0,4-0,6 глютарового альдегида в течение 18-20 ч при 4-6 С, после чего готовят мазки и подсчитывают количество лимфоцитов, образующих спонтанные розетки. 2 табл,Смесь инкубируют при 37 С в течение 20 мин в термостате, а затем центрифугируют при 800 об/мин в течение 5 мин, добавляют 0,1 мл 0,6-ного глютарового альдегида и инкубируют при 4 - 6 С в течение 20 ч. Затем смесь отмывают от глютарового альдегида дистиллированной водой, а из осадка готовят мазки, которые высушивают, фиксируют метиловым спиртом в течение 5 мин и окрашивают по Романовскому-Гимза в течение 35 мин. Подсчитывают 200 - 300 лимфоцитов и вводят процент роэеткообраэующих клеток (РОК).При всех опытах лимфоцитов птицы с эритроцитами барана инкубируют при 37 С в течение 20 мин. В дальнейшем инкубацию смеси проводят при 4-6 С при разных экспозициях. Оптимальным условием для выявления спонтанного роэеткообразования является инкубация комплекса лимфоцитэротроцит при 4 - 6 С в присутствии 0,5- ного глютарового альдегида в течение 20 ч.1635135 Таблица 1 Таблица 2 Составитель С.СветлышевТехред М,Моргентал Корректор Редактор А.Ревин Заказ 754 Тираж 413 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035. Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Наибольшее число РОК (53,5 +0,2)выявляют при добавлении к смеси 0,1 мл глютарового альдегида в концентрации 0,6, наименьшее(46,2 +. 0,2;6) - при 0,2- ной концентрации препарата.В табл. 1 приведены данные, характеризующие количество реэеткоовраэующих клеток птиц в процентах в зависимости отвремени инкубации при 4-6 С.Результаты определения числа спонтанных РОК у птиц в зависимости от концентрации глютарового альдегида приведены в табл, 2,Формула изобретения Способ определения Т-лимфоцитов вкрови у птиц. включающий взятие крови, получение суспенэии лимфоцитов, поста новку реакции идентификации Т-лимфоцитов иее оценку, отл и ча ю щийс ятем, что, с целью упрощения и повышения точности, реакцию идентификации осуществляют путем инкубации суспенэии лимфоцитов 10 с эритроцитами барана в присутствии0,4 - 0,6-ного глютарового альдегида в течение 18 - 20 ч при 4-6 С, а оценку проводят по розеткообраэованию.

Смотреть

Заявка

4120370, 18.06.1986

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ПТИЦЕВОДСТВА, ЛЕНИНГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ВРАЧЕЙ ИМ. С. М. КИРОВА

АЛИЕВ АЛАУТДИН СРАЖУТДИНОВИЧ, СУХИНИН АЛЕКСАНДР АЛЕКСАНДРОВИЧ, ШАБАНОВА ЛЮДМИЛА ФЕДОРОВНА, БАРКЛАЙ-ДЕ-ТОЛЛИ МАРИНА НИКОЛАЕВНА

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: крови, птиц, т-лимфоцитов

Опубликовано: 15.03.1991

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1635135-sposob-opredeleniya-t-limfocitov-v-krovi-u-ptic.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения т-лимфоцитов в крови у птиц</a>

Похожие патенты