Способ определения концентрации белка

Номер патента: 1553904

Авторы: Гаврилов, Конев, Никольская

ZIP архив

Текст

(19) 01) 1)5 С 01 Н 33/6 ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ НОМИТЕПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН А 8 ТОРСЙОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СПБЕЛКА НЦЕН 57) Изобретение отно частности к способа онцентрации белка втс иохимииения оп следуемых ние относится к биохимии,методам определения белка в исследуемых жид Изобрете астности онцентраостях,о- и ь(56) Апа 1 уер, 605-611. Цель изобретения - повышение точности способа.Поставленная цель достигается тем что в реакции используют бромфенол вый синий в концентрации 5-8 х 10 М цитратный буфер с рН 3,0-3,2.На чертеже изображена зависимост величины оптической плотности от кон центрации белка.П р и м е р 1. К 2,7 мп реактива (5 мг БФС + 11 мл зтанола + 89 мл 0,05 М цитрат-буфера, рН 3,0) добав-. ляют 0,3 мп раствора сывороточного альбумина человека. Интенсивно перемешивают и через 1-2 мин измеряют по глощение при Ь= 610 нм. П0,475 костях. Цель изобретения - повышениеточности способа. Для определения концентрации белка готовят водный раст"вор бромфенолового синего, содержащий 10-13,5 об.Х зтанола, и к немудобавляют 1/5-1/20 объемную часть раствора белка, Реакпию проводят в цитратном буфере при рН 3,0-3,2 и концентрации красителя 5-8 10-гМ. Содержание белка определяют путем измерения оптического поглощения комплексовбелка с красителем при Л 610 нм. Величина поглощения линейно зависит отконцентрации белка в диапазоне 10100 мкг/мп (по сывороточному альбумину человека). 1 ил. против контрольной пробы (2,7 мп реак" тива + 0,3 мл НО), Затем измеряют поглощение стандартной пробы, к ко- р торой быпо добавлено 0,3 мп сывороточного альбумина человека с концентрацией 0,5 мг/мп- стандарт (С ). П0,264. Определяют концентрациюбелка в исследуемом растворе по уравнению С= 0 С /О = 0,4750,5/0,264 = 0,90 мг/мп,П р и м е р 2, Процесс ведут аналогично примеру 1, за исключением того, что используют следующие концейтрации сывороточного альбумина человека (САЧ): 10,20,40,60,80,100 мкг/мп. При увеличении концентрации САЧ от 10 до 100 мкг/мл оптическая плотность Р, линейно возрастает от 0,053 до 0,528.1553904 О,Ч тавитель Л.Сабуровахред Л.Сердюкова Корректор Н.Ревс едактор Л.Пчолинская Т Заказ 45ВНИИПИ Г Тирак 507 Подпис ное ударственного комитета по изобретениям и открыт 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4и ГКНТ СССР роизводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,30 Таким образом, линейная зависимость оп ического поглощения от концентраци белка сохраняется в диапазоне 10 г 100 мкг/мп.В то ие время в спосо 5 бе"прототипе линейная зависимость ме)кду 0 и С . раблюдается только дл узкого дйапазона концентраций белка (10-20 мкг/мп) и при Селк40 мкг/мл отклонение В от линейной зависимости составляет уке 123. Формула изобретенияСпособ определения концентрации белка путем добавления к пробе с белком броифенолового синего, растворенного в 10-13, 53-ном подкисленном этаноле споследующнм спектрофотометрированием при длине волны 610 нм, о тл и ч а ю щ и й с н тем, что, с целью увеличения точности способа, реакцию проводят в цитратном буфере с рН 3,0-3,2, а бромфеноловый синий добавляют в концентрации 5-8 х 10 М.

Смотреть

Заявка

4445386, 20.06.1988

ИНСТИТУТ ФОТОБИОЛОГИИ АН БССР

ГАВРИЛОВ ВИКТОР БОРИСОВИЧ, НИКОЛЬСКАЯ ВАЛЕНТИНА ПЕТРОВНА, КОНЕВ СЕРГЕЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/68

Метки: белка, концентрации

Опубликовано: 30.03.1990

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1553904-sposob-opredeleniya-koncentracii-belka.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения концентрации белка</a>

Похожие патенты